Продажа квадроциклов, снегоходов и мототехники
second logo
Пн-Чт: 10:00-20:00
Пт-Сб: 10:00-19:00 Вс: выходной

+7 (812) 924 3 942

+7 (911) 924 3 942

Содержание

Авто ока ремонт своими руками

Мы постараемся ответить на вопрос: авто ока ремонт своими руками по рекомендациям подлинного мастера с максимально подробным описанием.

3-дверный 4-местный хэтчбек особо малого класса с поперечным расположением двигателя и приводом на передние колеса. Выпуск Оки начат в 1989 году на Волжском автомобильном заводе. Двигатель – двухцилиндровый рабочим объемом 650 куб.см., в 1997 году увеличен до 750 куб.см. объем. В настоящее время пролизводство автомобилей Ока передано Камскому автомобильному заводу, а также Серпуховскому автозаводу. Кроме базовых моделей КамАЗ-11113 и СеАЗ-11113, предлагаются варианты с ручным управлением, предназначенные для инвалидов. Благодаря очень низкой цене представляет интерес для экспорта.

Эта небольшая машинка была разработана на волжском автозаводе для “корпоративного” выпуска на трех заводах – ваз, КамАЗ и СеАЗ (в инвалидном варианте). На волжском автомобильном выпускается с 1990 года.

Нет тематического видео для этой статьи.

Видео (кликните для воспроизведения).

Отличительные особенности – скромные габаритные размеры, передний привод, двухцилиндровый двигатель с рабочим объемом 650 кубических сантиметров (“половинка” “восьмерочного” мотора), универсальный трехдверный кузов со складываемым задним сиденьем.

Позже появилась модификация 11113 с более мощным двигателем 0,75 литра. Кроме того, на базе “Оки” разработан электромобиль, штучно собирающийся в Опытно-Промышленном Производстве.

Несколько лет назад на волжском автозаводе выпуск “Оки” прекращен, теперь ее производят только КамАЗ и СеАЗ, хотя силовые агрегаты (только 0,75 литра) по-прежнему производит только ваз.

Автомобиль Ока начал выпускаться достаточно давно и заслужил немалую популярность среди отечественных автолюбителей. Конечно, технические характеристики рассматриваемой машины далеки от требований современного автолюбителя. Несмотря на это, в свое время Ока пользовалась большой популярностью благодаря присущей ей экономичности. Владельцы автомобиля Ока ранних годов выпуска, нередко сталкиваются с неисправностями двигательной системы. Это легко объяснить сроком службы и условиям эксплуатации транспортного средства. Одним из наиболее действенных способов вернуть транспортному средству работоспособность – капитальный ремонт двигателя Ока или ВАЗ 11113. Выполнить ремонт своими руками достаточно сложно, поскольку для многих процессов понадобится наличие дорогостоящего оборудования. В целях экономии можно осуществить подготовку Ока к капитальному ремонту своими руками.

Преимущества капитального ремонта очевидны. Масштабный ремонт движка позволит: увеличить срок эксплуатации транспортного средства, повысить ресурс мотора и увеличить его производительность.

Первым этапом капитального восстановления является подробная диагностика ДВС. Выполнить проверку в условиях гаража достаточно сложно. Для того чтобы определить продуктивность двигателя потребуется наличие компьютерного оборудования и соответствующих навыков.

Для выполнения полного восстановления движка, необходимо демонтировать устройство автомобиля. Выполнить данную процедуру своими руками не так просто, несмотря на небольшие габариты мотора. Во избежание повреждений движка, необходимо использовать целый ряд специализированного оборудования: опорные рамы, гидравлический съемник, устройство для вывешивания движка.

После того как демонтаж двигателя успешно произведён, необходимо приступить к его разборке. Разбирать двигатель необходимо строго по определённому порядку, для того чтобы предотвратить повреждения отдельных его частей.

После разборки, необходимо приступить к важнейшему этапу капитального ремонта, который заключается в дефектовке отдельных компонентов ДВС. Основная цель капитального ремонта, вернуть элементам транспортного средства заводские параметры. Поэтому единственно верным руководством по ремонту Ока является оригинальная инструкция завода изготовителя.

Нет тематического видео для этой статьи.
Видео (кликните для воспроизведения).

В ходе масштабного восстановление мотора ВАЗ 11113, в обязательном порядке выполняются следующие процедуры:

  • Восстановление параметров блока цилиндров ВАЗ 11113.
  • Ремонт входных отверстий коленчатого вала и распредвала.
  • Восстановление опорной части коленвала.
  • Обработка головы блока цилиндров ВАЗ 11113.
  • Возврат герметичности блока путём сварки.
  • Правка геометрии шатуна.
  • Замена всех расходных элементов и резиновых уплотнителей.

Масштабный ремонт автомобиля требует соответствующих навыков и дорогостоящего оборудования. Поэтому, для того чтобы выполнить восстановление придётся обратиться к профессионалам.

Одним из важнейших этапов восстановления движка является обработка ГБЦ. Производитель транспортного средства указывает допустимый предел обработки головы, которого необходимо строго придерживаться при проведении ремонта. Перед тем как приступить к масштабному ремонту, необходимо подробно изучить комплектующую инструкции завода изготовителя. Также, в обязательном порядке стоит уточнить у мастера на какую глубину будет производиться обработка ГБЦ. В случае если элемент изношен выше допустимого предела, дальнейшая эксплуатация головы блоков запрещается. Если же обработка и восстановление ГБЦ возможны, работа сопровождается обязательной заменой прокладки ГБЦ. В данном случае, так же необходимо учитывать глубину обработки элемента для того чтобы придать блоку первозданную герметичность.

Для восстановления ДВС ВАЗ 11113 к заводским параметрам, рекомендуется пользоваться услугами проверенных мастерских. Капитальный ремонт достаточно сложная и трудоемкая процедура, которая должна проводиться квалифицированными мастерами. Перед проведением ремонта, необходимо здраво оценить затраты на восстановление. Некоторые автолюбители забывают оценить разницу между восстановлением элемента и его заменой. При критическом износе двигателя затраты на ремонт вполне могут превысить первичную стоимость ДВС. При необходимости замены отдельных элементов транспортного средства, стоит использовать только оригинальные запчасти от производителя.

После проведения ремонта стоит приступить к обкатке автомобиля. На период обкатки, необходимо предотвратить повышенную нагрузку на двигательную систему. В противном случае затраты на восстановление двигателя не оправдают себя и транспортное средство ВАЗ 11113 вновь утратит свою работоспособность.

Удачного восстановления автомобиля ВАЗ 11113!

Привет всем! Как и обещал пилю 2-ю часть полностью. В этом посту действия уже проходят в 2014 году. Как долго я ждал потепления, что бы заняться машиной, и вот оно наступило.

Начал я свой ремонт с продолжения косметическо-сварочных работ.

Для начала решил сделать ей злые глазки, так сказать Bad boy капот) Получилось отлично метал брал 1.5мм. Вырезал по трафарету из листа железа и обточил на наждаке, далее приварил их к капоту.

Низ дверей немного прогнил, пришлось варить.

Вырезал из жестянки уголок и примерил его.

Приварил его к двери, всё получилось довольно аккуратно. Капли от сварки сточил болгаркой. Та же самая операция была произведена и с другой дверью, так же заварил все дыры на задней хлопушки кроме замка. Теперь заднего дворника не будет и эмблемы ОКА тоже.

Зачистил все рыжики на кузове.

Началась разборка. За вечер мы с другом её всю раскидали.

Вот собственно лучший друг в роли помощника)

После разборки началась шпатлёвка. Начал с крыльев. Первый слой был алюминиевой шпатлёвки для создания крепости и т.п. Как я замучился её тереть, но результат стоил того)

Вот конечный результат. Второй слой был мягкой шпатлёвки. На этом я закончил с крыльями.

Далее начал шпатлевать все двери.

С крышей я кончено намучился, но за 2 дня она была готова)

Капот. Изюминка автомобиля. Его я тоже снимал, на работу с ним ушёл день.

Со шпатлёвкой вроде закончено) Переходим к покрасочным работам. Началась замывка авто четырёхсотой наждачкой, внутри тоже замывал так как цвет будет другой. Далее грунт, фото автомобиля в грунте к сожалению нет. Начинается опять замывка только уже не старой краски, а грунта. И наконец начинается то чего я так долго ждал, покраска)

Первые фото после покраски:) Я был счастлив, но красил не я, а отчим. Такой навык у меня появился позже когда покрасил машину другу) Цвет называется “Медео 428” Хотелось чего то необычного, что бы выделялась среди серых мышек.

И конечно же автограф как же без него )

Дальше сборка автомобиля, фото тоже к сожалению нет.

Полностью собрана снаружи. Новые бампера и всякая мелочь. Салон ещё пустой. Фоткал на 2.5 мегапискеля) За качество извиняйте.

Обтяжка боковушек. Дермантин добыл у бабушки в шкафу, всё садил на скобы и клей.

Готовый вариант, также обтягивал торпеду и задние кусочки.

Если ваша «ОКушка» плохо работает, стреляет, чихает, то не откладывая в долгий ящик ремонт, произвести настройку работы двигателя ВАЗ 1111 Oka.

Ремонт ОКИ следует начать из системы зажигания. Проверка свечей высоковольтников и т.д. Затем осмотреть карбюратор (детальная дефектовка). После чистки произвести подстройку (регулировку) карбюратора. Когда такие процедуры будут выполнены, Вы наверняка ощутите разницу.

Подпишись на наш канал в Я ндекс.Дзене

Еще больше полезных советов в удобном формате

Машина захлебывается на горячую

датчик хола замените и отрегулируйте качество

Уважаемый Наиль.Ваши ролики мы посмотрели,но причину “черных” свечей не поняли у своей машины.Ока 2001г выпуска.В этом году возили ее к 2 карбюраторщикам,перебирали,но не через некоторое время она опять глохнет на малых оборотах и чихает черными выхлопами. Пишу от имени супруга тк он глухонемой.Ждем от вас подсказку.Живем в Самарской обл.До Димитровграда на ней не доедем.

Содержание: Общая схема Разделение по назначению КИП Деление по функциям.

Содержание: Типы приборов, устанавливаемых на ВАЗ-1111 Общая конструкция Схема подключения.

Содержание: Привод Педаль, усилитель Главный цилиндр Регулятор, магистрали Рабочие механизмы.

Содержание: Конструкция подвески Особенности и качества Задняя подвеска Неисправности и.

Содержание: Основные компоненты Как все работает Основные поломки Ведомый диск.

Содержание: Основные параметры Общая конструкция КПП и ее привода Демонтаж.

Содержание: Конструкция Датчик момента искрообразования Коммутатор Катушка Провода, свечи Как.

Содержание: Модели, характеристики, место расположения Конструкция Схема подключения. Принцип работы.

Содержание: Конструкция и составные части Крышка Основной корпус Корпус заслонок.

Содержание: Признаки неисправности Система питания Система зажигания Система охлаждения Система.

Содержание: Общая конструкция Каналы и магистрали Поддон, щуп, маслозаборник Насос.

Содержание: Когда менять, что заливать и в каком объёме? Требуемое.

Содержание: Общее описание Блок цилиндров Головка блока цилиндров (ГБЦ) Газораспределительный.

Содержание: Когда требуется демонтаж головки блока? Инструмент Порядок действий Особенности.

Содержание: Особенности устройства ГРМ Когда нужно проводить регулировку? Что потребуется.

Содержание: Модификации двигателей Особенности ремонта и обслуживания Что потребуется Метод.

Содержание: Подготовка авто для зимнего периода Запуск мотора с карбюраторной.

Содержание: Оснащение и инструменты Снятие навесного оборудования Затем нужно переместиться.

Содержание: Короткая предистория Идентификация автомобиля Габаритные параметры Двигатели и трансмиссии.

© 2013-2018. Все права защищены. Копирование, размещение и нарушение аутентичности материалов ЗАПРЕЩЕНО и будет преследоваться законом

Очень часто нам звонят или пишут с вопросом – “на сайте вы показали такое количество доработанных двигателей, а делаете ли вы стандартный капитальный ремонт?
Ответ – ДА, делаем!

Но на сайте ранее как-то не выкладывались отчеты с примерами капитального ремонта – мы считаем эту работу несложной и не писали по ней отчеты – считалось само собой разумеющимся, что мы производим и обычный капремонт тоже.

Однако, после увеличившегося количества вопросов на эту тематику, мы решили подробно показать стандартный капитальный ремонт, так сказать, из “палаты мер и весов”.

Каковы причины стандартного капремонта, почему бы не сделать тюнинг, форсирование двигателя? Ответ прост – тюнинг нужен не всем и не всегда. Нередко клиента параметры серийного двигателя вполне устраивают, но его ресурс исчерпан. Клиенту нужен хороший и качественный ремонт, бюджет зачастую ограничен, а ресурс нужен высокий. Таким клиентам мы предлагаем типовой капитальный ремонт двигателя, однако, с некоторыми небольшими доработками, которые кардинально влияют на ресурс двигателя и давно опробованы нами на тюнинговых проектах.

Рассмотрим далее такую работу во всех подробностях.

Итак, наш клиент привозит автомобиль Ока, с двухцилиндровым двигателем 11113, объем 0.75 литра. Точный пробег неизвестен, но примерно около 100 тыс.км. Симптомы – свечи замаслены, так же идёт сильный заброс масла через вентиляцию картера в корпус воздушного фильтра. Диагноз – поршневая группа.

Посмотрим на машину и в подкапотное пространство. Обнаруживаем, что кто-то уже проложил магистраль обратного слива топлива. Мы такую работу тоже выполняем. Магистраль слива топлива в бак на Оке нужна и с серийным двигателем, особенно в жарку погоду, в условиях дорожных пробок.

Материалы по ремонту двигателя ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете всю необходимую информацию по ремонту и обслуживанию двигателя ВАЗ 1111 ОКА. Вы самостоятельно сможете собрать, заменить, отрегулировать двигатель ВАЗ 1111 ОКА. Мы ответим на любые ваши вопросы о двигателе ВАЗ 1111 ОКА.

Материалы по ремонту подвески ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете всю необходимую информацию по ремонту и обслуживанию подвески ВАЗ 1111 ОКА. Вы самостоятельно сможете собрать, заменить, отрегулировать вашу подвеску на ВАЗ 1111 ОКА. Мы ответим на любые ваши вопросы по подвеске ВАЗ 1111 ОКА.

Коробка передач ВАЗ 1111 ОКА

Материалы по ремонту кпп ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете всю необходимую информацию по ремонту и обслуживанию коробки передач ВАЗ 1111 ОКА. Замена сцепления, снятие коробки и замены на новую. Множество различных статей по ремонту механической коробки передач ВАЗ 1111 ОКА.

Материалы по ремонту кузова ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете всю необходимую информацию по ремонту и обслуживанию кузова ВАЗ 1111 ОКА. Замена старых кузовных элементов, сварка днища, замена порогов, замена крыльев, установка бампера, замена ветрового стекла и многое другое.

Материалы по ремонту салона ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете всю необходимую информацию по ремонту и обслуживанию салона ВАЗ 1111 ОКА. Замена обшивки салона, ремонт бардачка, настройка дефлекторов, замена подсветки салона автомобиля. Вы расскажем вам как переделать салон ВАЗ 1111 ОКА своими руками.

Тормозная система ВАЗ 1111 ОКА

Материалы по ремонту тормозов ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете всю необходимую информацию по ремонту и обслуживанию тормозной системы ВАЗ 1111 ОКА. Замена передних и задних колодок. Установка дисковых тормозов на ВАЗ 1111 ОКА. Покажем вам, как правильно прокачивать тормоза на ВАЗ 1111 ОКА.

Материалы по ремонту и замене фар ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете всю необходимую информацию по ремонту и обслуживанию электрики ВАЗ 1111 ОКА. Замена ламп ближнего и дальнего света. Замена и ремонт передних и задних фар. Замена предохранителей. Регулировка фар. И многое другое.

Материалы по ремонту и обслуживанию ВАЗ 1111 ОКА. Видео руководства по ремонту своими руками. В данном разделе вы найдете необходимую литературу по ремонту ВАЗ 1111 ОКА. Книги по обслуживанию и ремонту ВАЗ 1111 ОКА. Сможете бесплатно скачать нужные вам книги. Любая необходимая литература по ремонту автомобиля ОКА.

Автомобиль «Ока» – самый маленький российский автомобиль. В него помещается не больше четырех человек. Если ваш рост выше 180 см., то в этом автомобиле, вам не будет комфортно. Но кроме этих минусов, у ВАЗ-1111-1113 Ока, есть много положительных сторон.

Технические характеристики Оки следующие:

– двухцилиндровый двигатель мощностью 30 л.с. (позже на эти автомобили ставились двигатели более мощные). Ваз-1113 имеет самый мощный двигатель – 0,75V.
– расход бензина – самый низкий на всем постсоветском пространстве, может посоревноваться с малолитражками многих производителей. При движении по трассе без сильной загруженности, едва ли доходит до 3 л/100 км. Эта характеристика одна из самых решающих. Такой автомобиль просто находка для студентов и малообеспеченных людей. Мало того, что это прекрасная экономия топлива, размеры Оки позволяют припарковаться почти в любом месте.
– еще один плюс – простота в сервисе и обслуживании. Практически в любом городе можно найти нужную деталь и сравнительно недорого.

Максимальная скорость, которую можно развивать на таком автомобиле – приблизительно 135 км/ч.

Проходимость автомобиля Ока очень приличная. Она ничем не хуже аналогов других марок. Автомобиль ведет себя очень шустро при старте. К тому же с легкостью развивает скорость до 100 км/ч.

Несмотря на свои размеры, в багажник спокойно помещается две сорокалитровые канистры. Если сложить заднее сидение, то вполне уместится и стандартная стиральная машина.

Автомобиль уверенно перевозит двух пассажиров весом около 200 кг, а также груз весом около 400кг. При этом автомобиль хорошо ведет себя на дороге и сохраняет скорость.

При движении в машине достаточно шумно. Но это в основном из-за потоков воздуха, а не от шума двигателя и колес. При длительной поездке, шум немного утомляет.

В принципе, для своих целей, машина очень хороша. Она: вместительная, скоростная, потребляет мало топлива, очень малогабаритна. Если ваша задача – бюджетная городская езда – Ока именно для вас!

Картер коробки передач. Подготавливаю для запрессовки сальника первичного вала. Кстати сказать — запорол два сальника. Разобравшись понял — проблема была в заусенце на посадочном месте. Так что лучьше перед установкой сальников проверить то место где они будут стоять.

На блоке всё готово. Сцепление стоит. Как оправка подойдёт цилиндрик диаметром 15 мм.

Запресованный сальник первичного вала коробки передач. Предварительно перед установкой сальник сбоку покрывал тонким слоем герметика.

То же с сальниками полуосей. Но тут главное не перепутать правый с левым. Это правый.

А это левый. Только изнутри.

Подшипники запресовываются просто. Главное не перекосить. И не забыть под подшипник вторичного вала подложить пластмассовый грибочек — маслосборник.

Шток выбора передачь и рычаг штока. Главное — обезжирив резьбу проклеить её специальным анаэробным клеем — фиксатором.

Примеряю собранный механизм выбора и переключения передач

Да. Главное не забыть про сальник штока выбора передач. Кстати туда и правда влезает несколько сальников. Вниз я поставил новый а на верх аккуратно вынутый старый.

Хвост штока выбора передач

Это предварительно отрегулированная ведомая шестерня главной пары с дифференциалом и новыми подшипниками. Ставлю её на место.

Установил шестерню с дифференциалом.

Два вала — первичный и вторичный. Вторичный с шестернями и синхронизаторами. Все уже с напресованными подшипниками (внутренние только наружные обоймы) и закрученными задними гайками.

Да. Чуть не забыл. Нужно сальники смазать пластичной смазкой. Какой — указано в книжке по ремонту. Так что надо почитать. 🙂

Ставлю валы. Валы ставяться вместе — парой. Иначе никак. Но это не сложно.

Дошло дело до механизма выбора передач. Открываю баночку и достаю сухарики — блокираторы. Смое главное — не потерять!

Вот в эти дырочки вставляются толстые блокираторы. Они предохраняют от случайного параллельного перемещения штоков. Один шток перемещаясь блокирует два других.

Один сухарик уже на месте. Вставлять лучше пинцетиком. Но можно изловчиться и чистой отвёрткой.

Ещё разок крупным планом то место куда это всё вставляется.

А этот сухарик вставляется в отверстие штока 3-4 передач (тот что по серединке).

Сухарики и штоки вставлены на место.

Вставляю механизм выбора и переключения передач в сборе со штоками и паралельно с шестернёй заднего хода (иначе она потом не влезет).

Вот так это выглядит сбоку.

Потом конечно же штоки можно будет вынимать. Что я и делал, устанавливая вилки на штоки. Ставлю вилку 3-4 передач.

Вилка 3-4 стоит. Ставлю вилку 1-2.

А это анаэробный клей — фиксатор резбы. Я мазал соединение штока выбора передач с рычагом выбора передач и болты — фиксаторы вилок на штоках.

Да. Перед тем как закрепить вилки на штоках нужно не забыть закрепить механизм выбора так как больше снимать я его не собираюсь 🙂

АХТУНГ! Обращаю внимание на правильное положение вилки 3-4 передач.

Не забыть бы вычещеный магнитик для сбора опилок! Опилки появляются в процессе работы коробки. И чтобы не засорять масло они собираются на этот магнит.

Настало время соединять корпус коробки. Приготовился мазать герметиком. Столика подходящего не было и я извернулся вот так вот. Поставив верх корпуса наоборот на подшипники валов.

После акуратно намазал герметиком сторону и стал ждать, давая герметику немного схватиться.

Герметик на фланце половинки корпуса.

Пока сохнет герметик я счёл НЕ ЛИШНИМ по книге проверить, правильно ли я всё собрал и что я мог забыть.

Особенно это хорошо видно на общем чертеже.

И так! Половинки споловинены. Все валы и штоки вошли в свои дырки. Я потихонечку протягивал болты, следя чтобы герметик схватился по стыку ровно. Да! Забыл отметить — гайки подшипников на валах нужно закернить в пазы. Да, и не забыть про стопорные разрезные кольца подшипников.

Теперь, когда картер коробки собран, можно заправить фиксаторы штоков. Это шарик, пружинка и заглушка с медным уплотняющим кольцом. Заглушки я фиксировал на клей.

Теперь пришла пора промазать герметиком заднюю крышку и надеть её. Технология та же. Выжидаем пока герметик немного схватится. Ставлю. Слежу чтобы герметик равномерно распределился. Жду пока герметик схватится сильнее. И после равномерно протягиваю шесть гаек.

Ставлю направляющую выжимного, вилку и выжимной, смазывая по ходу смазкой.

И устанавливаю коробку. К слову скажу что без полуосей и без ГБЦ коробка ставится сверху удобнее чем снизу. Что ещё раз доказывает что Оку удобнее ремонтировать комплексно!

Критическая ситуация с автомобилем может возникнуть в любой момент. Автомобиль Ока линейки ВАЗ 1111-11113 – это детище еще советского автопрома, который активно научал своих потребителей ремонтным навыкам, поэтому кое-что из оных стоит знать и сегодня.

Несведущим на заметку: машину двигает не бензин, а электрические процессы, которые запускаются посредством топлива. Среди факторов, заставляющих владельцев изучать ремонт автомобиля ОКА своими руками, электрика и ее переменчивость в работе играют далеко не последнюю роль.

Виды поломок могут быть разными. Одна из самых распространенных – перегоревшие предохранители. Предварительно надо четко знать силу тока, на которую они рассчитаны в вашем авто. Запасной комплект должен быть всегда под рукой. При их замене, для определения расположения нужного предохранителя непосредственно в блоке, руководствуются маркировкой, нанесенной на его крышку.

В остальном, процесс осуществляется довольно просто, только обязательно нужно для себя уяснить раз и навсегда – ни в коем случае нельзя ставить предохранители с другой силой тока или еще хуже – железки, жучки, времянки и тому подобное. Такая рационализация может привести к короткому замыканию, если не к возгоранию, со всеми последствиями.

Еще одна неполадка электрической части, из-за которой стоит освоить ремонт автомобиля Ока своими руками – это проблема с реле. Именно она может стать причиной того, что не работают зажигание, обогрев или габаритные огни. Опять же, как и в случае с предохранителями, перво-наперво нужно его проверить на пригодность. Для этого, вооружившись ключом-восьмеркой и отверткой для открутки винтов крепления, аккуратно вынимаем реле с его ниши, подключаем к источнику питания не более 12 В. Если лампа загорается, значит, реле исправно и проблему нужно искать в проводке, если нет – то подлежит замене, и новое устанавливают в обратной снятию последовательности.

В автомобиле предусмотрены несколько реле, но механизм замены общий для всех.

Потенциальных поломок электрооборудования в автомобиле Ока достаточно – это могут быть проблемы с:

  • датчиками;
  • коммутаторами;
  • пружинами в системе зажигания и прочие.

Если не работают приборы, например стеклоочистители, то это может быть связано с их засорением или повреждением проводов – если так, то следует заменить.

Описание всех неисправностей займет много времени. Поэтому логичен вопрос: а может все-таки лучше в автосервис?

ВАЗ-1111, -11113 с бензиновыми карбюраторными двигателями: 1110/1111 0.65 л (649 см³) 25,9-29,3 л.с./19-21,5 кВт и 11113 0.75 л (750 см³) 33 л.с./24,3 кВт; Иллюстрированное руководство, устройство, обслуживание, диагностика, ремонт, электросхемы, контрольные размеры кузова, каталог запчастей, все работы в цветных иллюстрациях. Производственно-практическое издание Ока 1111 / 11113 микролитражка модели выпуска с 1987 по 2008 год

Коммутатор типа 3620.3734, или 36.3734, или HIM-52 размыкает цепь питания первичной обмотки катушки зажигания, преобразуя управляющие импульсы датчика в импульсы тока в катушке зажигания. Коммутатор проверяется осциллографом по специальной методике, при подозрении на неисправность (перебои в работе двигателя, выстрелы в глушитель) замените его заведомо исправным. Запрещается отсоединять разъем коммутатора при включенном зажигании – это может повредить его (равно как и другие компоненты системы зажигания). Катушка зажигания – двух выводная, сухая , типа 29.3705 – с разомкнутым магнитопроводом, или типа 3012.3705 – с замкнутым магнитопроводом. Данные для проверки: сопротивление первичной обмотки при 25° С – (0,5±0,05) Ом , вторичной – (11 ±1,5) кОм. Сопротивление изоляции на массу – не менее 50 МОм. Свечи зажигания – типа А17ДВР, или А17ДВРМ, или их импортные аналоги (с помехоподавительными резисторами сопротивлением 4-10 кОм). Зазор между электродами должен быть в пределах 0,7-0,8 мм (проверяется круглым проволочным щупом).

Высоковольтные провода – типа ПВВП-8 с распределенным сопротивлением (2000±200) Ом/м или ПВППВ-40 с распределенным сопротивлением (2550±270) Ом/м. Запрещается прикасаться к высоковольтным проводам на работающем двигателе – это может привести к электротравме. Запрещается также запускать двигатель или позволять ему работать с разорванной высоковольтной цепью (снятыми проводами) – это может привести к прогару изоляции выходу из строя электронных компонентов системы зажигания. Выключатель зажигания типа 2108-3704005-40 или KZ813 с противоугонным запорным устройством, блокировкой против повторного включения стартера без предварительного выключения зажигания. При повороте ключа в положение «зажигание» подается напряжение на управляющий вход дополнительного реле типа 113.3747-10, которое, в свою очередь, подает напряжение на катушку зажигания и коммутатор. Таким образом, разгружаются контакты выключателя зажигания (см. также «Электрооборудование»).
Схема бесконтактной системы зажигания:


1 – реле выключателя зажигания; 2 – выключатель зажигания; 3 – блок предохранителей; 4 – коммутатор; 5 – датчик момента искрообразования; 6 – катушка зажигания; 7 – свечи зажигания.

Книга из серии полноцветных иллюстрированных руководств по ремонту автомобилей своими силами. В руководстве приведены особенности конструкции узлов и систем автомобилей «Ока» ВАЗ-1111, -11113, а также их модификации для водителей-инвалидов. Подробно описаны основные неисправности, их причины и способы устранения. Процессы разборки и ремонта проиллюстрированы и снабжены комментариями. Отдельный раздел посвящен уходу за автомобилем. В Приложениях представлены инструменты, смазочные материалы и эксплуатационные жидкости, манжетные уплотнения, подшипники, моменты затяжки резьбовых соединений, а так же схема электрооборудования. Книга предназначена для водителей, желающих ремонтировать автомобиль самостоятельно, а также для работников СТО.

Ремонт головки блока цилиндров изложен в подразделе 10.5.1.

  • ключи “на 8”, “на 10”, “на 13”, “на 17” и “на 19”
  • головки сменные “на 10”, “на 13”, “на 17” и “на 19”
  • ключи для болтов с внутренним шестигранником “на 5” и “на 10”
  • вороток
  • пассатижи
  • отвертка
  • набор плоских щупов
  • микрометры (с пределами измерений 0-25, 25-50 и 75-100 мм)
  • нутромер
  • индикатор часового типа с индикаторной стойкой
  • динамометрический ключ
  • съемник для снятия масляного фильтра

Снимите силовой агрегат с автомобиля и коробку передач с двигателя (см. подраздел 10.6.).

1. Отверните гайку болта нижнего крепления генератора к передней опоре двигателя и.

2. . снимите с болта пружинную и плоскую шайбы.

3. Ослабьте гайку крепления генератора к натяжной планке.

4. Отверните гайку крепления натяжной планки генератора к шпильке головки блока цилиндров.

5. Снимите рым со шпильки и натяжную планку. Установите рым на шпильку и навинтите гайку (рым понадобится для снятия двигателя с подрамника).

6. Снимите ремень привода генератора со шкивов генератора и коленчатого вала двигателя.

7. Выньте болт нижнего крепления генератора к передней опоре двигателя и снимите генератор вместе с натяжной планкой.

8. Выньте маслоизмерительный щуп из отверстия блока цилиндров.

9. Ослабьте затяжку хомутов шланга системы вентиляции картера двигателя и снимите шланг.

10. Ослабьте затяжку хомута крепления соединительного шланга на выпускном патрубке головки блока цилиндров и.

11. . снимите с патрубка шланг вместе с термостатом.

12. Отверните три гайки крепления датчика момента искрообразования к корпусу привода вспомогательных агрегатов.

13. Отсоедините шланг от вакуумного регулятора опережения зажигания и снимите датчик момента искрообразования с корпуса привода.

14. Ослабьте затяжку хомутов и отсоедините от впускной трубы шланги вакуумного усилителя и.

15. . подогрева впускной трубы.

16. Ослабьте затяжку хомута и отсоедините шланг малой ветви вентиляции картера со штуцера крышки головки блока цилиндров.

17. Ослабьте затяжку хомута топливного шланга (от топливного насоса к карбюратору) и.

18. . снимите его с нагнетательного штуцера топливного насоса.

19. Отверните две гайки крепления топливного насоса и.

20. . снимите топливный насос со шпилек корпуса привода.

21. Отверните болт крепления корпуса привода вспомогательных агрегатов и.

22. . снимите корпус привода со шпилек головки блока цилиндров.

23. Отверните два болта крепления кронштейна приемной трубы (под болтами установлены пружинные шайбы).

24. Отверните четыре гайки крепления фланцев приемной трубы глушителя к шпилькам головки блока цилиндров (под гайками установлены плоские шайбы) и.

25. . снимите приемную трубу с кронштейном и шлангом подачи теплого воздуха в воздушный фильтр.

26. Отверните два болта крепления фланца подводящей трубы водяного насоса.

27. Отверните болт крепления кронштейна подводящей трубы к блоку цилиндров и.

28. . снимите подводящую трубу водяного насоса со шлангами и термостатом в сборе.

29. Ослабьте затяжку хомута и снимите отводящий шланг отопителя с выпускного патрубка головки блока цилиндров.

30. Отсоедините от штуцера карбюратора шланг вакуумного регулятора опережения зажигания.

31. Отверните три гайки крепления впускной трубы к головке блока цилиндров (под гайками установлены плоские шайбы) и.

32. . снимите впускную трубу в сборе с карбюратором.

33. Зацепите стропы подъемного механизма за рамы двигателя. Приподнимите двигатель, натянув стропы. Отверните гайку болта крепления передней опоры двигателя к кронштейну подрамника.

34. . снимите пружинную и плоскую шайбы и.

35. . выньте болт с плоской шайбой.

36. Отверните гайку болта крепления задней опоры двигателя к подрамнику, снимите пружинную и плоскую шайбы и.

37. . выньте болт с плоской шайбой. Снимите двигатель с подрамника.

38. Установите двигатель на устойчивую подставку или стенд для разборки и сборки. Отверните три болта крепления передней опоры двигателя к блоку цилиндров и снимите опору.

39. Снимите масляный фильтр с двигателя (рекомендуем пользоваться специальным съемником).

40. Отверните три болта крепления передней крышки ремня привода распределительного вала и снимите ее.

41. Отверните гайку крепления натяжного ролика.

42. Отверните болт крепления шкива привода генератора от коленчатого вала, зафиксировав маховик от проворачивания (уприте отвертку в болт крепления картера сцепления к двигателю и в зубчатый венец маховика). Снимите болт крепления шкива с плоской шайбой.

43. Аккуратно подденьте отверткой (или монтажной лопаткой) шкив привода генератора и снимите его с переднего конца коленчатого вала.

44. Снимите зубчатый ремень привода распределительного вала со шкива коленчатого вала.

45. Снимите натяжной ролик со шпильки блока цилиндров.

46. Снимите дистанционное кольцо натяжного ролика.

47. Зафиксируйте шкив распределительного вала от проворачивания, уперев отвертку в шпильку крепления защитной крышки зубчатого ремня, и отверните болт крепления шкива.

48. Снимите зубчатый шкив распределительного вала, выньте шпонку шкива, если она неплотно сидит в пазу вала.

50. . четыре болта крепления задней крышки (три из них крепят водяной насос к блоку цилиндров).

51. Снимите заднюю защитную крышку ремня привода распределительного вала.

52. Вставьте отвертку между фланцем корпуса насоса и блоком, сдвиньте насос с посадочного места.

53. Снимите насос и прокладку (показана стрелкой).

54. Отверните две гайки крепления крышки головки блока цилиндров, снимите плоские шайбы и.

56. Снимите крышку головки блока цилиндров.

57. Отверните шесть болтов крепления головки блока цилиндров.

58. . с помощью сменной головки, ключа для болтов с внутренним шестигранником и динамометрического ключа (так как момент затяжки болтов составляет около 80 Н/м или 8 кгс/м).

59. С помощью отвертки отделите головку от блока и.

60. . снимите головку блока цилиндров.

61. Снимите прокладку головки блока цилиндров.

62. Отверните одиннадцать болтов крепления масляного картера двигателя.

63. С помощью отвертки отделите масляный картер от блока цилиндров и снимите картер и его прокладку.

64. Отверните три болта крепления приемника масляного насоса (под головками болтов установлены пружинные шайбы) и снимите приемник.

65. Снимите уплотнительное кольцо с приемника масляного насоса.

66. Отверните четыре гайки крепления нижних крышек шатунов (по две на каждой крышке).

67. Снимите крышки шатунных подшипников. Если номера цилиндров на них не видны, нанесите метки (кернением или краской).

68. Снимите вкладыши шатунных подшипников с шеек коленчатого вала. Если не планируется замена вкладышей, промаркируйте их с нерабочей стороны.

69. Аккуратно протолкните шатуны в цилиндры так, чтобы шатуны не задевали за стенки цилиндров.

70. Выньте поршни с шатунами в сборе из цилиндров. Если номера цилиндров на шатунах не видны, нанесите метки (кернением или краской).

71. Подденьте отвертками зубчатый шкив коленчатого вала и.

72. . снимите его с переднего конца коленчатого вала.

73. Выньте шпонку крепления зубчатого шкива из канавки переднего конца коленчатого вала.

74. Отверните шесть болтов крепления масляного насоса.

75. . подденьте его отверткой и отделите насос от блока цилиндров.

76. Снимите масляный насос в сборе с переднего конца коленчатого вала.

77. Зафиксируйте маховик от проворачивания, отверните шесть болтов его крепления и.

78. . снимите стопорную шайбу болтов.

79. Снимите маховик с заднего фланца коленчатого вала двигателя.

80. Обратите внимание: если установочная втулка осталась в маховике, сразу пометьте отверстие в коленчатом валу, в котором она была установлена. Иначе появится дисбаланс.

81. Отверните пять болтов и две гайки крепления держателя заднего сальника коленчатого вала.

82. Подденьте держатель отверткой и.

83. . снимите его с двигателя.

84. Зафиксируйте коленчатый вал от проворачивания, вставив в балансировочное отверстие его противовеса металлический стержень или штифт, и отверните болты крепления шестерен уравновешивающих валов.

85. Снимите болты с плоскими шайбами.

86. Подденьте шестерни уравновешивающих валов двумя отвертками и.

88. Отверните шесть болтов крепления крышек коренных подшипников коленчатого вала (по два болта на каждой крышке) и.

89. . снимите крышки коренных подшипников и нижние вкладыши.

90. Выньте коленчатый вал из постелей блока цилиндров.

91. Снимите упорные полукольца коленчатого вала (на среднем коренном подшипнике коленчатого вала) и верхние вкладыши коренных подшипников.

92. Если это необходимо, снимите шпонки с задних концов уравновешивающих валов.

93. При необходимости замены задних подшипников уравновешивающих валов отверните болты крепления упорных пластин и.

95. Выбейте задние подшипники валов из гнезд блока цилиндров, ударяя по уравновешивающим валам через оправку из мягкого металла, и.

96. . снимите задние подшипники уравновешивающих валов.

97. Если необходимо заменить передние подшипники, снимите уравновешивающие валы. Для этого снимите стопорные кольца задних подшипников с помощью специальных щипцов.

98. . выньте уравновешивающие валы из блока цилиндров через гнезда задних подшипников.

99. . выбейте заглушки передних концов уравновешивающих валов, снимите стопорные кольца и выпрессуйте передние подшипники с помощью оправки (бородка), прилагая усилие к наружным кольцам подшипников.

100. Рекомендуем снимать поршневые кольца специальным съемником. Если его нет, аккуратно разожмите замок верхнего компрессионного кольца и снимите его с поршня.

101. Таким же способом снимите нижнее компрессионное кольцо.

102. . маслосъемные кольца (верхнее и нижнее) и.

103. . расширитель маслосъемных колец.

104. Если необходимо, с помощью специальной оправки выпрессуйте палец из шатуна. Учтите, что для сборки поршня с шатуном необходимо нагреть верхнюю головку шатуна до температуры 240 °С и нужна специальная оправка для установки поршневого пальца.

105. Выпрессуйте задний сальник коленчатого вала из держателя, подложив под держатель бруски, чтобы не повредить его. Очистите привалочную поверхность держателя к блоку цилиндров от остатков старого герметика.

Автор статьи: Артем Кондратьев

Добрый день! Я Артем. Чуть меньше 9 лет работаю слесарем и мне нравиться работать руками. Когда создаешь новые полезные вещи или возвращаешь к жизни сломанные предметы. Разве это не прекрасно? Рекомендую, перед реализацией идей с моего сайта, проконсультироваться со специалистами. Удачного рабочего дня!

✔ Обо мне ✉ Обратная связь Оцените статью: Оценка 1.5 проголосовавших: 47

Особенности капитального ремонта ДВС автомобиля Ока.

Автомобиль Ока начал выпускаться достаточно давно и заслужил немалую популярность среди отечественных автолюбителей. Конечно, технические характеристики рассматриваемой машины далеки от требований современного автолюбителя. Несмотря на это, в свое время Ока пользовалась большой популярностью благодаря присущей ей экономичности. Владельцы автомобиля Ока ранних годов выпуска, нередко сталкиваются с неисправностями двигательной системы. Это легко объяснить сроком службы и условиям эксплуатации транспортного средства. Одним из наиболее действенных способов вернуть транспортному средству работоспособность – капитальный ремонт двигателя Ока или ВАЗ 11113. Выполнить ремонт своими руками достаточно сложно, поскольку для многих процессов понадобится наличие дорогостоящего оборудования. В целях экономии можно осуществить подготовку Ока к капитальному ремонту своими руками.

Преимущества капитального ремонта очевидны. Масштабный ремонт движка позволит: увеличить срок эксплуатации транспортного средства, повысить ресурс мотора и увеличить его производительность.

Первым этапом капитального восстановления является подробная диагностика ДВС. Выполнить проверку в условиях гаража достаточно сложно. Для того чтобы определить продуктивность двигателя потребуется наличие компьютерного оборудования и соответствующих навыков.

Для выполнения полного восстановления движка, необходимо демонтировать устройство автомобиля. Выполнить данную процедуру своими руками не так просто, несмотря на небольшие габариты мотора. Во избежание повреждений движка, необходимо использовать целый ряд специализированного оборудования: опорные рамы, гидравлический съемник, устройство для вывешивания движка.

После того как демонтаж двигателя успешно произведён, необходимо приступить к его разборке. Разбирать двигатель необходимо строго по определённому порядку, для того чтобы предотвратить повреждения отдельных его частей.

После разборки, необходимо приступить к важнейшему этапу капитального ремонта, который заключается в дефектовке отдельных компонентов ДВС. Основная цель капитального ремонта, вернуть элементам транспортного средства заводские параметры. Поэтому единственно верным руководством по ремонту Ока является оригинальная инструкция завода изготовителя.

В ходе масштабного восстановление мотора ВАЗ 11113, в обязательном порядке выполняются следующие процедуры:

  • Восстановление параметров блока цилиндров ВАЗ 11113.
  • Ремонт входных отверстий коленчатого вала и распредвала.
  • Восстановление опорной части коленвала.
  • Обработка головы блока цилиндров ВАЗ 11113.
  • Возврат герметичности блока путём сварки.
  • Правка геометрии шатуна.
  • Замена всех расходных элементов и резиновых уплотнителей.

Масштабный ремонт автомобиля требует соответствующих навыков и дорогостоящего оборудования. Поэтому, для того чтобы выполнить восстановление придётся обратиться к профессионалам.

Одним из важнейших этапов восстановления движка является обработка ГБЦ. Производитель транспортного средства указывает допустимый предел обработки головы, которого необходимо строго придерживаться при проведении ремонта. Перед тем как приступить к масштабному ремонту, необходимо подробно изучить комплектующую инструкции завода изготовителя. Также, в обязательном порядке стоит уточнить у мастера на какую глубину будет производиться обработка ГБЦ. В случае если элемент изношен выше допустимого предела, дальнейшая эксплуатация головы блоков запрещается. Если же обработка и восстановление ГБЦ возможны, работа сопровождается обязательной заменой прокладки ГБЦ. В данном случае, так же необходимо учитывать глубину обработки элемента для того чтобы придать блоку первозданную герметичность.

Для восстановления ДВС ВАЗ 11113 к заводским параметрам, рекомендуется пользоваться услугами проверенных мастерских. Капитальный ремонт достаточно сложная и трудоемкая процедура, которая должна проводиться квалифицированными мастерами. Перед проведением ремонта, необходимо здраво оценить затраты на восстановление. Некоторые автолюбители забывают оценить разницу между восстановлением элемента и его заменой. При критическом износе двигателя затраты на ремонт вполне могут превысить первичную стоимость ДВС. При необходимости замены отдельных элементов транспортного средства, стоит использовать только оригинальные запчасти от производителя.

После проведения обработки компонентов автомобиля, необходимо собрать двигатель, и установить его используя специальное оборудование. Также рекомендуется произвести замену всех рабочих жидкостей и осуществить восстановление тормозной системы. Качественный капитальный ремонт позволит в полной мере восстановить продуктивность двигателя ВАЗ 11113 и повысить срок его эксплуатации.

После проведения ремонта стоит приступить к обкатке автомобиля. На период обкатки, необходимо предотвратить повышенную нагрузку на двигательную систему. В противном случае затраты на восстановление двигателя не оправдают себя и транспортное средство ВАЗ 11113 вновь утратит свою работоспособность.

Удачного восстановления автомобиля ВАЗ 11113!

Ремонт стартера ока – особенности и рекомендации — Стартер, генератор — Статьи

Конструктивно стартер автомобиля Ока не имеет серьезных отличий от своих более мощных собратьев,  а значит, в случае возникновения проблем с этим агрегатом, имеются все шансы выполнить ремонт стартера ока своими руками. Следует сказать, что отказы стартера ВАЗ 1111/11113 изучены достаточно хорошо и большинство их неисправностей связано с выходом из строя втягивающего реле, щеткодержателя (и самих щеток, как таковых), а также втулок. Как правило, ремонт этих элементов обходится гораздо дешевле покупки нового узла, и выполнить его можно в условиях личного гаража.

Наиболее часто встречающейся причиною отказа втягивающего реле является подгорание клемм и контактных болтов  силовой электрической цепи. В этом случае, после разборки реле контакты зачищаются мелкой наждачной шкуркой или меняются на новые.

Иногда заедание якоря реле происходит вследствие появления сильной коррозии, после устранения ржавчины и нанесения смазки проблема устраняется.

На этой модели стартера очень быстро изнашиваются щетки. При их замене приходится дополнительно протачивать коллектор, который, в свою очередь, достаточно сложно заменить отдельно, так как выводы обмотки якоря утоплены в пазы коллектора и запрессованы.

В домашних условиях практически невозможно справиться  с неисправностями якоря. При выявлении межвитковых замыканий, перегорании обмотки, спекании ламелей и механических повреждениях коллектора требуется выполнение перемотки и балансировки якоря – что не каждому автолюбителю по силам. В данном случае, овчинка не стоит выделки и гораздо проще и дешевле приобрести новую деталь. Менять якорь рекомендуется и при проведении профилактического обслуживания стартера после длительной эксплуатации. Вместе с якорем следует заменить и щетки, в противном случае, старые щетки своими изношенными гранями могут повредить поверхность коллектора.

Если выявлены повреждения магнитов, то  в зависимости от модели, ремонт стартера ока производится по-разному. Если магниты изначально были приклеены, то их меняют вместе с корпусом-стаканом. Если же их можно снять, то и меняют их по отдельности. При замене магнитов не следует забывать, что они, довольно часто, поставляются в «сыром» состоянии и перед установкой их требуется намагнитить на специальном оборудовании.

При срабатывании втулок и подшипников их замену производят парами. В данной ситуации экономить не следует – замена деталей по отдельности может привести к искривлению якоря с последующим выходом из строя всего агрегата.

Похожие материалы

Замена рулевых наконечников ВАЗ 1111 Ока. Подчиню и поеду!


Новый руль на оку|Новости
Ремонт Оки Часть 2. Ремонт рулевой рейки установка ремкомплекта
Люфт тяги рулевой рейки ока
Развал схождение Своими руками, АНТИКРИЗИС. ВАЗ, лада калина, приора, гранта
ОКА’ ВАЗ-11113-40 демонтаж рулевой рейки.
Ремонт оки Начало ремонта кузова часть 3.4
Автомобиль Ока-замена отбойника передней стойки
Ремонт ходовой автомобиля Ока часть 1
Чиним ходовую на Оке: ВАЗ 11113
Делай сам! Разбор рейки ОКА ВАЗ 11113

Комментарии к теме Замена рулевых наконечников ВАЗ 1111 Ока

Кинешова Лилу

Подскажите как заменить лампочку стоп сигнала в задней двери? Точнее, как заменить то я понял, кое-как достал планку, на которой держаться лампочки, а вот вставить обратно не получается. Что-то я делаю не так, или на заднией двери тоже необходимо откручивать фонарь полностью?

Kalina

Митцубиси лансер ступица подшипник как менят

Вайсбен Хай

зазор уменьшается часто на свечах особенно если они подобраны не правильно по калийному чеслу,если свеча расщитана на холодный двигатель работает в горячем её кирамический исолятор электрода нагревается и электрод в нутри его продвигается к электорну на корпусе свечи уменьшая зазор.

Михаэль

спасибо за видео, все доходчиво, со второго раза получилось,если кому то интересно, у меня nissan LATIO, точно такая же как TIIDA,праворукая с безключевым запуском. Этот способ подходит.Теперь немного о том, почему я туда полез, начали плавать обороты, при прогреве, чуть ли не глохнуть и в пробках, когда педаль тормоза выжимаешь. Ну, думаю, воздуха не хватает двигателю, узнал на сто, 1500 руб еще напугали, что после чистки, заслонку надо калибровать, спасибо Андрею, все рассказал. дз и правда была очень загрязнена, наверное треть баллончика очистителя истратил. Теперь при прогреве машина работает гораздо тише, обороты держит 750, НО в пробках, когда нажимаешь тормоз, начинает захлебываться и глохнет, если включить нейтралку и бросить тормоз, обороты опять 750 и работает ровно. подскажите, что это может быть? Может что то с коробкой? коробка вариатор

Альфир

Мужик ты просто крассава…по больше таких видосов???

Chilton

вот это видос …

Галерея

А у меня колесо ходит так же ходуном. Но не стучит тяга.. Разобрал,снял пыльник и пытаюсь понять где люфт, но его почти нет, точнее кажется что иногда улавливается. в общем не пойму в чем косяк) тяга прошла 8ткм.

Валериан

Имеет право на жизнь, при условии что сервиса рядом нет, и до него чтоб доехать надо как то отрегулировать

Норт

Молодчик! Чаще красава! Доходчиво и понятно. Самое главное чувствуется человек разбирается! Вот тебе сервисмены и ставят дизлайки за то что без хлеба останутся) недавно тоже в сервис заезжал сход развал регулировать — 700 р отдал — говорят мы руль выправили прямо — остальное в пределах нормы — еду — всю машину бултыхает из стороны в сторону — задняя подвеска тоже регулируемая… Короче сам все сделаю. Как в ролике

Rion

Видео реально полезное! Делаю сейчас рулевую рейку на примере этого видео, но возник вопрос: есть ли между сухарём и штоком рулевой рейки что либо (типа прокладки или типа фтулки)?

Войнарская Айнагул

Вся беда начинается из-за прокладки между рулем и сиденьем.

Оставить комментарий

Тюнинг ОКИ своими руками (видео) — Самостоятельный ремонт авто

ВАЗ 1111, больше известный как Ока, благодаря компактным размерам и простому дизайну стал предметом насмешек. Между тем, этот автомобиль предвосхитил эру экономных, малолитражных автомобилей. Сегодня практически каждый мировой бренд автомобилестроения разрабатывает собственную «малютку», поэтому в классе компактных автомобилей развернулась нешуточная конкурентная борьба. Отечественный автопром, наряду с итальянским, можно считать пионером в области освоения производства компактных автомобилей. Другой вопрос, что ВАЗ 1111 не получил достаточного развития в виде разработки рестайлингов и новых поколений. Зато Ока предоставляет фанатам осуществлять тюнинг автомобиля своими руками и широкие возможности для модернизации.

Содержание:

Тюнинг Оки своими руками

Существует множество вариантов трансформации, рестайлинга ВАЗ 1111:

  • Внедорожник
  • Раллийный автомобиль
  • Ретро автомобиль – дизайнерские концепции конца 60 начала 70 годов XX века обусловлены угловатостью форм кузова, применением ярких цветов в дизайне
  • Кабриолет
  • Родстер

Наиболее простым и доступным является тюнинг Оки для бездорожья, так как внешне автомобиль имеет сходства с этим классом машин. Для усиления этого эффекта достаточно сделать лифтинг подвески, установить диски большего диаметра и резину с мощным протектором. Но тюнинг Оки под джип не ограничивается только вышеперечисленными изменениями, их можно считать только первым этапом в деле создания эксклюзивной малютки-вездехода.

Внешний тюнинг Оки можно стилизовать под популярную модель внедорожника Grand Cherokee. Этому способствует схожесть фар и радиаторной решетки. У обоих автомобилей они продолговатые, прямоугольной формы. Достаточно установить обвес, колеса с большим диаметром и тракторным протектором резины, а также придать соответствующую конфигурацию капоту и невзрачная ОКА превратится в миниатюрный клон популярного в 90 годы внедорожника.

Тюнинг автомобилей Оки своими руками делать достаточно легко. Это обусловлено простотой технического устройства машины и непритязательным внешним видом, что, с одной стороны, делает модернизацию простой и дешевой, а с другой – позволяет проводить над автомобилем всевозможные эксперименты.
Из всего вышеизложенного можно сделать вывод, что тюнинг ВАЗ 1111 – это лучшая школа для новичка и своеобразная творческая студия для опытного мастера.

Тюнинг двигателя Оки

Процесс улучшения характеристик двигателя условно можно разделить на 2 направления:

  • Кардинальное изменение характеристик – полная замена мотора
  • Улучшение штатного силового агрегата

В первом случае идеальным вариантом станет инжекторный мотор от Rover Mini с объемом 1,3 литра. Преимуществом такого вида тюнинга является значительное увеличение технических показателей, минусами станут высокая стоимость реализации и необходимость перерабатывать под новый мотор большинство систем автомобиля. Это дорого и занимает много времени.

Второй вариант – модернизация штатного силового агрегата более дешевый и простой, но не позволит получить такого прироста мощности, как в первом случае.

Тюнинг двигателя Оки своими руками необходимо начинать с карбюратора. Первый шаг – увеличение диаметра дроссельной заслонки до 52–54 мм. Это позволит получать двигателю больше воздуха, что облегчит его работу, повысит показатели и увеличит моторесурс. Можно сразу установить тюнинговую модификацию карбюратора.

Установка нового распредвала позволяет повысить обороты до 7000 единиц. При этом обязательно необходимо подтянуть мощность двигателя, что делается при помощи следующих операций:

  • Замена штатных клапанов на облегченные
  • Модернизация седел клапанов
  • Доработка впускных и выпускных каналов клапанов
  • Герметизация клапанов
  • Установка бронзовых направляющих
  • Изменение форм камер сгорания

Дополнительно нужно заменить на спортивные модификации впускной и выпускной коллекторы, а также воздушный фильтр на модель K&N с нулевым сопротивлением. Этот комплекс мероприятий позволит значительно повысить технические характеристики двигателя и оптимизировать его работу, то есть потеря мощности будет минимальной.

С помощью насадки на глушитель можно придать двигателю спортивное рычание. Модели с подсветкой будут создавать эффект пламени, вырывающегося из реактивного сопла.

Тюнинг подвески Оки

Улучшение ходовых характеристик ВАЗ 1111 – первоочередная задача владельца, так как в базовом варианте подвески они никудышные и вызывают кучу нареканий. Для исправления ситуации необходимо установить газо-маслянные амортизаторы. Этого хватит, чтобы придать автомобилю устойчивость и улучшить его управление.

Полезный совет

Штатные пружины специалисты не рекомендуют менять на продвинутые модификации, так как последние быстро выходят из строя.

Если из Оки планируется сделать внедорожник, то необходимо произвести лифтинг подвески. Это можно сделать при помощи специализированного набора или путем добавления проставок под пружины. Результат – задранная задняя часть автомобиля. Но при этом придется дорабатывать крепления амортизаторов. Собственно это все, что необходимо для улучшения подвески ВАЗ 1111 своими руками.

Тюнинг салона Оки

Здесь вариантов для модернизации больше чем достаточно:

  • Полная замена обшивки салона. Для этого используются свои материалы или покупается специальный набор. Можно испробовать авторский прием переработки салона, например, доработка штатной обшивки
  • Частичное декорирование – установка фигурных вставок и элементов в обшивку
  • Доработка штатных кресел – установка удобных подголовников покупка или изготовление стильных чехлов. При этом должна быть учтена общая дизайнерская концепция переработки салона в части подбора цветов
  • Замена штатных сидений на спортивные или кресла представительского класса
  • Установка нового рулевого колеса
  • Установка стильных накладок на педали
  • Монтаж дополнительного оборудования: автоматического привода стекол и боковых зеркал
  • Крышу можно сделать панорамной или вырезать люк

Это далеко не все варианты, которые можно воплотить, делая тюнинг салона Оки своими руками. По сути, тут нет догм и запретов, все зависит от фантазии мастера. Это отличный вариант для проведения творческих экспериментов, изобретения авторских приемов декорирования.

Тюнинг панели Оки

Тюнинг торпеды Оки связан с трудностью – компактными габаритами автомобиля. В связи с этим установить торпеду с других моделей вряд ли получится. Или придется долго искать подходящие размеры. Здесь лучшими помощниками станут воображение и подручные средства.

Можно прибегнуть к стандартному, проверенному варианту – обтянуть торпеду кожей или пленкой карбон. Если хочется создать эксклюзив, то поможет в этом монтажная пена, эпоксидная смола, шлифовальный инструмент. С их помощью можно менять дизайн торпеды как вздумается. Это также хороший метод переделки посадочного отверстия под приборную панель.

Тюнинг панели Оки своими руками также предусматривает 2 варианта:

  • Модернизация заводской панели
  • Установка новой панели, от других моделей автомобилей

Первый вариант предусматривает замену стандартных ламп подсветки на светодиодные. Установка новой подложки или доработка штатной позволит создать нестандартный вид. Полная замена панели приборов потребует доработки торпеды.

Полезный совет

Не стоит забывать о качественном уплотнении, новая или доработанная торпеда не должна издавать скрипов. Это требование можно считать неотъемлемой частью тюнинга.

Тюнинг бампера для Оки

Стандартные бамперы ВАЗ 1111 плохо поддаются модернизации, так как обладают ограниченным тюнинговым ресурсом. Причина – небольшая площадь поверхности, где близко друг к другу расположены противотуманные фары и место для госномера. Но при желании можно раскачать и штатные бамперы. Это делается при помощи монтажной пены, эпоксидной смолы и шлифовального инструмента. Например, можно увеличить бампер в нижней части, добавив диффузоры по примеру раллийных автомобилей. Но такая технология непрактичная и трудоемкая.

Основная сложность модернизации штатного бампера – создание симметричной поверхности и четкой прорисовки линий. Также определенную трудность может вызвать разработка дизайна. Чтобы долго не мучиться за основу стоит взять какой-нибудь продвинутый образец спортивного бампера.

Оптимальный тюнинг бампера для Оки своими руками – замена родных образцов на продвинутые модификации. Это просто и быстро. Затруднение вызовет только установка заднего бампера. Причина сложностей – фаркоп.
Следует помнить, что объемные бамперы визуально увеличивают размеры кузова. Эффект можно увеличить путем выдвижения бамперов вперед.

Тюнинг фар для Оки

Тюнинг оптики Оки – один из важных элементов, влияющих на внешний вид автомобиля. Действенным методом преображения фар является установка накладок. Их можно купить или сделать самостоятельно. Перед тем необходимо поставить светодиодные лампы и отполировать фары. Есть возможность полной замены оптических приборов. Для установки продвинутой модели потребуется доработка кузова.

Какие еще приемы можно применить для изменения внешнего вида фар:

  • Изменение дизайна обода фары – нанесение блестящего покрытия, стилизованного под хром
  • Доработка подложки фары
  • Украшение светодиодными лентами, чаще всего они напоминают ресницы, но можно расположить их внизу и придать автомобилю агрессивный вид

Тюнинг задних фонарей Оки осуществляется в основном за счет установки накладок. При этом стоит помнить, что они не должны нанести ущерб безопасности – фонари в любом случае остаются хорошо заметными.

Самоделки для квадроцикла. Как самостоятельно сделать квадроцикл из «Урала». Квадроцикл с полным приводом

Квадроцикл из магазина – удовольствие, доступное не каждому. Поэтому многие умельцы изготавливают квадрики своими руками. И в этой статье мы расскажем о самых интересных из них.

В деле изготовления квадроцикла может пригодиться все, что найдется в гараже и поблизости. Каждый автомобиль ручной работы уникален и индивидуален, поэтому сложно говорить о чертежах и схемах.

Мало кто подробно описывает процесс построения своего детища, что крайне затрудняет поиск конкретной информации. Но есть исключения.

Как сделать квадроцикл своими руками

в 2012 году талантливый конструктор С. Плетнев поделился чертежами и нюансами постройки своего детища.

Что использовалось в конструкции автомобиля:

  • Колеса передние и задние от Нивы Шевроле 15 дюймов
  • Двигатель а-м Ока
  • Коробка передач Ока
  • Межколесные редукторы от задних мостов ВАЗ «классика»
  • ШРУС от автомобиля ВАЗ-2108, 12 шт
  • Топливный бак от 20л канистры
  • Опора пассажира от подголовника Оки
  • Сцепление от Оки
  • Руль от мотоцикла Урал»
  • Панель приборов от автомобиля Ока
Основные технические характеристики квадроцикла:
Чертежи квадроцикла:




Трансмиссия изготовлена ​​из агрегатов АвтоВАЗа с некоторыми доработками.Например, для снижения скорости и увеличения крутящего момента вместо главной пары применялась цепная передача.

Межколесные редукторы позаимствованы у классики, полуоси сняты и заменены на ШРУСы от переднеприводного ваза. Таковы же шарниры равных угловых скоростей, применяемые в других агрегатах трансмиссии.

Подвеска независимая на треугольных поперечных звеньях. Амортизаторы от Оки.

Глушитель самодельный из 2-х секций, утеплен асбестом.

Обвес изготовлен из стеклопластика.На создание такого пластика ушло 10 кг эпоксидной смолы, 1 кг пластификатора и столько же отвердителя. 15 метров стеклопластика и 5 метров стекломата.

Обвес квадроцикла — стеклопластик. Наклеивал впервые, а потому сначала изучил рекомендации по выполнению соответствующих работ. Но как оказалось — процесс этот кропотливый, хотя результат того стоит.

Бампера и отбойники сварены из круглых труб 20мм.

Фото готового квадроцикла:



Материал по статье: http://modelist-konstruktor.com/razrabotki/853

Квадроцикл от мотоцикла

Квадрик сделан на базе мотоцикла Урал.

Все подробности в видео.

Квадроцикл с мотором ИЖ Юпитер. Раздатка от мотоцикла Муравей.





Квадроцикл Кобра МИКС

Генератор, принудительное охлаждение, понижайка, электростартер от десятки, двигатель от мотоцикла Урал.


Видео самодельного квадроцикла в действии:

Самодельный багги «Раптор»




Самодельный квадроцикл с двигателем от Оки

Собирался чисто в развлекательных целях, поэтому автор сосредоточился на промышленных квадроциклах и сборке своего автомобиля.Однако имеется ряд конструктивных отличий, которые положительно сказались на проходимости вездехода и существенно выделяют его на фоне стандартных квадроциклов.

Машина обладает отличной проходимостью и надежностью, во многом благодаря малому весу.

При постройке данной модели самодельного квадроцикла использовались следующие детали и материалы:
1) Труба водопроводная 32мм
2) Труба 27мм
3) Двигатель внутреннего сгорания от автомобиля Ока 11113
4) Коробка передач от та же ока
5)Передний и задний редуктор от классического ВАЗ
6)ступицы и гранаты от ВАЗ 2109
7)стеклопластик

Рассмотрим подробнее этапы постройки этого вездехода:

Ровер Подвеска самоделка конструкция, организованная с помощью А-образных рычагов, которые изготовлены из трубы диаметром 27 мм.

Был установлен двигатель и коробка передач от автомобиля глаз, был заварен дифференциал.

Передаточное число передней и задней передач равно 43 к 11, они были переделаны на внутренние гранаты от лада девятки.

Были установлены ступицы и дисковые тормоза от ВАЗ 2109, а также установлены колеса на 15 радиус через проставки.


Изначально сцепление планировалось сделать на руле как на мотоциклах, но потом все же решили сделать его под левую ногу, не смотря на необычное решение для квадроцикла, получилось достаточно удобно по мнению автора.То есть проблем с переключением передач на ходу нет. При этом вездеход способен тронуться с места на любой передаче, даже с пассажиром на борту, мощности двигателя хватает. Поэтому передачи меняются не так часто, при движении по проезжей части используются только третья и четвертая передачи, а вне дорог, соответственно, первая и вторая передачи используются в качестве понижающих передач.

Была организована раздаточная коробка собственной разработки автора, благодаря которой появилась возможность отключать передний мост.Ниже фото всего механизма отключения переднего моста, где видны основные элементы деталей:

Работы проводились по задней подвеске вездехода:


Автомобиль готовится рама под оклейку стеклопластиком:


Процесс крепления стеклопластика на машину:


Далее автор приступил к покраске вездехода:


Слабое место конструкции, как можно видно по фото, стоят пыльники на гранатах.Автор еще не решил, как именно защитить их от возможных поломок.

На следующем фото хорошо виден механизм выбора передач, как видно на фото, рычаг немного отстоял от двигателя, так как до этого он устанавливался ближе и автор часто обжигался на глушителе, был особенно велика вероятность такой травмы при включении заднего хода. На данный момент проблема полностью устранена перемещением рычага:


Фото радиатора пока нет, а что именно интересует?

Радиатор вездехода спрятан под пластиком прямо перед панелью приборов, несмотря на то, что отверстие там очень маленькое, его вполне достаточно для охлаждения автомобиля.Хотя могут быть проблемы при езде по сильной грязи, так как отверстие легко забивается, а охлаждение от набегающего воздуха не получается. Но вентилятор с такой нагрузкой справляется, хотя в сильную грязь вездеход не эксплуатируется. К тому же вентилятор включается только при действительно больших нагрузках, что бывает крайне редко.

Причина этому в том, что сам аппарат получился достаточно легким и двигатель от Оки хорошо справляется с нагрузками.

Ниже фото размещения радиатора:


Приблизительная масса вездехода около 450 кг.
Видео испытаний вездехода при движении по снегу:

Если вы смотрели видео, то наверняка заметили пробуксовку заднего колеса аж на несколько метров, что следует сказать о работе заднего дифференциала. Этот вездеход сильно отличается от промышленных, так как у них отсутствует задний дифференциал и задний мост всегда гребной, что совершенно не мешает управляемости квадроцикла, так как ширина машины небольшая.

Автор тоже хотел изначально заварить задний дифференциал, но подумал, что всегда успеет это сделать, и решил пока попробовать поездить с дифференциалом.Но так как проходимость вездехода устраивала и проблем с задним мостом не было, желания разбирать конструкцию и вваривать задний дифференциал у автора не возникло.

Именно поэтому вездеход остался с задним дифференциалом.

Единственный автор планирует установить на вездеход более серьезные колеса. Либо снять стойки для дисков 15, установив диски с разболтовкой 4 на 100 от Логана или Опеля, которые отлично подходят для ВАЗовских ступиц.

Квадроциклы

имеют массу преимуществ перед автомобилем или мотоциклом, поэтому сегодня они так популярны. Купить квадроцикл сегодня несложно, но это недешевая покупка, поэтому многие могут только мечтать о таком приобретении или сделать квадроцикл своими руками.

Если до этого времени у вас не было необходимого навыка, то придется запастись терпением, так как сделать квадроцикл своими руками не очень просто. Но с другой стороны, если вы все-таки добьетесь поставленной цели и сконструируете квадроцикл своими руками, видео, где вы разъезжаете на своем агрегате, может стать украшением интернета.

Процесс, который вам предстоит пройти, чтобы собрать квадроцикл, достаточно трудоемкий, но если вы приложите усилия, все ваши усилия будут вознаграждены сторицей.

Первое, что нужно учитывать при проектировании квадроцикла, это то, что в итоге это должна быть легкая, маневренная и мобильная единица, не очень громоздкая, но в то же время выносливая. Стоит помнить, что главным качеством хорошего квадроцикла является его проходимость, что необходимо учитывать при его сборке.

Самодельные квадроциклы своими руками

Если вы решите, чертежи станут отправной точкой для начала работы.В Интернете можно найти разнообразные чертежи квадроциклов, выполненные в разных техниках. Здесь же вы можете увидеть фото квадроциклов, которые наши мастера сделали своими руками.

Умельцы изготавливают, «ИЖ», «Урал» или другую технику. Например, если вы решили сделать квадроцикл из Оки своими руками, то можете взять мотор – он хорошо справится с легким квадроциклом. Коробку передач тоже можно позаимствовать у Оки. Если удастся провернуть двигатель вдоль рамы и направить первичные валы от коробки передач прямо на оси, то можно получить самодельный квадроцикл 4х4, но без раздаточной коробки.

Основные этапы работ на квадроцикле

Хороший агрегат можно получить на базе мотоциклов советского производства. Например, если вы решили создать квадроцикл от Урала своими руками, условно можно разделить всю работу на четыре этапа:

  • Модернизация рамы;
  • Установка двигателя и трансмиссии;
  • подвесное оборудование;
  • Оборудование и установка приборной панели.

Кстати, надо сразу определиться с типом управления — будет это рулевое или мотоциклетное.В случае выбора управления мотоциклом у вас уже есть необходимые запчасти от Урала, но если вы думаете о рулевом управлении для своей лошади, заранее позаботьтесь о необходимых деталях.

На первом этапе переработки Урала в квадроцикл придется поиграться с рамой. Хоть рама Урал и является наиболее подходящей для квадроциклов, она практически всегда остается неизменной, хотя это уже зависит от вашего чертежа. Чаще всего обваривается только подвесной системой крепления.

Далее нужно подумать о задней подвеске и заднем мосту. Есть два решения этой проблемы. Первый это создание конструкции на базе родного кардана и редуктора. На выходе получится облегченная конструкция без дифференциала. И второй ордер – это строительство на базе автомобильного моста. Но если вы не хотите иметь квадроцикл, ширину автомобиля придется укоротить. Естественно, процесс не из легких, зато вы получите дифференциал, который не будет мешать на бездорожье.

Но все же самым трудоемким процессом является создание передней подвески. Хотя сделать его можно из чего угодно, ведь квадроцикл не имеет большого веса и поэтому надежные рычаги можно создать любого размера.

Дополнительное оборудование

Квадроциклы

используются не только для увеселительных поездок, но и как надежный, выносливый помощник в хозяйстве. Они используются для перевозки грузов, сбора урожая или используются вместо небольшого трактора в саду. А для этих нужд надо как-то много чего разместить на квадроцикле.Если вам нужен квадроцикл, он нужен вам в основном для личных нужд или выездов на пикник, вы можете сделать своими руками сумку для квадроцикла, в которую можно будет поместить необходимые вещи. А вот для подсобного хозяйства лучше сделать прицеп для квадроцикла своими руками. Если вы уже освоили сборку квадроцикла, то изготовление небольшого прицепа займет у вас совсем немного времени, а пользы принесет массу.

Квадроцикл — отличное решение для бездорожья. Он популярен у любителей экстремального отдыха, рыбаков, охотников и всех, кому необходимо попасть в места, где не может проехать автомобиль.Этот вид транспорта прост в управлении, обладает отличной проходимостью и достаточно устойчив при движении.

Заводские квадроциклы

достаточно дороги, поэтому умельцы выбирают эконом-вариант: делают такие машины сами. Конечно, это решение на любителя: нужно не только иметь золотые руки и необходимые для работы инструменты, но и хорошо разбираться в устройстве автомобиля, мотоцикла и самого квадроцикла.

Если есть стойкое желание самостоятельно сделать это чудо техники, стоит начать с планирования.Необходимо определиться с моделями, на основе которых будет собираться транспорт, и составить для них чертежи. Обязательно продумайте, какие инструменты потребуются в процессе работы и убедитесь, что они в исправном состоянии. Каким бы скучным ни казалось это занятие, без предварительной подготовки ничего из него не получится. Если по каким-то причинам нет возможности сделать чертеж самостоятельно, следует найти готовый вариант.

Далее вам нужны исходники. Квадроцикл с технической точки зрения представляет собой нечто среднее между автомобилем и мотоциклом.Соответственно, для его изготовления вам понадобится мотоцикл и автомобиль. Оптимально подбирать отечественные модели на вторичном рынке, это будет недорого, но качество вполне удовлетворительное для постройки квадроцикла. Лучше использовать небольшую машину типа «Ока» или «Нива». Из мотоциклов очень популярен для таких целей Урал, можно взять ИЖ.

Технология

Когда чертежи готовы, исходники куплены, а инструменты ждут в гараже, можно приступать к изготовлению самодельного квадроцикла.В конечном итоге от качества работы зависит жизнь и здоровье людей, поэтому надо не торопиться и делать все последовательно.

Сначала нужно выбрать двигатель и систему охлаждения. Обычно используется мотоциклетный двигатель, так как он потребляет меньше бензина и занимает меньше места, но можно взять и автомобильный двигатель. Так как летом может перегреваться, то лучше брать модель с воздушным охлаждением, оптимально — принудительное (с помощью кулера).

Рама должна быть собрана так, чтобы на ней можно было закрепить двигатель.Будет он расположен спереди или сзади – неважно, главное, чтобы он был надежно закреплен. Здесь есть два варианта:

  1. Сделать новую раму «с нуля» из труб. При этом необходимо иметь оборудование, позволяющее сгибать материал.
  2. Возьмите за основу раму от мотоцикла, уберите лишнее и добавьте необходимое.

Перед изготовлением окончательного варианта каркаса желательно сделать точечную сварку и свериться с чертежами.

Как сделать квадроцикл своими руками на основе готовой рамы?

Необходимо удалить с него все лишнее, оставив только саму рамку. Задняя часть снимается, а впереди наращиваются трубы, мост вваривается.

Далее берутся запчасти от автомобиля и дополнительные металлические трубы, оптимальным вариантом будет сантехника. Чтобы сделать каркас для кузова, понадобится труба 70х40. Его длина должна быть равна или больше длины пружины, а ширина такая же, как у моста.

Кардан должен соединяться с коробкой с помощью резиновой муфты, а с мостом — с помощью фланцев. Привод легко сделать своими руками с помощью цепи от ИЖ.

Если планируется установка пружин на амортизаторы, задний маятник желательно оставить с сайлентблоками.

После изготовления рамы необходимо закрепить на ней двигатель. Глушитель можно использовать самодельный.

Трансмиссия

Должен быть установлен качественно, чтобы не было люфта.Двигатель и привод можно снять с мотоцикла, а колеса использовать от автомобиля. Ствол легко сделать из труб с тонкими стенками.
Возможны два варианта управления:

  1. С помощью руля (в данном случае база берется от автомобиля).
  2. С помощью руля от мотоцикла. Подхватывает с руля бензобак. Для самодельного рулевого вала подойдет труба 20 мм со стенками 2,8. Внизу должен быть ограничитель.

Подвеску можно сделать как переднюю, так и заднюю. При изготовлении спинки возможны два варианта:

  1. подержанный автомобиль с задним мостом. Его нужно будет укоротить. Конструкция будет тяжелой, зато будет дифференциал, что пригодится на гусеницах.
  2. Используется зубчато-карданный механизм. На задней оси установлен редуктор, а к дискам прикреплены колеса. Это облегченный вариант подвески для самодельного квадроцикла. У него нет дифференциала, но это не критично.

Передняя подвеска используется от мотоцикла. Можно сделать полноприводную модель, но это гораздо более трудоемкая работа, да и требует определенных навыков в поворотах.

Маятниковые рычаги установлены таким образом, чтобы при повороте колес квадроцикла они не цеплялись за двигатель. Если используется рама Урал, то колеса должны быть смещены дальше. К рулевой колонке приварены две сошки: на левом и правом колесе. Передняя стойка должна быть наклонной.

Квадроцикл с полным приводом

Для его изготовления вам понадобится рулевое управление от автомобиля, привод от механической трансмиссии, подвеска и дифференциалы.Подвеску, как и рулевое управление, можно снять с автомобиля. Рама в таких случаях варится полностью с нуля, отталкиваясь от размера двигателя будущего квадроцикла. На передней подвеске следует учесть место для редуктора для привода.

Используя автотовары, купленные на вторичном рынке, можно относительно недорого собрать автомобили для сложных дорог и сельской местности. Одним из бюджетных вариантов источника является мотоцикл Урал, так как он недорогой, имеет задний привод и четырехтактный двигатель.Благодаря своим положительным сторонам он популярен.

Самодельный квадроцикл – это не только удобное и практичное транспортное средство, это повод для гордости и возможность продемонстрировать свое мастерство. Внешне он может и уступает заводским образцам, но по своим техническим характеристикам самодельные квадроциклы ничуть не хуже.

Пожалуй, единственный минус (кроме потраченного времени, так как любимое дело не в тягость) – необходимость привлечения автоэкспертов для получения документов и возможности зарегистрировать квадроцикл.

Квадроцикл — это фактически любое четырехколесное транспортное средство, так как в латинском «quadro» — «четыре», на просторах СНГ это название чаще всего означает полноприводный, представляя собой симбиоз мотоцикла и автомобиля. От мотоцикла квадроцикл перенял подвижность, маневренность, легкость, скорость, а от автомобиля — отличную проходимость, мощность и управляемость. В результате получился уникальный автомобиль, предназначенный для самых разных целей.

На отечественном рынке представлены только зарубежные модели квадроциклов, стоимость которых зачастую заоблачная.В то же время на вторичном транспортном рынке легко можно найти подержанные мотоциклы и автомобили по крайне низкой цене.

Например, мотоцикл Урал — большой, громоздкий, тяжелый и «прожорливый» имеет отличный четырехтактный двигатель с задней передачей и стоит каждой копейки. По этой причине для энтузиастов гораздо дешевле и интереснее создавать собственные конструкции этих внедорожников.

Типичный заводской представитель квадроциклов — блестящий, аккуратно собранный, крепкий и мощный.

Его самодельный аналог, который немного уступает внешне, а уж тем более по мощности.

Как сделать квадроцикл своими руками

Перед началом сборки необходимо составить подробный перечень узлов и деталей, которые потребуются для создания собственного детища, разработать план работ и конструкторский чертеж.

Двигатель

: лучший выбор

Логично, что в первую очередь необходимо найти «сердце» будущего «зверя» — силовой агрегат.Подойдет абсолютно любой, от обычного мотоблока до шестилитрового V12 — такие прецеденты есть. В большинстве случаев используются мотоциклетные двигатели – они экономичны и малогабаритны.

Для использования высоких передаточных чисел в нормальных условиях эксплуатации достаточно двигателя «Минск» или «Урал». Летом встает вопрос перегрева, поэтому следует выбирать модели с воздушным охлаждением. Еще хороший вариант – оппозитные двигатели советского производства, неоспоримый плюс которых – мощная тяга и совершенно неприхотливая трансмиссия.

Подвески: задняя и передняя

Есть два наиболее распространенных решения задней подвески для квадроцикла.

  1. Карданно-редукторная система. Конструкция получается максимально облегченной и простой, но при этом отсутствует дифференциал, которым, в принципе, можно пожертвовать ради ранее названных достоинств.
  2. Использование автодорожного моста. Конструкция получается крайне тяжелой, и если нет желания иметь квадроцикл с автомобильной базой, приходится укорачивать мост, что является весьма нетривиальной задачей.Из плюсов стоит выделить только наличие дифференциала, что полезно при движении по трассам.

Передняя подвеска и рулевое управление имеют огромные возможности. Рычаги подвески квадроцикла несут значительно меньшую нагрузку, чем автомобильные, соответственно, их можно изготовить самостоятельно, используя для этого подручные средства. Оптимальный вариант — создание подвески на базе существующего мотоцикла «Урал».

Рама: чертежи и альтернатива

Лучшее решение – цельная конструкция из труб или профилей, сваренных между собой.

В идеале снять раму с мотоцикла-донора и добавить необходимые элементы — это снимает ряд проблем, но конструкция может получиться излишне сложной.

Квадроцикл в сборе

Подготовив необходимые инструменты, автомобили-доноры и высвободив время, можно приступать к созданию собственного квадроцикла:


Благодаря надежной, проверенной временем конструкции, отличной мощности и тяге именно мотоцикл Урал является самым популярным донором для самодельных квадроциклов.

Видеоролик: «Оса» 4х4

В видео ниже рассказывается о конструкции самодельного квадроцикла, его характеристиках, свойствах и особенностях.

Фотообзор

Фото квадроциклов на базе отечественных мотоциклов и автомобилей:


Как видно используя устаревшие и недорогие достижения советского автопрома, можно создавать удивительные автомобили, которые потешат ваше самолюбие и удовлетворят большинство транспортных задач.

(PDF) Вклад социальных наук в исследования службы здравоохранения, ориентированные на язву Бурули, в Западной Африке

270

23.Кока Э. (2018) Знания и представления сообщества о язвах Бурули в округе Обом

южного муниципалитета Га в районе Большой Аккры в Гане. Adv Appl Sociol

8(09):621

24. Stienstra Y, van der Graaf WT, Asamoa K, van der Werf TS (2002) Убеждения и отношение к

Язва Бурули в Гане. Am J Trop Med Hyg 67(2):207–213

25. Tschakert P, Ricciardi V, Smithwick E, Machado M, Ferring D, Hausermann H, Bug L (2016)

Знание о патогенных ландшафтах в Гане: понимание появления

язвы Бурули посредством качественного анализа.Soc Sci Med 150:160–171

26. de Zeeuw J, Omansen TF, Douwstra M, Barogui YT, Agossadou C, Sopoh GE, Phillips RO,

Johnson C, Abass KM, Saunderson P, Dijkstra PU (2014) Сохраняющиеся ограничения на участие в общественной жизни

среди бывших пациентов с язвой Бурули в Гане и Бенине. PLoS Negl Trop Dis

8(11):e3303

27. Рибера Дж.М., Гритенс К.П., Тумер Э., Хаусманн-Муэла С. (2009) Предостережение от тенденции стигмы

в исследованиях и борьбе с забытыми тропическими болезнями.PLoS Negl Trop Dis 3(10):e445

28. Agbo I (2015) Гендерное влияние язвы Бурули на здоровье домохозяйства:

почему децентрализация благоприятствует женщинам. Tropical Med Int Health 20:298

29. Агбо И., Джонсон С., Сопох Г., Нихтер М. (2019)Гендерное влияние язвы Бурули на

домохозяйств в области здравоохранения и социальной защиты: почему децентрализация благоприятствует женщинам. Plos

(ожидается)

30. Amoussouhoui AS, Sopoh GE, Wadagni AC, Johnson RC, Aoulou P, Agbo IE, Houezo JG,

Boyer M, Nichter M (2018) Внедрение децентрализованного лечения на базе сообщества

Программа

по улучшению лечения язвы Бурули в округе Уинхи, Бенин, Западная

Африка.PLoS Negl Trop Dis 12(3):e0006291

31. Ackumey MM, Kwakye-Maclean C, Ampadu EO, de Savigny D, Weiss MG (2011) Health

услуги по борьбе с язвой Бурули: уроки полевого исследования в Гана. PLoS Negl Trop Dis

5(6):e1187

32. Webb BJ, Hauck FR, Houp E, Portaels F (2009)Язва Бурули в Западной Африке: стратегии раннего выявления и лечения

в эпоху антибиотиков. East Afr J Public Health 6:144–147

33. Johnson RC, Makoutode M, Hougnihin R, Guédénon A, Ifebe D, Boko M, Portaels F (2004)

Традиционная традиция ульсере де Бурули в Бенине .Med Trop 64(2):145–150

34. Koka E, Yeboah-Manu D, Okyere D, Adongo PB, Ahorlu CK (2016) Культурное понимание

ран, язв Бурули и их лечение в суб- район южного муниципалитета Га —

палити региона Большая Аккра в Гане. PLoS Negl Trop Dis 10(7):e0004825

35. Нихтер М. (2008) Приходить в себя: оценка чувственного в медицинской антропологии.

Транскульт психиатрии 45(2):163–197

36.Barogui YT, Sopoh GE, Johnson RC, de Zeeuw J, Dossou AD, Houezo JG, Chauty A, Aguiar

J, Agossadou D, Edorh PA, Asiedu K (2014) Вклад волонтеров общественного здравоохранения

в контроль Язва Бурули в Бенине. PLoS Negl Trop Dis 8(10):e3200

37. Acumey MM, Gyapong M, Pappoe M, Maclean CK, Weiss MG (2012) Социально-культурные детерминанты своевременного и отсроченного лечения язвы Бурули: последствия для контроль заболеваний.

Infect Dis Poverty 1(1):6

38.Лабхардт Н.Д., Абоа С.М., Манга Э., Бенсинг Дж.М., Лангевитц В. (2010) Преодоление разрыва: как

традиционных целителя взаимодействуют со своими пациентами. Сравнительное исследование в Камеруне. Trop Med Int

Health 15(9):1099–1108

39. Nichter M, Quintero G (1996) Плюралистические системы терапии: почему они сосуществуют и как они используются. В: Левинсон Д., Эмбер М. (ред.) Энциклопедия культурной антропологии. Henry Holt,

New York, стр. 1–17

40. Ahorlu CK, Koka E, Yeboah-Manu D, Lamptey I, Ampadu E (2013) Усиление контроля над язвой Бурули

в Гане посредством социальных вмешательств: a тематическое исследование Обомского подрайона.BMC

Общественное здравоохранение 13(1):59

41. Owusu-Sekyere E (2013) Заболеваемость язвой бурули в западном округе аманси в Гане:

миф или реальность? J Pub Health Epidemiol 5(10):402–409

42. Hausermann HE (2015) «Я больше не мог бездействовать»: группы по лечению язвы бурули в

сельских районах Ганы. Environ Plan A 47(10):2204–2220

М. Нихтер

1. Введение

1. Введение

XXI век – век мозга и разума (Совместное заявление G7/G8 на саммите G- Научные советы), с необходимостью понимания мозга, защиты его от болезней и разработки глобальных ресурсов, связанных с мозгом [1,2].Заболевания головного мозга представляют собой глобальную проблему для индивидуального здоровья, благополучия, экономической производительности и интеллектуального капитала [3,4].

Существует несколько типов слабоумия с различными причинами; однако болезнь Альцгеймера (БА) является наиболее распространенной; примерно 50 миллионов человек во всем мире болеют БА. В Японии насчитывается более 7 миллионов человек с деменцией, из них около 5 миллионов с БА [5].

AD — это специфическое нейродегенеративное заболевание, при котором прогрессирующее воспаление и повреждение нервов приводят к деменции.Одним из предполагаемых факторов, способствующих развитию БА, является гипотеза амилоидного каскада [6,7], которая предполагает, что накопление амилоида-β (Аβ) и тау-белка в очагах разрушения нейронов или клинической смерти в головном мозге приводит к нарушению гомеостатических функций головного мозга, что приводит к нейротоксичности. Было предложено несколько гипотез относительно этиологии БА [8,9]. Нейропатология, общая для всех гипотез, включает старческие бляшки, нейрофибриллярные изменения и повышенный уровень нейровоспаления.Были исследованы различные методы лечения, в том числе разработка лекарств, подавляющих выработку Aβ₋tau; нацеливание на производство, агрегацию и отложение Aβ [10,11] и производство активных форм кислорода в нейронах [12]; утилизация апоптоза и выработка ингибиторов воспаления; и терапия на основе стволовых клеток [13,14]. К сожалению, не существует лечения, способного обратить вспять прогрессирование БА. Существует твердое убеждение, что БА является заболеванием головного мозга. Однако также известно, что патогенез БА обусловлен другими системами, генетическими факторами, сердечно-сосудистыми заболеваниями, диабетом 2 типа, метаболическим синдромом, курением, черепно-мозговой травмой и иммунной дисфункцией [15,16].Взаимодействие множества генетических факторов риска и факторов окружающей среды способствует возникновению и прогрессированию атопического дерматита, и существует острая необходимость в лечении. Хотя введение лекарств субъектам с высоким риском развития заболевания в течение длительного периода желательно до начала заболевания, побочные эффекты, продолжительность введения и стоимость остаются проблематичными; поэтому профилактическое лечение, которое является недорогим и безопасным для долгосрочной профилактики, имеет важное значение.

Хотя выяснение основного механизма в настоящее время задерживается, мы считаем, что дегенерация нервной системы коренится в окислительном стрессе и воспалении, учитывая, что хорошо известно, что диета смягчает эти явления.Например, есть сообщения о корреляции между мозгом и кишечником, когда сигналы в кишечнике, вызванные пищей, передаются непосредственно в мозг через блуждающие и чувствительные нервы [17].

Взаимосвязь между микробиотой кишечника и заболеваниями хорошо задокументирована при таких состояниях, как аллергия и астма [18], воспалительное заболевание кишечника [19], заболевания, связанные с ожирением [20], и системное воспаление. Считается, что изменения в составе микробиоты опосредуют неврологические или нейродегенеративные состояния [21,22].Имеются обширные данные о связи поведения микробиоты кишечника со многими критическими гомеостатическими процессами, которые помогают поддерживать здоровую иммунную систему человека. Мы исследовали патогенез мышиной модели болезни Сандхоффа (SD), неврологического состояния, вызванного таламической нейродегенерацией, для которой нет надежного лечения, и обнаружили дисбактериоз в кишечной микробиоте мышей с SD [23]. Мы сообщили о новой терапии, при которой пищевые добавки с использованием экстракта семян юзу, лимоноида и спермина, контролировали разнообразие кишечной микробиоты у мышей.Было обнаружено, что метаболиты, продуцируемые микробиотой кишечника и иммунным ответом, подавляют нейродегенерацию в таламусе и увеличивают продолжительность жизни [23]. Хотя механизмы, лежащие в основе повышенной проницаемости кишечника при дисбактериозе, остаются неясными, одним из важных факторов является то, что лимоноидная диета ингибирует повышенную проницаемость кишечника у мышей SD. Также считается, что дисбактериоз возникает в кишечнике пациентов в начале БА [24].

В этом исследовании мы стремились изучить изменения в микробиоте кишечника при прогрессировании БА и одновременно определить механизм, который мог бы привести к разработке недорогих профилактических препаратов против БА через микробиоту кишечника.Основываясь на результатах наших ранее опубликованных исследований [23,25], мы выбрали диету, содержащую L-аргинин и лимоноиды, полученные из семян юдзу, для поддержания гомеостаза у мышей с болезнью Альцгеймера посредством взаимодействия между мозгом и кишечником, а также для торможения или облегчения прогрессирования заболевания. . Сообщается, что микроглия в головном мозге делится, изменяется и начинает потреблять большое количество аргинина на ранних стадиях патогенеза нейродегенеративных заболеваний [26]. L-аргинин уже применяется в качестве лекарственного средства для лечения врожденных нарушений цикла мочевины и митохондриальной энцефаломиопатии.Кроме того, он может проникать через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) и проникать в головной мозг.

Не сообщалось о токсичности из-за избыточного накопления в организме хозяина при экзогенном введении L-аргинина, и ожидается, что введение L-аргинина мышам с болезнью Альцгеймера поможет поддерживать физиологические функции митохондрий. L-аргинин метаболизируется до NO и L-цитруллина по пути L-аргинин-оксид азота. L-аргинин оказывает свое влияние на сердечно-сосудистую систему, соответствующим образом увеличивая продукцию NO в пути синтазы оксида азота [27], т.е.е., дефицит L-аргинина в эндотелии сосудов может вызвать дефицит NO, молекулы, необходимой для предотвращения атеросклероза [28]. В невропатологии AD сообщалось о многих связях с атеросклерозом [29,30]. Гиперхолестеринемия является хорошо известным фактором риска атеросклероза и может вызывать эндотелиальную дисфункцию и повреждение клеток сосудов [31], а также нарушение метаболизма L-аргинина [32]. Таким образом, доступность экзогенного L-аргинина может быть важна для подавления патогенеза БА.

Кроме того, L-аргинин участвует в метаболическом пути синтеза аргиназы-полиамина. Мы предположили эффект взаимодействия лимоноидной диеты и полиаминов как один из механизмов профилактики нарушений кишечной микробиоты на модели заболевания ЦНС у мышей SD [23].

Таким образом, полиамины, которые метаболизируются и продуцируются из L-аргинина, вносят значительный вклад в микробиоту кишечника и здоровье хозяина, особенно в поддержание барьера слизистой оболочки кишечника [23,33] и стимулирование аутофагии [34].Кроме того, полиамины, как сообщается, могут ингибировать усиленное фосфорилирование и внутриклеточное накопление тау, белка агрегации микротрубочек при БА [35]. Следовательно, экзогенный L-аргинин и лимоноиды могут быть важной молекулярной комбинацией для лечения БА. В настоящем исследовании мы попытались контролировать баланс между путями синтеза оксида азота и полиаминов путем введения L-аргинина, а также диетических добавок лимоноидов на модели мышей с AD для поддержания кишечной микробиоты, участвующей в гомеостазе хозяина и для торможения прогрессирования заболевания.Кроме того, мы изучили поведение микробиоты кишечника, цитокинов, хемокинов и сигнальных молекул во время прогрессирования заболевания на модели мышей с AD и изучили взаимодействия между мозгом, печенью, поджелудочной железой, кишечником и микробиотой кишечника.

2. Материалы и методы 2.1. Материалы

Как сообщалось в предыдущем исследовании, лимоноиды, использованные в экспериментах, были извлечены и очищены из семян юзу [36]. Вкратце, лимоноидная смесь, экстрагированная и очищенная из семян юдзу, приобретенных в Kyoto Mizuo (Япония), состояла из деацетилномилина (105 мг/г -1 ), лимонина (95 мг/г -1 ), номилина (115 мг/г -1 ). ) и обакунон (17 мг г -1 ) на грамм высушенных семян юзу.В дополнение к лимоноидному компоненту семена юдзу также были хорошим источником витамина С.

Определение состава компонентов лимоноида и масла семян юдзу проводили с помощью анализаторов высокоэффективной жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии и газовой хроматографии фирмы Shimadzu Systems (Киото, Япония) [25]. Стандартные аналитические реагенты или сверхчистые реагенты, использованные в анализе, были приобретены у Wako Pure Chemical Company (Осака, Япония). Для кормления мышей лимоноидами 500 г липофильных лимоноидов, извлеченных и очищенных из семян юдзу, были заказаны компании Nippon Clare (Токио, Япония), которая приготовила 10 кг стерилизованного гамма-излучением корма после смешивания и формования липофильных лимоноидов в коммерческий корм для мышей. .

2.2. Мыши

Все мыши, использованные в этом исследовании, были выращены и выращены в стандартных нестерильных условиях. Все мыши, в том числе мыши дикого типа (WT), необходимые с точки зрения исследования болезни Альцгеймера, были предоставлены RIKEN BRC в рамках Национального проекта биоресурсов MEXT/AMED, Япония. Нокаут-мыши были созданы с использованием ЭС клеток, полученных из C57B, в которых генетическая мутация была вставлена ​​в область амилоида-β гена мыши, докторами Такаши Сайто и Доктором Такаоми Саидо из Института исследований мозга RIKEN ( Сайтама, Япония) [37].Только шведская мутация (нок-ин App, RBRC06342), двойная мутация с иберийской мутацией (нок-ин App, RBRC06343) и тройная мутация с арктической мутацией (App нокаут, RBRC06344). В качестве отрицательного контроля использовали мышей с нокаутом App. Гомозиготные мыши App показали развитие амилоидных бляшек в головном мозге с 2-месячного возраста. Мыши с нокаутом App демонстрировали поведенческие аномалии в Y-образном лабиринте с 6-месячного возраста.

2.3. Исследование эффектов введения L-аргинина и лимоноида на моделях мышей

В настоящем исследовании мышей C57BL/6-App AD кормили только коммерческой диетой (Nippon Clea Co., Ltd. , Токио, Япония) в составе контрольной группы AD (AC). Мышей, получавших рацион, содержащий лимоноиды и 0,17–0,20 мг L-аргинина, растворенного в 200 мл питьевой воды, обозначали как мышей с БА, получавших лимоноиды + L-аргинин (АЛК), а мышей, получавших только рацион, содержащий лимоноид, обозначали как Мышей AD кормили только лимоноидами (AL).Мышей отрицательного контроля с нокаутом App, как дикий тип, обозначали как WC и кормили только коммерчески доступным рационом, специально разработанным для мышей.

Таким образом, мыши AD (n = 16; только самцы) состояли из следующих трех групп: группа AC, n = 4; группа АЛА, n = 4; и группа AL, n = 4. Группа WC состояла только из пяти мышей-самцов.

Ограничение рациона начинали с 8-недельного возраста примерно до 53-64-недельного возраста, когда животные умирали и измеряли изменения массы тела.В 53 недели применялась гуманная конечная точка, когда мыши AC впервые умирали и больше не могли достигать приемлемого состояния здоровья. Для анестезии использовали 25 мл тройной смеси анестетиков [38] (1,875 мл (требуемая доза для мышей; 0,75 мг/кг -1 ) Domitor (Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd., Корияма, Япония), 2 мл (для мышей). требуемая доза; 4 мг кг -1 ) мидазолам «SANDOZ» (Sandoz Co., Ltd., Токио, Япония), 2,5 мл (требуемая доза для мыши; 5 мг кг -1 ) Vetorphale (Meiji Pharma Co., Ltd., Токио, Япония) в 18,625 мл физиологического раствора) готовили в соответствии с соотношением препаратов и вводили внутрибрюшинно 0,1 мл на 10 г массы тела мышей.

Среднесуточное потребление (г) ± стандартное отклонение (SD) лимоноидов и L-аргинина в группе АЛК с 12 до 64 недель составило 5,42 г ± 0,710 г мышь/кг -1 день -1 и 0,15 г ± 0,031 мыши кг -1 дней -1 соответственно, тогда как у лимоноидов в группе AL было 5,37 г ± 0.797 мышь кг -1 день -1 .

2.4. Образцы фекалий и экстракция ДНК

Образцы фекалий (50–100 мг) собирали у мышей в возрасте до 12–64 недель в пробирки объемом 2 мл (Eppendorf, Гамбург, Германия) и обрабатывали для выделения ДНК. Использовали систему роботизированной рабочей станции QIAcube для автоматизированной очистки ДНК с набором спин-колонок QIAGEN и набором QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit (Qiagen, Германия); Экстракцию ДНК проводили в соответствии с инструкциями производителя (Qiagen, Германия).ДНК элюировали 100 мкл элюирующего буфера, входящего в комплект. Для отдельных образцов фекалий ДНК экстрагировали из образцов, собираемых каждую неделю в трех повторностях для каждого образца; таким образом, образцы ДНК для дальнейшего анализа (каждый образец × три экземпляра). Количество ДНК измеряли с помощью флуорометра Invitrogen Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific, Токио, Япония), а оставшуюся ДНК хранили при температуре -20 °C до дальнейшего использования.

2.5. Образцы тканей мышей и экстракция ДНК

Образцы тканей (головной мозг, поджелудочная железа, почки, спинной мозг, печень, толстая кишка, тонкая кишка, селезенка, сердце, лейкоциты и желудок; примерно по 25 мг каждый) собирали в пробирки объемом 2 мл ( Эппендорф, Германия) до достижения мышами возраста 53 или 64 недель и их использовали для экспериментов по выделению ДНК.При этом использовалась роботизированная рабочая станция QIAcube для автоматизированной очистки ДНК с использованием набора для спин-колонок QIAGEN (DNeasy Blood & Tissue Kit; Qiagen, Германия). Экстракцию ДНК проводили согласно инструкции производителя с использованием системы QIAcube (Qiagen, Германия). ДНК элюировали 200 мкл элюирующего буфера, входящего в комплект. Из отдельных образцов ткани трижды экстрагировали ДНК из каждого образца ткани, и образцы ДНК сохраняли для дальнейших анализов (по три образца из каждой группы).Количество ДНК измеряли с помощью флуорометра Invitrogen Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific, Япония), а оставшуюся ДНК хранили при -20 °С до дальнейшего использования.

2.6. Анализ микробиоты кишечника: подготовка библиотеки для секвенирования ампликонов 16SrРНК

Использовался протокол Illumina «Подготовка библиотеки для метагеномного секвенирования 16S, подготовка 16S рибосомной РНК (v4), генных ампликонов для системы Illumina Miseq/MiniSeq». Вариабельную область V4 16S рРНК амплифицировали из бактериальной ДНК, выделенной из фекалий.Наиболее перспективной парой бактериальных праймеров для амплификации в полимеразной цепной реакции (ПЦР) был ампликон 16S (прямой праймер (5′-TCGTCGCCAGCCGTCAGATGTGTATAGAGACAGGTGYCAGCMGCCGCGG TAA-3′) и обратный праймер (5′-GTCTCGTGCCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAGGGA CTACHVGGGTWTCTAAT-3′)). Праймеры были синтезированы с использованием Hokkaido System Science Co. (Хоккайдо, Япония), и адаптер Illumina (Сан-Диего, Калифорния, США), выступающий над нуклеотидной последовательностью, был добавлен к 5′-концу обоих праймеров. Подготовленные ампликоны генов рибосомной РНК 16s для системы illumina MiniSeq, используемой в NGS, были выполнены, как сообщалось в предыдущем исследовании [23].Концентрацию ДНК в подготовленных библиотеках определяли с помощью Qubit (Thermo Fisher, Уолтем, Массачусетс, США) для подтверждения концентрации методом количественного определения флуоресценции, который позволяет специфически обнаруживать дуплексную ДНК и при необходимости переводить в единицы нМ. На основании этого расчета все библиотеки были объединены в эквимолярных количествах, денатурированы и разбавлены до 1,5 пМ перед загрузкой в ​​проточную кювету MiniSeq и секвенированием на платформе Illumina MiniSeq (Illumina, Сан-Диего, Калифорния, США).

2.7. Анализ микробиоты данных секвенирования

Необработанные файлы секвенирования из обоих праймеров ампликона обрабатывали с использованием конвейера анализа микробиома QIIME™ 2 [39] (https://docs.qiime2.org (по состоянию на 9 марта 2021 г.), версия 2021.2). ). Были использованы метод и плагины (https://github.com/qiime2/ (по состоянию на 9 марта 2021 г.)). Для импорта необработанных файлов секвенирования в виде последовательности с парными концами с показателем качества по Phred [33] и создать файл «артефакт» (т.т. е. формат данных qiime2, необходимый для последующего анализа). Плагин «deblur denoise-16S» (https://docs.qiime2.org/2021.2/plugins/available/deblur/ (по состоянию на 9 марта 2021 г.)) использовался для контроля качества данных Illumina с использованием рабочего процесса Deblur (https: //github.com/biocore/deblur (по состоянию на 9 марта 2021 г.)) и для создания таблицы признаков и данных репрезентативной последовательности (т. е. вариантов последовательностей ампликонов (ASV)). Для классификации этих ASV на биологической таксономии с использованием базы данных SILVA SSU, версия 138 (https://www.arb-silva.de/documentation/release-138/ (по состоянию на 5 мая 2021 г.)) [40]. В сводке таксонов представлены гистограммы (https://docs.qiime2.org/2021.2/plugins/available/taxa/ (по состоянию на 9 марта 2021 г.)) в соответствии с группировками выборки. Представление тепловой карты таблицы объектов было создано с помощью плагина «тепловая карта функций» (https://docs.qiime2.org/2021.2/plugins/available/feature-table/heatmap/ (по состоянию на 9 марта 2021 г.)). Кроме того, размер эффекта линейного дискриминантного анализа (LEfSe) (http://huttenhower.sph.harvard.edu/galaxy/ (по состоянию на 15 августа 2021 г.)) было проведено исследование кишечных бактериальных биомаркеров, характерных для каждой группы мышей [41].

2.8. Гистопатологический анализ тканей мышей

Гистопатологические данные головного мозга, поджелудочной железы, спинного мозга, печени, тонкой кишки и других тканей АС (возраст 53 недели), WC (возраст 64 недели) и ALA и AL (64 недели). возраста) мышей, выживаемость которых была продлена диетой, состоящей из лимоноидов + L-аргинин и только лимоноидов.Кроме того, был проведен гистопатологический анализ головного мозга, поджелудочной железы, спинного мозга, печени и тонкой кишки. Каждую фиксированную формалином ткань заливали в парафин, разрезали на срезы толщиной 4 мкм и окрашивали гематоксилином и эозином (H&E). Сканер слайдов со светлым полем был использован для получения полного изображения образца, окрашенного гематоксилин-эозином, с использованием объектива с 20-кратным увеличением (Genetic Lab Corp. Ltd., Саппоро, Япония, http://www.gene-lab.com ( по состоянию на 17 августа 2021 г.)).

Неокрашенные образцы головного мозга были приготовлены для иммунофлуоресцентного окрашивания глиального фибриллярного кислого белка (GFAP), ионизированного связывающего кальций адапторного белка 1 (Iba1) и тройного флуоресцентного окрашивания амилоидных бляшек с использованием Amyloid-Glo.Для окрашивания GFAP в качестве первичных и вторичных антител использовали конъюгированные антитела к GFAP куриного происхождения (Abcam plc.) и козьи анти-куриные IgY (H + L) (Thermo Fisher Scientific Inc., Токио, Япония). с Alexa Fluor 488 (Thermo Fisher Scientific Inc., Токио, Япония).

Для окрашивания Iba1 в качестве первичного антитела использовали кроличье антитело к Iba1 (Abcam plc.), а перекрестно-адсорбированное вторичное антитело козы к IgG кролика (H + L) (Thermo Fisher Scientific Inc., Уолтем, Массачусетс, США) использовали в качестве вторичного антитела; их окрашивали Alexa Fluor 568 (Thermo Fisher Scientific Inc., Уолтем, Массачусетс, США). Кроме того, для включения использовали реагент proLong Gold Antifade Reagent с DAPI (Thermo Fisher Scientific Inc., Уолтем, Массачусетс, США).

Для окрашивания амилоида использовали реагент для окрашивания амилоидного налета Amylo-Glo RTD, который запечатывали реагентом proLong Gold Antifade Reagent с DAPI. Подготовленные окрашенные образцы фотографировали с помощью конфокального цитометра с 40-кратным объективом (Genetic Lab Corp.Ltd. Саппоро, Япония, http://www.gene-lab.com (по состоянию на 20 августа 2021 г.)). Изображения были сделаны независимо для каждого образца, и, наконец, были подготовлены наложенные изображения GFAP (зеленый), Iba-1 (красный) и амилоид (синий).

2.9. Измерение концентрации цитокинов/хемокинов в крови мышей

Концентрации цитокинов/хемокинов в крови мышей AC, ALA, AL и WC измеряли с помощью системы Multiplex Suspension Array System (система Luminex ® 100/200TM; Luminex Corp., Остин, Техас, США) с использованием MILLIPLEX ® MAP Mouse Cytokine/Chemokin Magnetic Bead Panel (Merck Millipore Corp., Берлингтон, Массачусетс, США). Образцы крови собирали у мышей AC, ALA, AL и WC в возрасте 30 недель и 53 (только AC) или 64 недели и центрифугировали при 2300×g в течение 15 минут при 4 °C для сбора сыворотки. Уровни интерлейкина (3, 5, 7, 9, 10, 13, 15 и 17), фактора некроза опухоли (ФНО)-α, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), эотаксина, белка воспаления макрофагов (MIP) -1α, MIP-1β, измеряли уровни LIX, KC и RANTES в крови (регулируемые при активации, нормальные Т-клетки экспрессируются и секретируются).

2.10. Метаболомный анализ печени мышей методом капиллярного электрофореза–времяпролетной масс-спектрометрии

Метаболомный анализ печени мышей проводили с использованием системы капиллярного электрофореза–времяпролетной масс-спектрометрии (CE-TOFMS) (Agilent CE-TOFMS System, Agilent технологий, Токио, Япония). Катионные и анионные метаболиты анализировали одновременно методом ионизации электрораспылением (ESI) (положительный и отрицательный) методом MS с использованием капилляра из плавленого кварца с и.д. 50 мкм × 80 см при значениях m/z 50–1000 (Agilent Technologies, Япония).Метаболиты одновременно анализировали компанией Human Metabolome Technologies, Inc. (HMT Inc., Ямагата, Япония). Образец ткани приблизительно 11,7–12,5 мг был взят из одной и той же области печени мышей AC (возраст 53 недели), мышей ALA и AL (возраст 64 недели) (n = 4, каждая). Всего было приготовлено 46,9–49,0 мг путем смешивания четырех тканей печени для каждой мышиной модели. К собранным образцам тканей добавляли 750 мкл 50% раствора ацетонитрила (об./об.) (стандартная внутренняя концентрация: 20 мкМ) и образцы измельчали ​​(1500 об/мин в течение 120 с × 3 раза) с использованием дробилки при охлаждении.К этому добавляли 750 мкл 50% раствора ацетонитрила (об./об.). После разрушения ткани проводили центрифугирование (2300×g, 4°С, 5 мин). После центрифугирования 400 мкл верхнего слоя переносили в ультрафильтрационную пробирку, затем центрифугировали (9100×g, 4 °С, 120 мин) и подвергали ультрафильтрации. Фильтрат сушили и снова растворяли в 50 мкл воды Milli-Q для измерения.

2.11. Метаболический анализ мышиных фекалий с помощью жидкостной хроматографии/времяпролетного масс-спектрометра

Метаболический анализ проводили с использованием жидкостной хроматографии/времяпролетного масс-спектрометра (LC-TOFMS) (HMT Inc.). Образцы фекалий от мышей AC, ALA, AL и WC (возраст 64 недели) (n = 4, каждая) от каждой мышиной модели собирали в микропробирках (Microspitz 1,5 мл, Greiner, Frickenhausen, Germany) таким образом, чтобы общее количество колебалось от 30,0 мг до 50,0 мг соответственно.

Сверхчистая вода, содержащая внутренний стандарт (20 мкМ: предоставлено HMT Inc.), была добавлена ​​к образцам фекалий в соотношении 1:9 по весу. Образцы фекалий встряхивали с помощью устройства для встряхивания (Scientific Industries Inc., Богемия, Нью-Йорк, США) до полного растворения и центрифугирования (2300×g, 4°С, 5 мин). После центрифугирования 350 мкл верхнего слоя переносили в пробирку для ультрафильтрации. Образец центрифугировали (9100×g, 4 °C, 120 мин), подвергали ультрафильтрации, 100 мкл фильтрата сушили и растворяли в 400 мкл 50% раствора изопропанола (об./об.) для приготовления образца для измерения. Жидкостно-хроматографический анализ проводили при следующих условиях: колонка ODS, 2 мм × 50 мм, 2 мкм; температура колонки 40 °С; подвижная фаза A, H 2 O/0.1% HCOOH, подвижная фаза B, изопропанол:ацетонитрил:H 2 O (65:30:5)/0,1% HCOOH, 2 мМ HCOONH 4 ; скорость потока 0,3 мл/мин; время выполнения, 20 мин; время публикации 7,5 мин.; градиентное состояние: 0–0,5 мин, 1% В; 0,5–13,5 мин, 1–100% B, 13,5–20 мин, B. МС проводили с помощью ВЭЖХ/МСД Agilent TOF (Agilent Technologies) с использованием метода ESI (положительного и отрицательного) МС для одновременного анализа катионных и анионных метаболитов из м/з 100–1700.

2.12. Обработка и анализ данных анализа метаболизма

Пики, обнаруженные с помощью CE-TOFMS и LC-TOFMS, были автоматически извлечены с использованием программного обеспечения для автоматической интеграции MasterHands ver.2.17.1.11 (Университет Кэйо, Япония) для пиков с отношением сигнал-шум (S/N) 3 или выше, отношением массы к заряду (m/z), значениями площади пика и времени плавания. (МТ). Затем предполагаемые метаболиты были назначены из стандартной библиотеки HMT на основе определенных m/z и времени миграции. Одновременно проводили абсолютную количественную оценку целевых метаболитов путем нормирования площади пика каждого метаболита на площадь внутреннего стандарта. Анализ основных компонентов, иерархический кластерный анализ и обозначение тепловой карты были выполнены с использованием программного обеспечения для статистического анализа (разработанного HMT).В обоих анализах данные были предварительно обработаны путем стандартизации по пикам (μ = 0, σ = 1). Метаболические пути были разработаны на основе ферментов, идентифицированных у человека.

В метаболическом анализе печени мыши соединение-кандидат было отнесено к 331 пику (катион 196, анион 135) на основании значений m/z и MT веществ, зарегистрированных в библиотеке известных-неизвестных метаболитов HMT на основе метаболического анализа с помощью КЭ. -ТОФМС.

Напротив, в метаболическом анализе с использованием мышиных фекалий с помощью LC-TOFMS соединения-кандидаты были отнесены к 191 (105 положительных, 86 отрицательных) пикам на основе значений m/z и RT веществ, зарегистрированных в библиотеке метаболитов HMT, и Отношения значений относительных площадей рассчитывали для всех пиков соединений-кандидатов.

2.13. Статистический анализ

Мы использовали критерий Крускала-Уоллиса для множественных попарных сравнений, чтобы оценить существенные различия в относительной численности бактериальных популяций. Кроме того, данные CSV по таксономии бактерий были экспортированы из QIIME2 (f taxa-bar-plots.qzv) для сравнения с другими экспериментальными параметрами.

Непрерывные параметрические данные сравнивались с использованием однофакторного дисперсионного анализа, за которым следовал апостериорный анализ Тьюки. Непарные наблюдения анализировали с использованием одностороннего t-критерия Стьюдента.Порог значимости был установлен на уровне p < 0,05. Данные выражены как среднее значение ± стандартное отклонение. Корреляция между переменными измеренных данных была проанализирована с использованием коэффициента корреляции Пирсона продукт-момент.

Уровни цитокинов и хемокинов в крови мышей выражали как среднее значение ± стандартное отклонение, а для анализа между группами проводили однофакторный дисперсионный анализ и t-критерий. Порог достоверных различий был установлен на уровне p < 0,05.

3. Результаты 3.1. Изменения в кишечной микробиоте мышей, получавших лимоноиды и L-аргинин, в мышиной модели AD

. Как показано на рисунке 1A, альфа-разнообразие кишечной микробиоты было самым высоким в 20 недель для AC, 53 недели для AL и 46 недель. недель для WC, предполагая, что добавка ALA поддерживала богатую микробиоту до последних 64 недель.В группе AC разнообразие бактериальной флоры значительно уменьшилось через 52 недели, за неделю до гибели первой мыши, что свидетельствует о возникновении дисбактериоза [41], который представляет собой нарушение поддержания гомеостаза кишечной микрофлоры. Наоборот, бактериальная флора в группах AL и ALA сохраняла разнообразие через 53 недели и значительно отличалась от таковой в группе AC. Однако разнообразие бактериальной флоры в WC уменьшилось с 53 недель, а в группе AL уменьшилось с 59 недель.

На рисунке 1B в кишечной микробиоте в фекалиях мышей преобладали типы Bacteroidetes и Firmicutes, а временное изменение численности Firmicutes и Bacteroidetes было различным у мышей AC, AL, ALA и WC. У мышей AC, AL и WC соотношение Firmicutes/Bacteroidetes быстро увеличивалось с 53 до 59 недель. В группах AC (53 недели), AL и WC (64 недели), в которых разнообразие бактериальной флоры значительно уменьшилось (рис. 1А), соотношение Firmicutes/Bacteroidetes также значительно уменьшилось (AC, 7.0 ± 1,1; АЛ. 6,1 ± 0,51; ВК, 5,8 ± 0,12). В частности, мыши AL, которых кормили лимоноидами, имели высокую долю флоры Bacteroidetes до 53-й недели; в фекалиях мышей ALA, получавших L-аргинин + лимоноиды, соотношение Firmicutes/Bacteroidetes составляло 0,23 даже в возрасте 64 недель. В фекалиях мышей ALA, получавших L-аргинин + лимоноиды, соотношение Firmicutes/Bacteroidetes составляло 0,23 ± 9,6 × 10 -4 ; p < 0,01) даже в 64 недели, а доля Bacteroidetes оставалась высокой.

На рис. 2А показано сравнение временной зависимости между 12 и 64 неделями на уровне рода или вида бактериальной флоры в фекалиях мыши (бактерии с отдельными видами также показаны на уровне вида) с использованием анализа LEfSe, который характеризуется дисперсионный анализ, учитывающий индивидуальные различия.Чем выше показатель линейного дискриминантного анализа (LDA), тем больше он свидетельствует о бактериальных биомаркерах, характерных для микробиоты кишечника мышей AC, AL, ALA и WC [42].

Сравнивая кишечную микробиоту мышей AC и WC на ​​последней неделе выживания, мы обнаружили, что в микробиоте кишечника 53-недельных мышей AC преобладали Staphylococcus (Firmicutes-Bacilli-Staphylococcales-Staphylococcaceae), которые, как установлено, выражается в фатальных инфекциях [43]. Кроме того, группа Eubacterium ventriosum (Firmicutes-Clostridia-Lachnospirales-Lachnospiraceae) и группа Eubacterium coprostanoligenes (Firmicutes-Clostridia-Oscillospirales, E.coprostanoligenes group) [44], которые участвуют в снижении уровня желчных кислот и холестерина. Таким образом, кишечная микробиота 53-недельных мышей AC проявляла дисбактериоз, состоящий в основном из анаэробных грамположительных бактерий, принадлежащих к типу Firmicutes.

В микробиоте кишечника мышей WC, разнообразие которых резко сократилось с 53-й недели, доминировали Turicibacter, бактерия, продуцирующая короткоцепочечные жирные кислоты (SCFAs), такие как масляная кислота [45]; Faecalibaculum, известная противоопухолевая бактерия [46]; Lactobacillus, которые способствуют здоровью кишечника и широко используются при лечении синдрома раздраженного кишечника и язвенного колита [47]; и Romboutsia, что важно для поддержания слизистой оболочки кишечника [48].У 64-недельных мышей WC кишечная микробиота показала снижение количества Bacteroidetes, но Faecalibaculum [46] и Lachnospiraceae (L. FCS020, L. NK4A136) [48,49], число которых увеличивается с возрастом у здоровых хозяев, оставалось постоянным. . Обилие Lachnospiraceae также увеличивается в просвете кишечника у субъектов с различными заболеваниями, но также сообщается, что эта группа способна продуцировать полезные для хозяина метаболиты [49].

Эти бактерии принадлежат к кластеру Clostridium XIVa типа Firmicutes.Выявлено, что состав кишечной микробиоты совершенно различен у РО со сниженным разнообразием в 53 недели и у АК в состоянии дисбактериоза. С 12-й недели разнообразие кишечной микрофлоры мышей АК оказалось низким, а бактериальная флора как ОК, так и АК находилась в состоянии дисбиоза, при этом к 53-й неделе разнообразие было снижено и было совершенно различным. Эти бактерии принадлежат к кластеру Clostridium XIVa типа Firmicutes.

Напротив, в отличие от AC и WC, которые показали снижение разнообразия бактериальной флоры через 53 недели, микробиота кишечника у 53-недельных мышей AL, получавших диету из лимоноидов, показала самое высокое разнообразие между 12 и 64 неделями.Бактерии, принадлежащие к отряду Bacteroidales Muribaculaceae, Alloprevotella, Bacteroides massiliensis и Bacteroides acidifaciens, были наиболее преобладающими в микробиоте кишечника мышей AL. Виды бактерий, принадлежащие к Bacteroidales, представляют собой муколитические бактерии (муцинолитические бактерии), которые расщепляют желудочно-кишечные муцины и используют их в качестве источника углерода. Многие виды муцинолитических бактерий расщепляют муцин в пищеварительном тракте и используют его в качестве источника углерода [19,50]. В первую очередь муколитические бактерии встречаются у здоровых людей и животных.Среди них B. acidifaciens предотвращает ожирение и улучшает чувствительность к инсулину у мышей [51]. Следующими по численности бактериями были группа Firmicutes-Clostridia-Lachnospiraceae (Lachnospiraceae, L. NK4A136, L.bacterium, ASF356, Anaerostipes) [49] и порядок Firmicutes Oscillospirales (Ruminococcaceae, Anaerotruncus, Oscillospiraceae, Colidextribacter, Clostridium sp.). Виды бактерий, принадлежащие к семейству Oscillospirales, были положительно связаны с повышенной активностью антиоксидантных ферментов в сыворотке, таких как супероксиддисмутаза, глутатионпероксидаза (GSH-Px) и предполагаемая каталаза [52].Однако к 64 неделям Lactobacillus (Firmicutes-Bacilli-Lactobacillales-Lactobacillaceae) заменили Bacteroidales в качестве основных составляющих бактерий. Кроме того, значительно увеличилось количество Lachnoclostridium и Roseburia, принадлежащих к семейству Lachnospiraceae, и Adlercreutzia, Adlercreutzia mucosicola и Gordonibacteria, принадлежащих к семейству Eggerthellaceae типа Actinobacteria. Было показано, что эти виды бактерий играют роль в преобразовании биоактивных вторичных соединений растений, таких как даидзеин из соевых бобов и транс-ресвератрол из виноградной лозы [53].Точно так же с 53 по 64 неделю количество кишечных бактерий, проявляющих характеристики диеты AL, уменьшилось примерно на 50%, что указывает на то, что микробиота была совершенно другой.

В группе ALA разнообразие бактериальной флоры медленно увеличивалось, даже до возраста 64 недель. В частности, значительно увеличилось количество муколитических видов бактерий, принадлежащих к отряду Bacteroidales (Muribaculaceae, B. acidifaciens, B. massiliensis, Alloprevotella, Muribaculum, Bacteroides, Odoribacter и Parabacteroides distasonis).Эти бактерии сосуществовали с группой Firmicutes-Clostridia-Lachnospiraceae [49] (L.bacterium, ASF356, Anaerostipes, группа E. ventriosum) и группой Oscillospirales [52] (Ruminoccaceae-Ruminoccaceae-Anaerotruncus, Oscillospiraceae-Colidextribacter), образуя колодец. -сбалансированная среда, состоящая из микробиоты кишечника. Кроме того, Turicibacter [44], SCFA-продуцирующая бактерия, которая индуцирует продукцию T reg-клеток; группа Clostridia vadinBB60 [54]; и Bilophila [55], относящаяся к типу Desulfobacteria, присутствовали в кишечнике группы АЛК.

На рис. 2В показаны зависящие от времени изменения средней массы тела мышей AC, AL, ALA и WC в возрасте от 12 до 53 или от 12 до 64 недель. Масса тела мышей AC и WC, получавших только коммерческие корма, увеличивалась с увеличением количества недель выращивания. Масса тела мышей AC быстро снижалась в 53 недели, когда уменьшалось разнообразие кишечной микрофлоры (рис. 2А), тогда как масса тела мышей WC постепенно увеличивалась до 64 недель, после чего она снижалась вместе со снижением разнообразия кишечной микрофлоры. кишечная микрофлора.

Напротив, масса тела мышей AL, получавших лимоноид, и мышей ALA, получавших лимоноид + L-аргинин, увеличивалась с увеличением количества недель выращивания, но этот процесс был очень медленным по сравнению с мышами AC и WC. Мыши AL также начали терять вес на 64-й неделе (рис. 2А), когда разнообразие кишечной микробиоты уменьшилось; Мыши ALA с самым богатым разнообразием кишечной микробиоты на 64-й неделе также имели самую высокую массу тела. На рисунке 2C представлен средний вес мышей в возрасте 12–53 недель (AC) или 12–64 недель (AL, ALA, WC), который составил 33.7 г ± 2,87 (среднее значение ± стандартное отклонение), при этом группа AC является самой тяжелой, за ней следуют группы WC с весом 32,6 г ± 3,73, AL с весом 29,4 г ± 2,19 (p < 0,001) и группы ALA с весом 28,7 г ± 4,93 (p < 0,001). Таким образом, средняя масса тела мышей AC была на 20% выше, чем у мышей ALA. Среди мышей AC, AL, ALA и WC среднее потребление пищи у мышей AC всегда было выше в течение 12–53 недель выращивания (рис. 2D), а среднее потребление пищи в течение всего периода выращивания было значительно выше ( 4.67 г ± 0,331 г/день мыши -1 ) (рис. 2Е, р <0,001). Среднее потребление пищи мышами AL, ALA и WC существенно не отличалось в течение 12–64 недель выращивания (рис. 2D), а среднее потребление пищи в течение всего периода выращивания составляло 3,22 ± 0,305 г/мышь в день — 1 , 3,16 ± 0,312 г/мышь день -1 и 3,36 ± 0,170 г/мышь день -1 соответственно. Среднее потребление в группе AC было на 32,3% выше, чем в группе ALA, у которой было самое низкое среднее потребление пищи, что указывает на необычный аппетит.

Эти результаты позволяют предположить, что причиной увеличения массы тела мышей WC по сравнению с мышами AL и ALA вряд ли является количество пищи, которую они получали, и подавление прибавки массы тела у мышей AL и ALA по сравнению с мышами AL и ALA. что у мышей AC и WC было связано с диетическим потреблением лимоноидов и L-аргинина.

На рис. 3A, B представлен внешний вид мышей AC (53 недели), ALA, AL и WC (64 недели) и срезов ткани тонкого кишечника, окрашенных H&E, соответственно.На фигуре 3А показано, что у мышей AC (53 недели) наблюдалась очевидная алопеция и побеление волос на теле из-за расчесов и ран, вызванных интенсивным зудом и взаимной агрессией. У мышей AL (64 недели) наблюдалась легкая алопеция волос на теле из-за расчесов, вызванных зудом. Напротив, мыши ALA (64 недели) и WC (64 недели) не проявляли агрессии в течение всего периода выращивания по отношению к другим мышам и были спокойны. У мышей WC наблюдали обесцвечивание кончиков волос на теле.

Окрашивание

H&E срезов ткани тонкой кишки показало гистопатологически значимое тяжелое повреждение слизистой оболочки тонкой кишки у мышей AC (53 недели), нарушающее структуру эпителиальных клеток и вызывающее массивную инфильтрацию лимфоцитов в слизистую оболочку и подслизистую оболочку.У мышей AL поверхность слизистой оболочки тонкой кишки была заметно повреждена по сравнению с мышами ALA и WC, и повреждение частично распространилось на глубокую слизистую оболочку (рис. 3B, стрелки на AC и AL). Однако у мышей ALA и WC также наблюдалось отделение эпителия от мышечной пластинки слизистой оболочки, неравномерное ветвление железистых структур и удлинение крипты (рис. 3B, ALA, стрелки WC), что свидетельствует о наличии воспаления в тонкой кишке в 64 часа. недель (основные изображения патологии в Японском обществе патологии (как указано в https://Pathology.or.jp/ по состоянию на 15 августа 2021 г.)).

3.2. Наблюдение за бактериальной транслокацией у мышей AD Model

Приблизительно 1000 видов и 100 триллионов бактерий присутствуют в желудочно-кишечном тракте человека [56]. Поэтому мы предположили, как исчезла бактериальная флора, существовавшая в кишечнике АК. С этой целью мы исследовали транслокацию кишечной микробиоты в головной мозг, поджелудочную железу, почки, спинной мозг, печень, толстую кишку, тонкую кишку, селезенку, сердце, лейкоциты и ткани желудка 53-недельного AC, 64- недельных мышей ALA, AL и WC.Мы измерили присутствие бактерий, полученных из кишечных бактерий, в головном мозге, поджелудочной железе, почках, спинном мозге, печени, толстой кишке, тонкой кишке, селезенке, сердце, лейкоцитах и ​​тканях желудка мышей ALA, AL и WC. Выживших мышей вскрывали под анестезией, а все органы немедленно замораживали в жидком азоте при температуре -80°С. На рисунке 4 показаны результаты корреляционного анализа (тепловая карта) между количеством бактерий, присутствующих в каждой ткани мышей с моделью БА, с помощью секвенирования следующего поколения с использованием 16s рРНК.

Большое количество бактерий было обнаружено во всех органах мышей AC, включая головной мозг, поджелудочную железу, почки, спинной мозг, печень, толстую кишку, тонкую кишку, селезенку, сердце, лейкоциты и желудок. Инвазия бактерий в поджелудочную железу была наиболее тяжелой, что указывает на присутствие большинства видов бактерий в этом органе. Хотя количество тканевых бактерий в ALA и AL было незначительным, наличие бактерий было подтверждено. В частности, во всех тканях были обнаружены Firmicutes-Erysipelotrichaceae-Turicibacter, Firmicutes-Lactobacillaceae-Lactobachillus и Bacteroidota-Muribaculaceae.Обилие бактерий в каждом органе было выше у мышей AC, но разнообразие бактерий в каждой ткани также было выше в большинстве тканей AC (рис. 4B). Установлено, что бактериальное разнообразие в тканях ОК значительно ниже, чем в тканях ОК головного мозга, поджелудочной железы, почек, спинного мозга, сердца, лейкоцитов и желудка (** p ≤ 0,01 или *** p ≤ 0,001 для ОК). ). Бактериальное разнообразие также значительно различалось (** p ≤ 0,01) между мышами ALA и WC.

Сообщества микробиоты в тканях мышей AC были разнообразны по сравнению с таковыми у других мышей (AL, ALA и WC).Затем мы провели анализ LEfSe, чтобы сравнить предполагаемую микробиоту в тканях мышей AC. Гистограмма оценок LDA была рассчитана для признаков, которые показали различную распространенность между мышами AC и другими мышами (рис. 4C). Показатели LDA указывали на относительное содержание Bacteroidales-Mulribaculum и Erysipelotrichaceae в головном мозге и Proteobacteria-Gammaproteobacteria-Enterobacterales Pantoea, некультивируемых Bacteroidales Muribaculaceae и Firmicutes-Bacilli-Faecalibaculum в почках (показатель LDA (log10) > 3, p < 0.05). Также были идентифицированы Enterobacterales в печени, Pantoea в селезенке и Muribaculaceae-Muribaculaceae. В спинном мозге присутствовали виды с той же тенденцией, что и в головном мозге. В желудке в качестве биомаркеров анализировали Firmicutes-Lactobacillus, Firmicutes-Clostridium sensu stricto 1, Firmicutes Erysipelotrichaceae и Turicibacter, а в белых клетках — Firmicutes-Clostridium sensu stricto 1, Firmicutes Erysipelotrichaceae и Turicibacter. В лейкоцитах наблюдали группу Firmicutes-Clostridia-Lachnospiraceae-NK4A136 и в поджелудочной железе Bilophila, относящуюся к Desulfobacterota и продуцирующую сероводород, который способствует воспалению в кишечнике.Bacteroides massiliensis и Firmicutes-Clostridia-Lachnospiraceae, которые продуцируют сероводород и способствуют воспалению в кишечнике, были проанализированы как характерные бактерии и показали тенденции, отличные от тенденций в других тканях.

На рис. 4D показана общая бактериальная экспрессия в поджелудочной железе, где бактериальная транслокация (БТ) [57] была наиболее распространенной. В ткани поджелудочной железы мышей AC экспрессия бактерий в 275 раз выше, чем у мышей AL, в 31 раз выше, чем у мышей ALA, и в 9 раз выше.Наблюдалось 4-кратное увеличение по сравнению с таковым у мышей WC. Коэффициент подавления бактериальной экспрессии был достигнут до 99,6% ± 0,09 и 96,5% ± 2,9 в группах АЛ и АЛК соответственно. Бактериальная экспрессия была более незначительной у мышей AL и ALA, чем в поджелудочной железе мышей WC (90,0% ± 5,75). Сообщалось, что у 60% пациентов с острым панкреатитом нарушается кишечный барьер [58,59]. Анализ кишечной микробиоты пациентов с тяжелым острым панкреатитом показал высокую распространенность энтеробактерий и энтерококков и низкую распространенность бифидобактерий [60].Бактериальный состав у людей с острым панкреатитом был таким же, как у мышей AL, но значительно отличался от такового в группе WC. Напротив, у мышей AC наблюдалась значительная экссудация Enterobacterales Pantoea не только в поджелудочной железе, но также в больших количествах в почках и печени (рис. 4А, С).

3.3. Гистопатологический анализ поджелудочной железы, печени и ткани головного мозга

. Результаты окрашивания H&E поджелудочной железы показали разрушение эпителиальных клеток протока поджелудочной железы и инфильтрацию конденсированных белков и эозинофилов в протоке поджелудочной железы мышей AC (рис. 5А), и наблюдался рост опухоли. в окрестностях.Опухоли также были выражены в тканях, окружающих увеличенные островки Лангерганса, что свидетельствовало о тяжелом и разрушительном воспалении тканей поджелудочной железы.

У мышей AL наблюдались эозинофильная инфильтрация и гипертрофия панкреатических островков Лангерганса и липидификация клеток (см. обзор основных изображений патологии в Японском обществе патологии, https://Pathology.or.jp/, доступ 15 август 2021 г.). Островки Лангерганса и ацинарные клетки поджелудочной железы у мышей ALA и WC были сходны по форме.

На рис. 5В показаны срезы печени мышей AC с выраженной инфильтрацией портальных мононуклеарных клеток воспалительными клетками, отечной фиброзной тканью, гиалинизацией печеночных артериол и застоем воротной вены, на котором видны сильно пораженные гепатоциты с пикнотическими ядрами и фиброзом в портальной площадь. Печень мышей ALA была представлена ​​нормальными гепатоцитами и везикулярными ядрами, расположенными в виде ветвящихся тяжей вокруг центральной вены с нормальной портальной зоной, центральной веной и нормальными протоками.Печень мышей AL показала повышенную инфильтрацию эозинофилами и инфильтрацию воспалительными клетками со стеатозом в некоторых печеночных клетках. В печени мышей WC отмечалась эозинофильная инфильтрация.

На рис. 6A показаны результаты гистопатологического анализа образцов гиппокампа мышей с болезнью Альцгеймера, проведенного Токийским столичным институтом медицинских наук (https://igakuken.or.jp/, по состоянию на 20 августа 2021 г.).

У мышей AC наблюдались возрастные изменения нейронов гиппокампа, а также наличие гранулоцитоза, телец Хирано, нейрофибриллярных изменений при болезни Альцгеймера, ишемических изменений и сенильных бляшек, которые часто встречаются при болезни Альцгеймера.Кроме того, наблюдалась реактивная микроглия палочковидной формы с булавовидными ядрами, демонстрирующая типичные воспалительные и аутоиммунные поражения. Также наблюдалась глия Альцгеймера 2 типа со значительно увеличенными ядрами астроцитов, что позволяет предположить возможность печеночной энцефалопатии из-за тяжелого повреждения печени. В ALA такие характерные гистопатологические дегенерации уменьшались, а также минимизировалась дегенерация зернистого слоя, что подтверждает разницу между этими образцами и образцами гиппокампа мышей WC, демонстрирующих физиологическое старение.Однако у мышей AL наблюдалась повышенная гранулоцитопеническая дегенерация и сенильные бляшки по сравнению с ALA и WC, что указывает на усиление характеристик нейродегенеративных заболеваний. Астроциты в гиппокампе мышей AL были активированы, и была очевидна обширная агрегация микроглии с амилоидными бляшками в центре. У мышей ALA в некоторых областях можно было наблюдать образование сенильных бляшек, но экспрессия астроцитов и микроглии не была усилена и выглядела так же, как у мышей WC.

Эти результаты (рис. 5 и рис. 6) подтвердили, что поджелудочная железа, печень и мозг мышей AC с дисбиозом кишечной микробиоты находились в тяжелом состоянии разрушения тканей и нейронов гиппокампа, а ткани и нейроны гиппокампа группы AL были также поврежден.Гомеостаз кишечной микробиоты, ткани поджелудочной железы и печени и нейронов гиппокампа сохранялся в большей степени у мышей ALA, чем у мышей WC.

3.4. Метаболомный анализ печени и фекалий мышей

Метаболомный анализ проводили на печени мышей AC, ALA, AL и фекалиях мышей AC, ALA, AL и WC. Путь метаболизма кинуренина показан на рисунке 7А; циклы метионина и мочевины и пути метаболитов, связанные с метаболизмом полиаминов, показаны на рисунке 7B; и обзор пути метаболизма желчных кислот показан на рисунке 7C.Другие метаболиты, которые, как считается, участвуют в БА, показаны на рис. 7D, E, а тепловая карта, показывающая иерархический кластерный анализ результатов метаболизма печени и кала мышей с БА, показана на рис. 7F, G.

В кинурениновом пути (рис. 7А) все основные метаболиты, метаболизирующиеся из триптофана, сильно активировались у мышей AC. У пациентов с атопическим дерматитом и пациентов с легкими когнитивными нарушениями соотношение кинуренин/триптофан, которое, как сообщается, примерно в два раза выше, чем у здоровых людей [61, 62], составляло приблизительно 22% для AC3.6% для ALA и 5,2% для AL. В наших исследованиях было достигнуто подавление соотношения кинуренин/триптофан до 99,8% и 99,7% у мышей ALA и AL соответственно. Кроме того, 3-гидроксикинуренин, который указан как токсичный метаболит, который может проявлять нейротоксичность и вызывать окислительное повреждение и гибель клеток в нейронах головного мозга [63], и антраниловая кислота, для которой сообщалось о повышенных уровнях в плазме и риске, связанном с деменцией. [64], были идентифицированы только у мышей линии AC.

Гомоцистеин, промежуточный метаболит метионинового цикла, транс-сульфированием превращается в цистатионин и цистеин, одну из составляющих аминокислот глутатиона (рис. 7В), которая необходима для детоксикации и антиоксидантной защиты живых организмов [65]. .

ALA активировала как цистатионин, так и цистеин, продуцируемые путем транс-сульфурации, и продукция GSH показала, что ALA> AL> AC, при этом мыши ALA продуцировали примерно в два раза больше GSH, чем мыши AC. Глутатион представляет собой внутриклеточный трипептид с SH-группой двух типов: восстановленный GSH и окисленный глутатион-S-S-глутатион (GSSG). Восстановленный GSH превращается в окисленный GSSG для детоксикации пероксида водорода (H 2 O 2 ), образующегося in vivo, а GSSG регенерируется в GSH с помощью глутатионредуктазы.В здоровых клетках и тканях восстановленный GSH составляет большую часть GSH; следовательно, изменения соотношения GSH/GSSG могут предсказывать степень ингибирования внутриклеточного окислительного стресса [66]. Сравнивали процентные значения GSH/GSSH, и соотношение продукции GSH составляло приблизительно 69% в ALA, 68% в AL и 43% в AC.

Таким образом, внутриклеточный окислительный стресс был более подавлен у мышей ALA и AL, чем у мышей AC. Кроме того, ALA увеличивала метаболизм S-аденозилметионина (SAM) [66], важного метаболита, который регулирует основные метаболические пути, включая метилирование и синтез полиаминов, а также аргинина, путресцина и 5′-метилтиоаденозина (MTA) в аргиназном ферменте. – путь синтеза полиаминов в метиониновом цикле.Мыши AL показали присутствие большего количества метаболитов орнитина, спермидина и спермина в пути синтеза аргиназы-полиамина, чем мыши AC и ALA. У мышей AC, напротив, путь синтазы оксида азота, который продуцирует оксид азота (NO) из аргинина, а также спермидин/спермин-N 1 -ацетилтрансфераза и сперминоксидаза каскада обратного превращения полиаминов продемонстрировали увеличение цитруллина. продукции и ацетилспермидина в каждом пути.

Желчные кислоты, продуцируемые многими млекопитающими, включая человека, представляют собой холевую кислоту (3α,7α,12α-тригидрокси-5β1холановая кислота) и кенодезоксихолевую кислоту (3α,7α-дигидрокси-5β-холановая кислота).Желчные кислоты, образующиеся в печени, далее конъюгируют с таурином или глицином и секретируют в желчь. Первичные желчные кислоты, метаболизирующиеся из холестерина в печени мышей, в основном накапливаются в желчном пузыре в виде таурин-конъюгированных желчных кислот и секретируются в двенадцатиперстную кишку через желчные протоки в ответ на прием пищи [67]. На фигуре 7C показано, что в печени мышей AC, ALA и AL были идентифицированы холевая кислота, таурохолевая кислота (холевая кислота, конъюгированная с таурином) и гликохолевая кислота (холевая кислота, конъюгированная с глицином).

Количество метаболизируемых первичных желчных кислот было значительно выше у мышей AC, при этом продукция холановой кислоты примерно на 626% выше, чем у мышей ALA, и на 2238% выше, чем у мышей AL, а продукция таурохолевой кислоты на 350% выше, чем у мышей ALA. и на 280% выше, чем у мышей AL. Гликохолевая кислота обнаружена только у мышей линии AC. Первичные желчные кислоты, первоначально продуцируемые в печени, подвергаются различным преобразованиям кишечными бактериями во время энтерогепатической циркуляции с образованием вторичных желчных кислот [68].Вторичные желчные кислоты, полученные из фекалий мышей AC (53 недели) и мышей ALA, AL и WC (64 недели) в этом исследовании, метаболизировались из урсодезоксихолевой кислоты, литохолевой кислоты и холевой кислоты через хенодезоксихолевую кислоту, дезоксихолевая кислота метаболизировалась через хенодезоксихолевую кислоту. кислоты, а также гиодезоксихолевая кислота и урсодезоксихолевая кислота, индуцированные метаболическим путем хенодезоксихолевая кислота → мурихолевая кислота. Продукция тауроурсодезоксихолевой кислоты и тауродезоксихолевой кислоты, конъюгированной с таурином, была подтверждена из дезоксихолевой кислоты.При измерении вторичных желчных кислот было показано, что продукция всех вторичных желчных кислот в фекалиях мышей AC была незначительно снижена. У мышей AL продукция всех вторичных желчных кислот была самой высокой, за исключением тауроурсодезоксихолевой кислоты, за которой следовала продукция мышей ALA; у мышей WT наиболее часто продуцировалась тауродезоксихолевая кислота.

На рисунке 7D метаболиты тирамина, преобразованные из тирозина под действием тирозин-декарбоксилазы (TDC), были обнаружены только у мышей AC. Холин и карнитин метаболизируются кишечной микрофлорой с образованием триметиламина (ТМА), который далее метаболизируется флавинмонооксигеназами (ФМО) в триметиламин-N-оксид (ТМАО), вещество, способствующее атерогенезу [69,70].Производство триэтиламин-N-оксида было снижено на 35% у мышей ALA по сравнению с мышами AC и на 90% у мышей AL. Соотношение триэтиламин-N-оксид/триэтиламин является одним из индикаторов, ускоряющих развитие атеросклероза [70]. Это соотношение было снижено на 26% у мышей ALA и до 51% у мышей AL по сравнению с мышами AC.

Рисунок 7E иллюстрирует выработку липополисахарида (ЛПС) [71], которая является одним из патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (ПАМП) [72,73] на внешней стороне клеточной стенки грамотрицательных бактерий.Относительная продукция LPS в фекалиях мышей AC, AL и WC была одинаковой; однако фекалии мышей ALA имели на 54% более низкий коэффициент продукции по сравнению с фекалиями мышей AC (фиг. 7E).

Кроме того, HeatMap (рис. 7F, G), основанная на иерархической кластеризации файлов метаболитов печени и фекалий мышей с AD, показала, что файлы метаболизма (рис. 7F) сильно различались у мышей AC, ALA и AL и что метаболизм мышей ALA и AL частично отличался, что позволяет предположить, что на это могли повлиять различия в рационе L-аргинина.Сравнение метаболитов в фекалиях (рис. 7G) показывает, что метаболиты мышей AC чрезвычайно необъективны; Мыши ALA и AL были богаты многими метаболитами и имели разную скорость метаболизма, а мыши WC имели больше метаболитов, чем мыши AC, но были смещены по сравнению с мышами ALA и AL.

3.5. Продукция провоспалительных цитокинов и хемокинов в сыворотке мышей модели AD и мышей дикого типа

Мы измерили цитокины и хемокины в сыворотке мышей AC в возрасте 30 недель, когда микробиота их кишечника была наиболее разнообразной, и в возрасте 53 недель (рис. 2А), когда они были в дисбактериозе (рис. 8), чтобы сравнить влияние их диеты на микробиоту кишечника.Результаты 30- и 53-недельных мышей AC и 64-недельных мышей ALA, AL и WC показаны на рисунке 8A, B соответственно.

Как показано на рисунке 8A, в возрасте 30 недель IL-7, IL15, фактор, ингибирующий лейкемию (LIF) и TNF-α, экспрессируются только у мышей AC. Повышенная экспрессия IL-7 связана с обострением воспаления в центральной нервной системе и периферических иммунных клетках [74]. IL-7 также является цитокином, который указывает на острую фазу воспаления печени, вызванного инфекцией [75].IL-15 представляет собой цитокин, связанный с иммунной системой слизистых оболочек, и его экспрессия индуцируется в дендритных клетках (ДК) при стимуляции LPS или IFN-γ и повышается в эпителиальных клетках при инфицировании [76,77]. Экспрессия IL-15 у стареющих мышей и лимфатических эндотелиальных клеток крови и периферических лимфоидных органов значительно увеличивается при воспалении, вызванном ЛПС [78]. Кроме того, сообщалось о развитии тяжелого воспаления кишечника у мышей с язвенным колитом и высокой экспрессией в мезентериальных лимфатических узлах и внутреннем слое слизистой оболочки тонкой кишки [79].LIF является членом семейства цитокинов IL-6, которые влияют на рост клеток путем ингибирования клеточной дифференцировки. Ранее сообщалось о его влиянии на дифференцировку клеток, костный метаболизм, кахексию, нейрогенез, эмбриональное развитие и воспаление [80,81].

Продукция IL-9, эотаксина, LIX(ENA-78/CXCL5), IL-17, RANTES (CCL5), KC и IL-6 также была значительно выше у мышей AC, чем у мышей ALA, AL и WC. . В частности, экспрессия IL-9 была примерно в 21 раз выше у мышей AC, чем у мышей ALA.IL-9 продуцируется активированными клетками Th3, тучными клетками и эозинофилами и усиливает воспалительные реакции [82]. При воспалении, характеризующемся массивной инфильтрацией эозинофилов, ИЛ-4 и ИЛ-5 индуцируют высокие уровни макрофагального воспалительного белка-1α, а также KC и RANTES; однако IL-13 является наиболее мощным индуктором эотаксина (CCL11) [83].

Эотаксин играет ключевую роль в воспалительном ответе, мобилизуя иммунные клетки, такие как эозинофилы, базофилы и Th3-лимфоциты, а воспалительное состояние часто включает обильную эозинофильную инфильтрацию в поджелудочной железе [84].Эозинофилы представляют собой многогранные, многофункциональные лейкоциты, участвующие в инициации и распространении многочисленных воспалительных реакций, в том числе после паразитарных, бактериальных и вирусных инфекций, повреждения тканей, опухолевого иммунитета и аллергических заболеваний [85]. Многие факторы влияют на регуляцию эозинофилов, что вызывает увеличение количества эозинофилов [86]. Сообщается, что хемокины KC являются регуляторами, которые стимулируют провоспалительные и профибротические гены в печени и вызывают сильное воспаление печени [87].Следовательно, поведение этих цитокинов и хемокинов предполагает, что воспаление в печени и поджелудочной железе индуцируется у мышей AC и AL. Таким образом, эти цитокины экспрессировались в основном у мышей линии AC в возрасте 30 недель, и предполагалось, что они связаны с обострением воспаления в центральной нервной системе, периферических иммунных клетках [74] и собственной пластинке кишечника [76,77,78]. ] и острая фаза при инфекционно-индуцированном воспалении печени [75].

Кроме того, RANTES, также известный как CCL5, представляет собой класс цитокинов, который способствует миграции лейкоцитов и играет важную роль в различных фазах воспаления [88].Помимо миграции клеток, он активирует Т-клетки, моноциты, астроциты и нейтрофилы [89].

Более того, он экспрессируется в нейронах на краю церебрального инфаркта при БА и участвует в ангиогенезе и репарации тканей [90]. Концентрация хемокина G-CSF снижалась в следующем порядке: ALA > WC > AL > AC. В группе AC экспрессия LIF [80,81] и G-CSF [91], которые участвуют в выживании, восстановлении и регенерации нервов, также индуцировалась до 30-недельного возраста (рис. 2 и рис. 8).Было показано, что введение G-CSF в моделях инсульта и болезни Альцгеймера на мышах может индуцировать нейрогенез вблизи места повреждения, что приводит к неврологическому и функциональному восстановлению [91,92,93]. Заметное увеличение продукции LIF и G-CSF у мышей AC в возрасте 30 недель свидетельствует о том, что может существовать конкурентная связь между самообновлением и прогрессированием заболевания.

IL-5, IL-6, IL-17, IL-13 и MIP-1β увеличились у мышей AC с 30 до 64 недель. Примечательно, что у 53-недельных мышей AC была подтверждена высокая экспрессия IL-17.Таким образом, экспрессия цитокинов и хемокинов у 53-недельных мышей AC или 64-недельных ALA, AL и WC (рис. 8B) полностью отличалась от таковой на рис. 8A.

На рисунке 8 цитокины и хемокины, отличные от G-CSF, IL-10 и IL-13, экспрессированные у мышей AC, были подавлены у мышей ALA или AL, и этот эффект сохранялся до 64 недель выращивания.

На Фигуре 8B, за исключением IL-17 и хемокина KC, уровни продукции цитокинов и хемокинов у мышей WC в возрасте 64 недель были значительно повышены по сравнению с таковыми у мышей AC, ALA и AL или у мышей 30 недель. — недельных мышей WC.Ожидается, что изменения в экспрессии цитокинов и хемокинов, наблюдаемые у мышей WC, связаны с эффектами индивидуального старения.

В настоящем исследовании продукция этих провоспалительных цитокинов и хемокинов была значительно выше у 30-недельных мышей AC, что свидетельствует о сильном развитии нейродегенерации и системного воспаления в головном мозге, поджелудочной железе, печени и эпителиальной слизистой оболочке кишечника, в Мыши переменного тока. Однако когда мышей с AD лечили L-аргинином и лимоноидами, продукция этих воспалительных цитокинов и хемокинов подавлялась.

4. Обсуждение

. Ранее мы сообщали [23], что одной из основных стратегий поддержания здоровья хозяина является наличие системы защиты бактериальной флоры от энтеротоксемии, повышающей проницаемость эпителиальных клеток тонкой кишки.

В нашем исследовании 53-недельной модели мышей с болезнью Альцгеймера (AC) мы наблюдали, что IL-17 экспрессировался в эпителиальных клетках кишечника примерно в семь раз выше, чем в 30 недель, а кишечная микробиота AC имела преобладание большое количество Staphylococcus spp.[43], группа Eubacterium ventriosum и группа E. coprostanoligenes [44] (рис. 2), а также индуцированная дисфункция кишечного барьера (рис. 3B), что указывает на полный дисбактериоз. ИЛ-17 представляет собой провоспалительный цитокин, который мобилизует моноциты и нейтрофилы к очагу инфекции, а активация ИЛ-17 последовательно активирует несколько нижестоящих цитокинов и хемокинов, включая ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-21, TNF-β и MCP-1 [94]. Высокая экспрессия IL-17 индуцирует продукцию антибактериальных белков ангиогенина-4 и фосфолипазы в тканях кишечника и, следовательно, специфически ингибирует рост Clostridium XIVa [95].Следовательно, у мышей AC кишечник не получил достаточного количества метаболитов, чтобы вызвать иммунный ответ, и ожидается, что ускоренное воспаление кишечника произойдет с 30-недельного возраста.

Кроме того, мы наблюдали большое количество BT [57,96,97] в поджелудочной железе, которое затем распространилось на головной мозг, почки, печень, спинной мозг, селезенку, сердце и лейкоциты у 53-недельных мышей AC. (Рисунок 4). У мышей AC экспрессия эотаксина [85, 86], RANTES [88, 89] и KC [87], которые вызывают тяжелое воспаление в поджелудочной железе и печени, также была высокой.Помимо хемокиновых рецепторов, RANTES может связываться с (гликозаминогликанами) [98], а в кровеносных сосудах RANTES высвобождается из клеток крови и агрегирует на эндотелиальных клетках и действует как «указатель» для иммунных клеток, приводя к мобилизации крови. моноциты и Т-клетки к очагам поражения. Кроме того, микроглия, представляющая собой иммунные клетки головного мозга, играющие важную роль в регуляции ГЭБ, притягивается к кровеносным сосудам в ответ на RANTES, высвобождаемый эндотелиальными клетками сосудов во время системного воспаления.После накопления они экспрессируют CD68, молекулу, участвующую в фагоцитозе, и накапливаются в астроцитах, составляющих (ГЭБ), а затем частично фагоцитируют выпячивания астроцитов, составляющие (ГЭБ) [99]. Поэтому, когда утечка вызвана нарушением этой структуры, возникают нарушения функции ГЭБ [100]. Сообщалось, что воздействие бактериального липополисахарида на клетки микроглии способствует активации цитокинов, таких как промотор IL-7 [74].Фактически, в головном мозге мышей AC была повышена экспрессия гипертрофированных астроцитов и активированной микроглии вокруг амилоидного отряда, что подтверждает характерные поражения AD (рис. 6).

Нет сомнений в том, что одна из точек входа, вовлеченных в БТ, связана с воспалением поджелудочной железы. Курашима и др. обнаружили, что гликопротеин, называемый гликопротеином 2 (GP2), который в больших количествах секретируется поджелудочной железой, захватывает поверхность кишечных бактерий (нематоцист) и подавляет их транслокацию в ткани [101].Сообщалось, что когда секреция этого панкреатического белка нарушается воспалением поджелудочной железы, с большей вероятностью происходит перенос кишечных бактерий в ткани и кровь, что приводит к тяжести воспалительного заболевания кишечника [101].

Таким образом, мы можем предсказать, что разрушение тканей органов пищеварения хозяина в результате воспаления является первой причиной BT бактерий, присутствующих в микробиоте кишечника, которая была идентифицирована в тканях по всему телу мышей с AD.

Опухоли, развившиеся в поджелудочной железе мышей с БА в этом эксперименте, и разрушение островков Лангерганса полностью объяснили наличие воспаления (рис. 5). Кроме того, метаболиты тирамина в печени были обнаружены только у мышей AC. Тира-мин является непрямым симпатомиметик; когда организм вырабатывает слишком много тирамина, он высвобождает нейромедиатор норадреналин (НЭ), хранящийся в эндоплазматическом ретикулуме. Это вызывает заметное повышение уровня аксонального норадреналина и запускает опосредованный переносчиком транспорт норадреналина из нервных окончаний [102].Было показано, что избыток НЭ активирует симпатическую иннервацию бета-клеток поджелудочной железы и ингибирует секрецию инсулина [103, 104]. В норме фермент моноаминоксидаза (МАО), присутствующий во внешней митохондриальной мембране по всему мозгу, печени и другим тканям, дезаминирует тирамин и производит перекись водорода в качестве побочного продукта [105]. Присутствие восстановленного глутатиона (GSH) в митохондриях помогает преодолеть токсичность перекисей. Поскольку GSH/GSSG (окисленный глутатион) у мышей с БА, полученный в этом исследовании, составлял всего 43%, а также сообщалось, что тирамин обладает синергетической токсичностью с амилоидом-β42 [106], токсичность тирамина вызывает окислительное повреждение клеток у мышей с БА. [107] считается сильным при AC, предполагая, что он вызывает митохондриальную дисфункцию.

Связывание тирамина со связанными с G-белком рецепторами в синаптической щели снижает активность серотонинергических и дофаминергических рецепторов [107], а дисбаланс уровней тирамина, как сообщается, связан с болезнью Паркинсона, депрессией, шизофренией, мигренью и повышенным кровяным давлением. давление [108,109,110,111]. Наши результаты позволяют предположить, что это является одной из причин прогрессирования патологии при БА. Кроме того, нарушение микробиоты кишечника у мышей AC также нарушило функцию печени.

Одним из важных метаболитов, продуцируемых кишечными бактериями, являются желчные кислоты, эндогенная молекула, синтезируемая из холестерина в печени [112]. Эти молекулы могут активировать рецепторы в кишечнике, печени и на периферии, чтобы регулировать несколько процессов хозяина, включая метаболические процессы [112]. Первичные желчные кислоты, метаболизирующиеся в печени, подвергаются конъюгации с глицином или таурином и транспортируются в печень в менее токсичной форме, где выделяются в двенадцатиперстную кишку после еды.В кишечном тракте кишечные бактерии вызывают деконъюгацию и 7-альфа-дегидроксилирование первичных желчных кислот, превращая их во вторичные желчные кислоты. В нашем исследовании мы обнаружили сильную экспрессию воспалительного цитокина IL-15 только у 30-недельных мышей AC [76,77]. Другими словами, у мышей AC высвобождение LPS из наружной мембраны грамотрицательных кишечных бактерий происходило к 30-недельному возрасту, что указывает на то, что печень была индуцирована для производства воспаления. Вполне вероятно, что в печени были продуцированы высокие уровни вторичных желчных кислот, дезоксихолевой кислоты (ДХК) и литохолевой кислоты (ЛХК).Известно, что DCA и LCA вызывают воспаление в печени, а повышенный DCA, в частности, может индуцировать клеточное старение и связанный со старением секреторный процесс в звездчатых клетках печени посредством энтерогепатической циркуляции, секреторный фенотип, связанный со старением, тем самым создавая микроокружение для гепатоцеллюлярной канцерогенез [113]. Чрезмерный метаболизм DCA вызывается ростом грамположительных бактерий, таких как Clostridium [114]. Кишечная микробиота на 30 неделе AC была пролиферирована группой Clostridium (рис. 2).Это несбалансированное бактериальное соотношение и увеличение вторичных желчных кислот в конечном итоге привели к разрушению кишечного барьера, а липополисахарид (LPS) и липотейхоевая кислота (LTA) индуцировали воспалительные сигналы через toll-подобные рецепторы в печени.

У 53-недельных мышей AC с дисбиозом кишечной микрофлоры уже наблюдался очень высокий коэффициент продукции первичных желчных кислот и низкий уровень вторичных желчных кислот в печени (рис. 7). Это говорит о том, что желчные кислоты циркулируют между поврежденным кишечником и фиброзной печенью до тех пор, пока они не перестанут метаболизироваться (рис. 3 и рис. 7С).

Патологическое прогрессирование БА также нарушало функцию печени. В печени мышей AC в дальнейшем было обнаружено высокое соотношение триэтиламин-N-оксид/триэтиламин, которое является одним из ускоряющих показателей атеросклероза [70].

Триметиламин, метаболит холина, метаболизируемый кишечными бактериями, гепатотоксичен и участвует в развитии неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП)/неалкогольного стеатогепатита (НАСГ). Холин способствует транспорту капель жира в паренхиматозных клетках печени и предотвращает чрезмерное образование капель жира в печени.Метаболит холина триметиламин превращается в печени в ТМАО и вызывает воспаление [115], а повышенная продукция триметиламина приводит к дефициту холина и способствует формированию жировой дистрофии печени [116]. Существует также путь от карнитина для метаболизма до триметиламина кишечными бактериями. Как и холин, он метаболизируется до ТМАО в печени и, как сообщается, способствует развитию атеросклероза [70, 117].

Патологическое прогрессирование БА также нарушило функцию печени.В кинурениновом пути был выявлен заметно аномальный метаболизм триптофана. Известно, что кинуренин/триптофан коррелирует с активностью индоламин-(2,3)-диоксигеназы (IDO) [118]. IDO вызывает иммуносупрессию за счет деградации триптофана в микроокружении опухоли и дренирующих опухоль лимфатических узлах. Истощение триптофана и его токсических катаболитов приводит к инактивации эффекторных Т-клеток и иммуносупрессии дендритных клеток. Ингибирование IDO является одной из целей открытия лекарств и может замедлять рост опухоли, усиливать вакцинацию дендритных клеток и синергизировать с химиотерапией через иммунно-опосредованные механизмы.ALA, получавшая L-аргинин + лимоноиды, и AL, получавшая только лимоноиды, подавляла 99,7–99,8% повышенной активности IDO у мышей AC, а также все другие токсичные метаболиты кинуренинового пути [61,118].

Кроме того, заметное увеличение аномального метаболизма АЦ также наблюдалось в метаболических путях, связанных с циклом метионина, циклом мочевины и метаболизмом полиаминов, в то время как были заметные и впечатляющие эффекты у мышей ALA, которых кормили диетой L-аргинин + лимоноиды.Нарушение регуляции S-аденозилметионина (SAM) связано с развитием сердечно-сосудистых заболеваний [119], рака [120], заболеваний печени [121] и психических расстройств, таких как депрессия и деменция [122].

При БА увеличивается количество окисленных частиц в тканях мозга из-за нарушения активности глутатион-S-трансферазы, что приводит к снижению уровня SAM и повышению уровня продукта его гидролиза S-аденозилгомоцистеина (SAHC), который ингибирует утилизацию SAM [123].SAM может синтезироваться в цитоплазме всех клеток, особенно гепатоцитов, и служит связующим звеном в четырех основных метаболических путях: трансметилировании, транссульфурации и синтезе полиаминов, а также влияет на регуляцию аутофагии [124,125].

Биосинтез

цистеина из SAM при транссульфурации в основном активен в печени [126]. Цистеин превращается в различные серосодержащие молекулы, такие как глутатион (GSH), таурин, сульфат (SO 4 2 ) и сероводород (H 2 S).GSH защищает многие ткани от окислительного повреждения, а истощение GSH может вызвать аутофагию. Таким образом, окислительно-восстановительный гомеостаз GSH может играть центральную роль в поддержании белкового гомеостаза, достигаемого за счет регуляции аутофагии, и его поддержание очень важно для ингибирования патогенеза AD [127].

В пути синтеза полиаминов фермент аденозилметиониндекарбоксилаза превращает декарбоксилированный SAM (dcSAM) из путресцина (Put), который метаболизируется из L-аргинина, агматина и орнитина, в спермидин (Spd) и спермин (Spm) [128].dcSAM метаболизируется до нейропротекторного фактора MTA, который регенерирует метионин [129]. У мышей, получавших пищевые добавки с L-аргинином и лимоноидами, уровни SAM были повышены, а также увеличилось производство MTA, уравновешивая и контролируя путь образования цитруллина + NO из L-аргинина (рис. 8B). Spd и Spm являются важными полиаминами, участвующими в различных клеточных процессах, включая транскрипцию и трансляцию генов, стабилизацию ДНК и РНК, передачу сигналов, рост и пролиферацию клеток [130,131].Они ингибируют активность гистоновых ацетилтрансфераз и приводят к активации нескольких генов, связанных с аутофагией (ATG) [132].

Также были продемонстрированы терапевтические эффекты SAM при остром повреждении печени, фиброзе печени и раке поджелудочной железы [133]. Гепатопротекторное действие SAM связано с ингибированием транслокации ядерного фактора каппа B (NF-kB) и активацией ядерного фактора, связанного с эритроидом 2 (Nrf2), тем самым подавляя окислительный стресс и воспалительные реакции в гепатоцитах и ​​клетках поджелудочной железы.Считается, что это связано с ингибированием окислительного стресса и воспалительных реакций в гепатоцитах и ​​клетках поджелудочной железы путем ингибирования ядерной транслокации NF-κB и активации ядерного фактора, связанного с эритроидом 2 (Nrf2).

Избыточные пулы Spm и Spd наблюдались в метаболическом пути полиаминов в группе AL; пулы Spm и Spd были усилены сперминоксидазой (SMOX) в каскаде обратной трансформации полиаминов. Сообщалось, что хроническая избыточная продукция Spm и Spd может вызвать повреждение печени и активацию микроглии [134], поскольку реакция обратной трансформации из Spm в Spd увеличивает уровень свободного акролеина, обладающего сильной цитотоксичностью, в качестве побочного продукта через SMOX-зависимый механизм [134].Тем не менее, диетическое добавление лимоноидов мышам с БА было более полезным с точки зрения подавления патологии БА. Однако комбинированный прием L-аргинина и лимоноидов не приводил к избыточному накоплению полиаминов, но причина этого до сих пор не ясна.

В нашем исследовании мы предлагаем возможность ингибирования патологического прогрессирования БА в многоорганной связи, сосредоточенной на кишечнике, поджелудочной железе, печени и головном мозге. Наши результаты свидетельствуют о том, что подавление воспаления кишечника, поджелудочной железы, печени и головного мозга у мышей с БА было достигнуто за счет добавления в рацион мышей L-аргинина и лимоноидов.Нам еще не удалось продемонстрировать четкое взаимодействие между кишечной микробиотой, кишечником, поджелудочной железой, печенью и мозгом. Однако связь между этими органами, безусловно, существует. Имаи и др. [135] идентифицировали нейронную сеть печень-афференты висцерального нерва-центральная нервная система-блуждающая центрифуга-β-клетки поджелудочной железы и сообщили, что сигнал для инициации увеличения количества β-клеток поджелудочной железы передавался из печени в центральную нервную систему через эту сеть. сети при обнаружении ожирения. Кроме того, Тератани и соавт.[136] сообщили, что печень функционирует как информационный центр, который точно накапливает и интегрирует среднюю информацию в 8-метровом кишечном тракте человека и передает ее в мозг без сбоев, и что существует механизм, который передает обратную связь от мозга к кишечник с соответствующими командами для предотвращения чрезмерной активации кишечного иммунитета. Кроме того, сообщалось, что существует механизм, который передает обратную связь от мозга к кишечнику с соответствующими инструкциями для ситуации с кишечником, чтобы предотвратить чрезмерную активацию кишечного иммунитета.

В настоящем исследовании добавление L-аргинина и лимоноида мышам с болезнью Альцгеймера восстанавливало внутриклеточный гомеостаз уровня GSH, уменьшало окислительный стресс, оказывало противовоспалительное действие за счет подавления секреции провоспалительных цитокинов, уравновешивало кишечную микрофлору и способствовало взаимодействию между поджелудочной железой и печени для производства метаболитов, которые способствуют гомеостазу хозяина.

Ремонт

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.