Поскольку серьезных пороков развития головного мозга не наблюдалось, мы провели интенсивный гистологический поиск возможных аномалий в нервных путях мышей Sulf1/2 DKO. Следовательно, мы обнаружили, что ножка головного мозга была аберрантной, а пирамидный тракт был уменьшен в размере в срезах мозга, окрашенных нейрофиламентом М (дополнительный рисунок S1n-o), что указывает на то, что Мыши Sulf1/2 DKO имели дефекты CST. CST берет начало в слое 5 сенсомоторной коры, спускается через внутреннюю капсулу, ножку мозга и вентральную часть продолговатого мозга и проецируется в спинной мозг постнатально ^14,15 . Чтобы выборочно изучить траекторию аксонов CST, мы выполнили отслеживание DiI. Когда DiI вводили в моторную кору живых новорожденных мышей, аксоны CST были помечены до пирамидального перекреста в течение 10 часов (рис. 1a, c–e).

CST Дефекты направления аксонов у мышей Sulf1/2 DKO. ( a , b ) Траектория CST. Прямоугольники показывают области изображений в ( c — l ). ( c – h ) Флуоресцентные изображения мозга P0, которому вводили DiI в моторную кору. Боковой ( c , f ) и вентральный ( d , e , g , h ) виды контроля ( Sulf1 ^-/- ; Сульф2 ^+/- ; c – e ) и Sulf1/2 DKO мозги ( f – h ). У мышей Sulf1/2 DKO были обнаружены аномальные дефасцикулированные аксоны (закрытые стрелки на f , прямоугольник на b ). Пунктирные линии указывают среднюю линию. Средняя интенсивность сигналов флуоресценции в области среднего мозга у мышей ДКО была значительно выше, чем у контрольных мышей (18,388 усл. ед. в контроле и 29 усл. ед.).0,096 в ДКО; n = 4, P  = 0,018637 по t-критерию Уэлча). ( i – l ) Окрашивание нейрофиламента головного мозга цельным препаратом E18.5. Виды сбоку ( i , k ) и снизу ( j , l ) контрольного элемента ( Sulf1 ) ^-/- ; i – j ) и мозги Sulf1/2 DKO ( k , l ). Кора головного мозга была удалена. Аномальные волокна (закрытые стрелки) наблюдались в Сульф1/2 ДКО головного мозга ( к , л ). Открытые стрелки в ( i , j ) указывают на нормальную ножку мозга. Статистический анализ нейрофиламент-позитивных волокон в среднем мозге ( i , k ) показан в дополнительной таблице 1. Cb, мозжечок; cp, ножка мозга; Сх, кора головного мозга; Hy, гипоталамус; IC, нижний холмик; МО, продолговатый мозг; от, зрительный тракт; Пн, мост; SC, верхнее двухолмие. Показаны передне-задняя (AP), дорсально-вентральная (DV) и медиально-латеральная (M-L) оси тела. Масштабные полосы показывают 750 мкм ( C , F ), 500 мкм ( D , E , G , H ), 1,0 мм ( I , K -мм ( I , K мм ( I , K ), мм ( I , K ), мм ( I , ). l ), см. также дополнительный рисунок S1.

Изображение в полный размер

У мышей DKO большинство меченых волокон простирались дорсально по направлению к верхнему холмику, а затем возвращались к стволу мозга, тогда как некоторые волокна проникали в верхний и нижний холмики (рис. 1b,f). Волокна, которые возвращались в мозговое вещество, были дефасцикулированы и располагались более латерально (рис. 1b, h), что отличалось от плотно фасцикулированного пучка у контрольных мышей 9.0387 ( рис. 1а,д). В результате ширина пучков аксонов CST в мозговом веществе у мышей с ДКО была значительно больше, чем у контрольных мышей (202,6 мкм в контроле и 374,4 мкм у ДКО, n = 4; P  = 0,002635 по критерию Уэлча -тест). Анализ срезов мозга, которым вводили DiI, показал, что волокна CST у мышей DKO казались почти нормальными, пока не достигли среднего мозга, где неправильно направленные волокна простирались дорсолатерально вдоль поверхности мозга (дополнительный рисунок S1p – t). В мозговом веществе мышей DKO пирамидный тракт стал тоньше и шире (дополнительный рисунок S1u). Эти аномалии соответствовали дефектам, обнаруженным при предыдущем окрашивании нейрофиламента-М (дополнительный рисунок S1m-o). Дополнительные дефекты наблюдались в мозге, которому вводили DiI: небольшая часть корковых волокон аберрантно проецировалась в направлении тектума через таламус (n   =   4/4, дополнительный рисунок S1r), а у некоторых мышей были обнаружены пересекающие среднюю линию дефекты в мозолистом теле. (n = 1/4, данные не показаны).

Экспрессия мРНК Sulf1 и Sulf2 и In Vivo Восстановление дефектов CST у мышей Sulf1/2 DKO. ( a – f , a’ – f’ ) In situ Гибридизация Sulf1 ( a – f ) и Sulf2 ( a’ – f’ ) в коронарных срезах головного мозга E15.5. Стрелки показывают высокую и перекрывающуюся экспрессию Sulf1 и Sulf2 в вентрикулярной зоне третьего желудочка и водопровода. Положения разделов в ( a – f ) и ( a’ – f’ ) показаны на верхнем поле. ( g – t ) Опосредованное электропорацией восстановление дефектов CST в Sulf1/2 Мыши ДКО. Указанные плазмиды и pCX- EGFP электропорировали в головной мозг E12.5 Sulf1/2 DKO. На E18.5 исследовали экспрессию EGFP и траекторию CST. Репрезентативные результаты, показывающие электропорацию в медиальную кору головного мозга ( g – j ), от верхних двухолмий до мозжечка ( k – n ) и от гипоталамуса до среднего мозга (Mb, o – т ). Цифры ( q , r ) и ( s , t ) показаны электропорированные и неэлектропорированные стороны одного и того же эмбриона соответственно. Dorsal ( g , k , o ), lateral ( h , i , l , m , p , q , s ), and ventral ( j , n , r , t ) показаны виды. Флуоресценция EGFP в гипоталамусе ( ч ) показывает передачу через контралатеральную сторону. Стрелки указывают места электропорации. Закрытые наконечники стрел ( I , J , M , N , S , T ) указывают на аномальные волокна CST в SULF1/2 DKO Brain Opene HOMAR HOMAE HOMAE HOMERW HOMEROW HOMEROW HOMEROW HOMEROW HOMEROW HOMERW HOMEROW HOMAE HOMERW HOMERW HOMERW HOMERW HOMERW HOMERW HOMERW HOMERW HOMEROW HOMEROW HOMEROW HOMEROW HOMEROW HOMEN. указывают CST, восстановленный электропорацией. Статистический анализ нейрофиламент-позитивных волокон в среднем мозге ( q , s ) показан в дополнительной таблице 1. ( u – w ) Колокализация коэлектропорированных генов. Когда EGFP и DsRed2 электропорировали вместе, они экспрессировались в одних и тех же областях мозга. Ак, акведук; ЧП, сосудистое сплетение; CP, кортикальная пластинка; cst, корково-спинномозговой тракт; FM, отверстие Монро; ml, медиальная петля; ОВ — обонятельная луковица; PoA, преоптическая область; preTc, претектум; Sp, перегородка; Т; таламус; V3, третий желудочек. Показаны передне-задняя (AP), дорсально-вентральная (DV) и медиально-латеральная (M-L) оси тела. Масштабные линейки указывают 300 мкм ( a , a’ ), 750 мкм ( b – f , b’ – f’ ), 3.1 mm ( g , h , k , l , o , p ), 550 μm ( i , j , n , r , t ), 1.0 mm ( m , q , s ), and 2.1 mm ( u – w ). См. также дополнительный рисунок S2.

Изображение в полный размер

Чтобы определить, какие области мозга с экспрессией Sulf необходимы для образования CST, мы выполнили in vivo спасение фенотипа Sulf1/2 DKO путем локального введения генов Sulf . Для этой цели мы электропорировали Sulf1 и Sulf2 с EGFP в различные области мозга на E12.5 и исследовали EGFP-положительную область и траекторию CST на E18.5. Мы выполнили электропорацию на E12.5, потому что это было до того, как аксоны CST начали расширяться, и потому что желудочки эмбрионального мозга были широко открыты, что позволяло легко вводить экзогенные гены в различные области. Чтобы вызвать сильную и повсеместную экспрессию, мы использовали вектор pCX, несущий промотор CAG 9.0147 16 . Удерживая эмбрионы с электродами под разными углами, экзогенные гены можно было электропорировать в интересующие ограниченные области мозга (рис. 2g–t). Поскольку коэлектропорированные гены коэкспрессировались в одной и той же области мозга (рис. 2u – w и дополнительная рис. S2a – d), EGFP-положительные области представляли области мозга, в которые были введены генов Sulf .

Электропорация pCX- Sulf1/2 в кору головного мозга (5 мышей; рис. 2g–j) и в область от верхнего двухолмия до мозжечка (3 мыши; рис. 2k–n) не спасла Фенотип ДКО. Напротив, когда Sulf1 / 2 были электропорированы в области, включая гипоталамус и средний мозг, дефекты CST полностью восстановились до нормы только на стороне электропорации (6 мышей; рис. 2o–t). Более того, мутант Sulf1 , лишенный ферментативной активности, не мог восстановить фенотип (4 мыши; дополнительная рис. S2e–h), тогда как дикий тип Sulf1 или Sulf2 мог восстановить дефекты (4 мыши для Sulf1 и 3 мыши для Sulf2 ; дополнительный рисунок S2i–p). Эти данные указывают на то, что активность Sulf необходима не в кортикальных аксонах, а в середине траектории CST.

Поскольку дефекты CST наблюдались только тогда, когда все 4 аллеля Sulf были потеряны, вполне вероятно, что области мозга, экспрессирующие оба Sulf1 и Sulf2 связаны с дефектами. Учитывая, что электропорация генов Sulf в гипоталамус и средний мозг спасла фенотип ДКО, вполне вероятно, что сильное перекрывание экспрессии Sulf1 / 2 в желудочковой зоне третьего желудочка играет решающую роль. Таким образом, мы задались вопросом, может ли селективная электропорация генов Sulf в эти клетки спасти фенотип DKO. Для удобства мы обнаружили, что вектор pEF-BOS ¹⁷ может индуцировать относительно специфическую экспрессию в этих клетках, хотя основной механизм неизвестен. При электропорации в гипоталамус и средний мозг pEF-BOS- EGFP индуцировал слабую, но ограниченную экспрессию в клетках желудочковой зоны (рис. 3a,b,e), тогда как pCX- EGFP индуцировал широкое выражение (рис. 2o, p и дополнительный рисунок S2a, c). Поэтому мы электропорировали pEF-BOS- Sulf1 и pEF-BOS- Sulf2 в головной мозг Sulf1/2 DKO и обнаружили, что дефекты CST были полностью устранены (3 мыши; рис. 3c, d). Эти данные показывают, что экспрессия Sulf в желудочковой зоне третьего желудочка была достаточной для правильного управления аксонами CST.

Электропорация Sulf Гены в радиальных глиальных клетках гипоталамуса восстанавливают дефекты CST у мышей Sulf1/2 DKO. ( a – d ) Опосредованное электропорацией восстановление дефектов CST у мышей Sulf1/2 DKO. Указанные плазмиды и pEF-BOS- EGFP электропорировали в мозг E12.5 Sulf1/2 DKO. На E18.5 исследовали экспрессию EGFP и траекторию CST. Спинной ( a ), латеральный ( b , c ) и вентральный ( d ) показаны виды. Открытые стрелки ( c , d ) указывают на CST, восстановленный электропорацией. Стрелки указывают места электропорации. Показаны передне-задняя (AP), дорсально-вентральная (DV) и медиально-латеральная (M-L) оси тела. Статистический анализ нейрофиламент-позитивных волокон в среднем мозге ( c ) показан в дополнительной таблице 1. ( e — e” ) Экспрессия EGFP в pEF-BOS- EGFP -электропорированном мозге. ( e’ ) показана иммуногистохимия с антителом против EGFP. ( e » ) показывает увеличенное изображение в выделенной области на ( e’ ). ( f – m ) Иммуногистохимия головного мозга E15.5 с анти-Sulf или анти-HS антителами. Сигналы с анти-Sulf1 в мозге Sulf2 KO ( f ) были устранены в мозге Sulf1/2 DKO ( г ), тогда как сигналы с анти-Sulf2 в мозге дикого типа ( h ) были упразднены в Sulf2 KO ( i ) головной мозг. Мозг Sulf2 KO и Sulf1/2 DKO использовали для окрашивания анти-Sulf1, поскольку антитело анти-Sulf1 слабо перекрестно реагирует с белком Sulf2. Сигналы с анти-HS AO4B08 ( j , k ) и анти-HS HS4E4 ( l , m ) в контроле ( Sulf1 ^-/- ) головного мозга ( j , l ) увеличивались и уменьшались в Sulf1/2 ДКО головного мозга ( к , м ) соответственно. Картинки ( ф ₁ – м ₁ ), ( ф ₂ – м ₂ ), ( ф ₃ – м ₃ ) и ( f ₄ – и ₄ ) показывают обведенные рамкой области с соответствующими номерами в отделе мозга на левом поле. Звездочками показаны кровеносные сосуды. Масштабные линейки показывают 2,0 мм ( a , b ), 650 μm ( c , e , e’ ), 350 μm ( d ), 210 μm ( e” ), and 150 μm ( f – м ). См. также дополнительный рисунок S2.

Увеличить

Для изучения локализации белка Sulf в головном мозге было проведено иммуноокрашивание. Оба белка Sulf1 и Sulf2 были обнаружены в клетках желудочковой зоны вдоль третьего желудочка (рис. 3f ₄ ,h ₄ ), что согласуется с локализацией Sulf1 и Sulf2 мРНК. Оба сигнала были устранены путем разрушения генов Sulf , что указывает на специфичность иммунного окрашивания (рис. 3g ₄ , i ₄ ). Интересно, что оба белка дополнительно обнаруживались на поверхности головного мозга: сильно вблизи ножки мозга и слабо в гипоталамусе (рис. 3f _2–3 ,h _2–3 ). Сульфатные белки, индуцированные электропорацией, демонстрировали сходные модели распределения (дополнительный рисунок S2b 9). 0911 3 , д ₃ ). Поскольку EGFP-положительные клетки в pEF-BOS-EGFP-электропорированном мозге представляли собой радиальные глиальные клетки, простирающиеся длинными отростками от желудочковой зоны до пиальной поверхности (рис. 3e’–3e”), мы предположили, что Sulf-белки, продуцируемые радиальными глиальными клетками доставляются на пиальную поверхность.

Чтобы проверить, изменяет ли разрушение генов Sulf паттерны сульфатирования HS локально, где присутствуют белки Sulf, мы провели иммунное окрашивание HS с использованием нескольких антител против фагового дисплея HS на E15.5, хотя наш дисахаридный анализ уже показал, что трисульфатированный Дисахариды HS были повышены во всем мозге новорожденных мышей DKO (дополнительная рис. S1a,b). Сигналы с антителами AO4B08 и RB4CD12, распознающими дисахариды HS, содержащие 2- O -, 6- O — и N -сульфатные группы ^18,19 , были сильнее на поверхности мозга мышей DKO, чем у контрольных мышей, тогда как сигналы в кровеносных сосудах были сопоставимы между DKO и контрольными мышами (рис. 3j, k и дополнительный рисунок S2q – r). Увеличение сигналов AO4B08 и RB4CD12 было особенно заметным в ножке головного мозга и гипоталамусе. И наоборот, сигналы с HS4E4, который распознает дисахариды HS, содержащие 2- O — и N -сульфатные группы ¹⁸ , были слабее у мышей DKO (рис. 3l,m). Эти данные указывают на то, что доля трисульфатированных дисахаридов HS была увеличена на пиальной поверхности в результате разрушения Sulf1/2 . Поскольку изменения были наиболее сильными вокруг траектории CST, вполне вероятно, что это локальное изменение в HS способствует возникновению аномалий в аксонах CST.

Какие механизмы лежат в основе дефектов CST у мышей Sulf1/2 DKO? Мы предположили, что увеличение количества трисульфатированного HS изменяет количество или локализацию некоторых белков-направителей аксонов. Чтобы определить ответственную молекулу (молекулы), мы сначала исследовали все известные белки управления аксонами, экспрессированные в гипоталамусе и среднем мозге на E15. 5, с помощью беспристрастного подхода с использованием протеомного анализа. Поскольку Sulfs модифицировал HS в базальной мембране, мозговые оболочки (обогащенные базальной мембраной) анализировали с использованием жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией с ионной ловушкой (ЖХ-МС/МС). В таблице на дополнительном рисунке S3a показан список белков наведения аксонов, обнаруженных этим методом. Slit2, Sema3E, Sema4G, Sema5B и Sema6B были обнаружены только в мозге DKO, что позволяет предположить, что они были более распространены у мышей DKO. Напротив, Sema4D и EphrinB2 были обнаружены только в контрольном мозге, что позволяет предположить, что они были менее распространены у мышей DKO. Slit1 показал одинаковые спектральные подсчеты в контроле и мышах DKO.

Чтобы точно определить молекулу(ы)-кандидата, мы исследовали их паттерны экспрессии и проверили, вызывает ли их сверхэкспрессия какие-либо изменения в траектории CST. Электропорация pCX- Sema3e в мозг дикого типа вызывала латеральный сдвиг CST в ножке мозга (3 мыши, рис. 4i,j), напоминающий фенотип слабого ДКО. мРНК Sema3e экспрессировалась вблизи ножки головного мозга (рис. 4a–c), что предполагает возможное участие в формировании CST. Однако Sema3e 9Сверхэкспрессия 0288 не вызывала таких дефектов CST, которые наблюдались в мозге Sulf1/2 DKO, что указывает на то, что избыток Sema3E сам по себе не может объяснить фенотип DKO. Электропорация pCX- Slit2 на E12.5 вызывала очень сильное отталкивание аксонов CST (рис. 4m), аналогично тяжелому фенотипу DKO и согласующееся с предыдущими наблюдениями ^20,21 . Индукция более слабой экспрессии Slit2 электропорацией pEF-BOS- Slit2 (pEF-BOS индуцирует более слабую экспрессию, чем pCX) на E13.0 (более низкая эффективность электропорации, чем на E12.5) приводила к дефектам CST, которые были неотличимы от дефектов умеренного фенотипа ДКО (рис. 4p). 9мРНК 0287 Slit2 показала высокую экспрессию в желудочковой зоне третьего желудочка, особенно в заднем гипоталамусе (рис. 4d–f и дополнительный рисунок S3p–s), что свидетельствует о колокализации и возможном сотрудничестве с Sulf1 / 2 . Напротив, экспрессия Slit1 не наблюдалась в вентрикулярной зоне вентральной части третьего желудочка (дополнительный рисунок S3l-o), и поэтому считалось, что Slit1 не имеет отношения к дефектам CST, хотя его избыточная экспрессия может вызывать отталкивание Аксоны CST (дополнительный рисунок S3t – u). Электропорация других генов-кандидатов не вызывала никаких аномалий CST в мозге дикого типа и не спасала фенотип DKO (дополнительный рисунок S3c, e, g, i, k).

Чтобы проверить эту возможность, мы хотели обнаружить белок Slit2 в эмбриональном мозге. Однако, поскольку антитела для иммунного окрашивания Slit2 отсутствовали, мы использовали внеклеточную часть Robo2, рецептора Slit, который был помечен Fc-областью человеческого IgG (Robo2-Fc; ссылка 9).0147 24 ). Во-первых, мы подтвердили, что Robo2-Fc связывается с Slit2 в трансфицированных клетках (дополнительная рис. S4a – d, f). Затем мы проверили связывание Robo2-Fc на срезах головного мозга, подвергнутых электропорации с помощью pCX-FLAG- Slit2 . Когда срезы мозга инкубировали с Robo2-Fc, связывание было четко обнаружено только на стороне электропорации и было локализовано с эпитопом FLAG (дополнительный рисунок S4m-r), что указывает на то, что Robo2-Fc может обнаруживать белок Slit2 в срезах мозга. Связывание Robo2-Fc было сильно обнаружено на поверхности головного мозга в дополнение к клеточным телам электропорированных клеток в вентрикулярной зоне и паренхиме головного мозга.

Затем мы проверили, изменило ли нарушение генов Sulf локализацию Slit. Связывание Robo2-Fc практически не обнаруживалось в головном мозге контрольной группы, за исключением слабых сигналов на пиальной поверхности верхнего двухолмия (рис. 5а). Напротив, у мышей Sulf1/2 DKO было обнаружено сильное связывание Robo2-Fc на пиальной поверхности, особенно в областях ножки мозга и гипоталамуса (рис. 5b). Количественное сравнение показало, что интенсивность сигнала в Sulf1/2 9У мышей 0288 DKO было значительно выше в ножке мозга и гипоталамусе, чем в контроле, но было сопоставимо в верхнем двухолмии (рис. 5f). Связывание Robo2-Fc было локализовано вместе с ламинином (рис. 5g–h), что позволяет предположить, что белок Slit был связан с базальной мембраной. Кроме того, связывание Robo2-Fc в мозге DKO было полностью устранено путем делеции гена Slit2 (а именно в мозге тройного нокаута), за исключением слабых сигналов в верхнем двухолмии (рис. 5j – k и дополнительный рисунок S5a). –e), предполагая, что сигналы связывания Robo2-Fc в ножке головного мозга и гипоталамусе указывают на локализацию белка Slit2. Эти данные ясно показали, что белок Slit2 избыточно накапливался в вентральной области мозга Sulf1/2 Мыши ДКО.

Повышенные уровни связывания Robo2-Fc у мышей Sulf1/2 DKO были восстановлены до контрольных уровней с помощью электропорации Sulf1/2 , которую проводили в тех же условиях, что и в экспериментах по восстановлению фенотипа, тогда как электропорация мутанта Sulf1 оказалась неэффективной (рис. 5c–e). Морфология базальной мембраны и радиальных глиальных клеток, по оценке иммуноокрашивания ламинином и нестином, была нормальной в Мыши Sulf1/2 DKO (дополнительный рисунок S5f – i). Кроме того, не наблюдалось увеличения экспрессии мРНК Slit2 у мышей Sulf1/2 DKO (данные не показаны). В совокупности эти данные показывают, что аномально высокие количества белка Slit2 накапливаются в вентральной области мозга, вызывая дефекты ведения аксонов CST у мышей Sulf1/2 DKO (рис. 6).

Краткий обзор фенотипов CST. У контрольных мышей белки Sulf1/2 и Slit2, продуцируемые радиальными глиальными клетками, присутствуют на пиальной поверхности. В 9У мышей 0287 Sulf1/2 DKO повышенное содержание 6- O -сульфатированного HS приводит к избыточному накоплению белка Slit2 (показан темно-синим цветом) в задней части гипоталамуса, что приводит к дорсальному смещению CST. Поскольку мыши DKO умирают в течение дня после рождения, CST каудальнее пирамидного перекреста не исследовали (пунктирные линии). У мышей Slit2 KO аксоны CST проникают в вентральную часть переднего мозга из-за отсутствия отталкивания Slit2.

Полноразмерное изображение

Аномальное накопление белка Slit2 ответственно за дефекты CST в

Анализ ЖХ-МС/МС

Анализ методом жидкостной хроматографии с ионной ловушкой (ЖХ-МС/МС) проводили, как описано ранее ⁴⁶ . Вкратце, образцы разделяли с помощью SDS-PAGE и гель разрезали на 15 частей. Кусочки геля повторно пропитывали 25 мМ бикарбонатом триэтиламмония (TEAB), pH 8,0, содержащим 50% ацетонитрила, в течение 30 мин. После сушки в концентраторе Savant Speed-Vac (Thermo Fisher Scientific) гель инкубировали в 25 мМ TEAB, pH 8,0, содержащем 75–150 нг модифицированного трипсина (Roche Diagnostics), при 37 °C в течение 16–20 ч. Раствор дважды экстрагировали 100–300 мкл 0,1% трифторуксусной кислоты, содержащей 60% ацетонитрила. Эти 2 экстракта объединяли, сушили в концентраторе Speed-Vac и хранили при температуре -80 °C до анализа. Образец ресуспендировали в 0,1% муравьиной кислоте, содержащей 2% ацетонитрила, и наносили на систему ВЭЖХ DiNa (KYA Technologies Corporation). Использовали капиллярную колонку с обращенной фазой (Develosil ODS-HG5, внутренний диаметр 0,075 мм × 150 мм; Nomura Chemical) при скорости потока 200 или 300 нл/мин с линейным градиентом ацетонитрила 4–80%. Элюированные пептиды определяли непосредственно с помощью масс-спектрометра с ионной ловушкой (LXQ; Thermo Fisher Scientific) при напряжении распыления 1,9.кВ и энергии столкновения 35%. Метод массового сбора данных состоял из 1 полного сканирования МС с последующим сканированием МС/МС наиболее распространенных ионов-предшественников из сканирования обзора. Динамическое исключение для спектров МС/МС было установлено на 30 с. Данные анализировали с помощью программного обеспечения BioWorks (Thermo Fisher Scientific) и Mascot (Matrix Science).

Анализ связывания Robo2-Fc

Клетки Cos-7 трансфицировали pMT21-Robo2-Fc с использованием реагента LipofectAMINE Plus (Life Technologies) или FuGene HD (Promega). После культивирования клеток в бессывороточной среде Opti-MEM I (Life Technologies) в течение 3 дней кондиционированную среду концентрировали примерно в 5 раз с использованием фильтра Amicon Ultra-15 (50k MCO; Millipore). Для in vitro , клетки 293EBNA (Life Technologies), трансфицированные pCEP4-FLAG- Slit1 или pCEP4-FLAG- Slit2 , инкубировали с Robo2-Fc в буфере PH (PBS с 1% инактивированной нагреванием нормальной козьей сыворотки). ) при комнатной температуре в течение 1 ч. После промывки клетки фиксировали 2% PFA/PBS, пермеабилизировали в PHT (PH с 0,1% Triton-X100) и инкубировали с Cy3-меченым антителом против IgG человека при комнатной температуре в течение 30 мин (1:350; Джексон ИммуноИсследования).

Для обнаружения in situ свежезамороженные срезы головы мыши E15. 5 толщиной 10 мкм фиксировали в 1% уксусной кислоте и 95% этаноле при температуре -20 °C в течение ночи. После промывания PBS и блокирования PHT при комнатной температуре в течение 1 часа предметные стекла инкубировали с Robo2-Fc (концентрация примерно в 2,5 раза) при 4°C в течение ночи. Затем предметные стекла промывали PHT и инкубировали с биотин-SP-конъюгированным антителом против IgG человека (1:50; Jackson ImmunoResearch) при комнатной температуре в течение 45 мин, а затем со стрептавидином, конъюгированным с Alexa546 (1:50; Life Technologies) при комнатной температуре. комнатной температуре в течение 15 мин. В этом препарате сигнал флуоресценции электропорированного EGFP был устранен, и поэтому иммуноокрашивание не нарушалось.

Серия флуоресцентных изображений z-stack (1024 × 1024 пикселей) была получена с использованием лазерного сканирующего микроскопа LSM510 с 10-кратным объективом (Carl Zeiss). Для количественного сравнения интенсивности флуоресценции образцов использовали одни и те же параметры (отверстие 80,3 мкм, оптимальный интервал 6,54 мкм, усиление детектора 1000, смещение усилителя -0,1, усиление усилителя 1, скорость сканирования 9, среднее число, 2) использовались для всех сканирований. Для каждого экспериментального условия использовали три секции. В каждом срезе для измерения выбирался один оптический срез с наибольшей интенсивностью. Прослеживали контур поверхности мозга и измеряли интенсивность флуоресценции в прослеживаемой области.

Вестерн-блот-анализ

Мозговые оболочки или мозг, вырезанные из областей гипоталамуса и среднего мозга эмбрионов мыши E15.5, гомогенизировали в буфере для образцов (62,5 мМ трис-HCl, pH 6,8, 2% SDS, 5% сахарозы, 0,01% бромфенола). синий, 10% 2-меркаптоэтанол). Основными используемыми антителами были анти-Slit2 (1:200, G-19; Santa Cruz Biotechnology), анти-актин (1:1000; Sigma) и анти-ламинин (1:1000; Sigma). В качестве вторичных антител использовали конъюгированные с пероксидазой антикозьи или кроличьи IgG (1:2500; Jackson ImmunoResearch). Сигналы детектировали с использованием системы обнаружения вестерн-блоттинга ECL Plus (GE). Данные контрольного эксперимента, подтвердившего специфичность анти-Slit2-антитела (G-19) показаны на дополнительном рисунке S6.

Статистика

Статистические методы не использовались для предварительного определения размера выборки, но наши размеры выборки аналогичны тем, которые обычно используются в этой области. Статистический анализ данных связывания Robo2-Fc и анализа дисахаридов проводили с помощью ANOVA с апостериорными тестами Тьюки-Крамера и Бонферрони, соответственно. Точный критерий Фишера использовали для анализа частоты восстановления фенотипа у эмбрионов, подвергшихся электропорации pCX- Robo2-Fc . Стьюдентный критерий Уэлча и парный t-критерий использовались для анализа средней интенсивности флуоресцентного сигнала, ширины пучков аксонов и площади положительной области нейрофиламента (подробности анализа описаны в дополнительной таблице 1).

Доступность данных

Данные, подтверждающие результаты этого исследования, можно получить у соответствующего автора по обоснованному запросу.

Ссылки

1. «>

   Перримон, Н. и Бернфилд, М. Особенности гепарансульфатных протеогликанов в процессах развития. Природа 404 , 725–728 (2000).

   ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья пабмед Google ученый

2. Холт, К. Э. и Диксон, Б. Дж. Сахарные коды для аксонов? Нейрон 46 , 169–172 (2005).

   КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

3. Бишоп, Дж. Р., Шукс, М. и Эско, Дж. Д. Гепарансульфатные протеогликаны тонко настраивают физиологию млекопитающих. Природа 446 , 1030–1037 (2007).

   ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья пабмед Google ученый

4. Масу, М. Протеогликаны и наведение аксонов: новые отношения между старыми партнерами. Дж. Нейрохим. 139 , 58–75 (2016).

   КАС Статья пабмед Google ученый

5. Ламанна, В. К. и др. . Гепараном – загадка кодирования и расшифровки сульфатирования гепарансульфата. J. Биотехнология. 129 , 290–307 (2007).

   КАС Статья пабмед Google ученый

6. Эль Масри, Р., Сеффух, А., Лортат-Джейкоб, Х. и Вивес, Р. Р. «Вход и выход» глюкозамин-6-О-сульфатирования: 6-е значение гепарансульфата. Гликоконж . Дж . под давлением.

7. Ламанна, В.К. и др. . Гепарансульфат 6-О-эндосульфатазы: дискретные Активность in vivo и функциональная кооперация. Биохим. Дж. 400 , 63–73 (2006).

   КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

8. «>

   Ай, Х. и др. . SULF1 и SULF2 регулируют опосредованную гепарансульфатом передачу сигналов GDNF для иннервации пищевода. Разработка 134 , 3327–3338 (2007).

   КАС Статья пабмед Google ученый

9. Холст, Ч.Р. и др. . Секретируемые сульфатазы Sulf1 и Sulf2 играют перекрывающиеся, но существенные роли в выживании новорожденных мышей. PLoS Один 2 , e575 (2007 г.).

   ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

10. Langsdorf, A., Do, A.T., Kusche-Gullberg, M., Emerson, C.P. Jr. & Ai, X. Сульфаты являются регуляторами передачи сигналов фактора роста для дифференцировки сателлитных клеток и регенерации мышц. Дев. биол. 311 , 464–477 (2007).

    КАС Статья пабмед Google ученый

11. Рацка А. и др. . Избыточная функция гепарансульфат-6-О-эндосульфатаз Sulf1 и Sulf2 во время развития скелета. Дев. Дин. 237 , 339–353 (2008).

    КАС Статья пабмед Google ученый

12. Калус И. и др. . Дифференциальное участие внеклеточных 6-O-эндосульфатаз Sulf1 и Sulf2 в развитии мозга, нейрональной и поведенческой пластичности. Дж. Сотовый. Мол. Мед. 13 , 4505–4521 (2009).

    КАС Статья пабмед Google ученый

13. Калус И. и др. . Sulf1 и Sulf2 по-разному модулируют сульфатирование гепарансульфата и протеогликана во время постнатального развития мозжечка: доказательства нейропротекторной функции и функции, способствующей росту нейритов. ПлоС Один 10 , e0139853 (2015).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

14. Канти, А. Дж. и Мерфи, М. Молекулярные механизмы направления аксонов в развивающемся корково-спинномозговом тракте. Прог. Нейробиол. 85 , 214–235 (2008).

    КАС Статья пабмед Google ученый

15. Лейва-Диас, Э. и Лопес-Бендито, Г. В коре и вне ее: развитие основных связей переднего мозга. Неврология 254 , 26–44 (2013).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

16. Нива, Х., Ямамура, К. и Миядзаки, Дж. Эффективная селекция трансфектантов с высокой экспрессией с помощью нового эукариотического вектора. Джин 108 , 193–199 (1991).

    КАС Статья пабмед Google ученый

17. Mizushima, S. & Nagata, S. pEF-BOS, мощный вектор экспрессии млекопитающих. Рез. нуклеиновой кислоты. 18 , 5322 (1990).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

18. Куруп, С. и др. . Характеристика антигепарансульфатного фагового дисплея антител AO4B08 и HS4E4. J. Biol. хим. 282 , 21032–21042 (2007 г.).

    КАС Статья пабмед Google ученый

19. Нагамин С. и др. . Органоспецифические паттерны сульфатации гепарансульфата, генерируемого внеклеточными сульфатазами Sulf1 и Sulf2 у мышей. J. Biol. хим. 287 , 9579–9590 (2012).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

20. Шу, Т. и Ричарддс, Л.Дж. Направление корковых аксонов глиальным клином во время развития мозолистого тела. J. Neurosci. 21 , 2749–2758 (2001).

    КАС пабмед Google ученый

21. Багри, А. и др. . Щелевые белки предотвращают пересечение срединной линии и определяют дорсо-вентральное положение основных путей аксонов в переднем мозге млекопитающих. Нейрон 33 , 233–248 (2002).

    КАС Статья пабмед Google ученый

22. Ronca, F., Andersen, J.S., Paech, V. & Margolis, R.U. Характеристика взаимодействия белка Slit с глипиканом-1. Дж. Биол. хим. 276 , 29141–29147 (2001).

    КАС Статья пабмед Google ученый

23. Шипп, Э. Л. и Хси-Уилсон, Л. К. Профилирование специфики сульфатирования взаимодействий гликозаминогликанов с факторами роста и хемотаксическими белками с использованием микрочипов. Хим. биол. 14 , 195–208 (2007).

    КАС Статья пабмед Google ученый

24. Броуз, К. и др. . Белки Slit связываются с рецепторами Robo и играют эволюционно законсервированную роль в отталкивающем ведении аксонов. Сотовый 96 , 795–806 (1999).

    КАС Статья пабмед Google ученый

25. Ву, В. и др. . Направленное управление миграцией нейронов в обонятельной системе с помощью белка Slit. Природа 400 , 331–336 (1999).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

26. Уитфорд, К. Л. и др. . Регуляция развития корковых дендритов с помощью взаимодействия Slit-Robo. Нейрон 33 , 47–61 (2002).

    КАС Статья пабмед Google ученый

27. Лопес-Бендито, Г. и др. . Robo1 и Robo2 сотрудничают, чтобы контролировать направление основных аксональных трактов в переднем мозге млекопитающих. J. Neurosci. 27 , 3395–3407 (2007).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

28. Инатани, М., Ири, Ф., Пламп, А.С., Тессье-Лавин, М. и Ямагучи, Ю. Морфогенез мозга млекопитающих и направление аксонов по срединной линии требуют гепарансульфата. Наука 302 , 1044–1046 (2003).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья пабмед Google ученый

29. Ли, Дж. С. и др. . Сортировка аксонов в зрительном тракте требует синтеза HSPG с помощью ext2 (dackel) и extl3 (boxer). Нейрон 44 , 947–960 (2004).

    КАС Статья пабмед Google ученый

30. Ли, Дж. С. и Чиен, К. Б. Когда аксоны направляются сахарами: выводы из мутантов гепарансульфата протеогликана. Нац. Преподобный Жене. 5 , 923–935 (2004).

    КАС Статья пабмед Google ученый

31. Bülow, H. E. & Hobert, O. Дифференциальные сульфатации и эпимеризация определяют специфичность гепарансульфата в развитии нервной системы. Нейрон 41 , 723–736 (2004).

    Артикул пабмед Google ученый

32. Бюлов Х. Э. и Хоберт О. Молекулярное разнообразие гликозаминогликанов определяет развитие животных. год. Преподобный Cell Dev. биол. 22 , 375–407 (2006).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

33. Pratt, T., Conway, C.D., Tian, ​​N.M., Price, D.J. & Mason, J.O. Паттерны сульфатации гепарана, генерируемые специфическими ферментами гепарансульфотрансфераз, направляют различные аспекты направления аксонов сетчатки в зрительном перекресте. J. Neurosci. 26 , 6911–6923 (2006).

    КАС Статья пабмед Google ученый

34. Bülow, H.E. и др. . Модификации внеклеточного сахара предоставляют поучительную и специфичную для клеток информацию для выбора направления аксонов. Курс. биол. 18 , 1978–1985 (2008).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

35. Conway, CD и др. . Модификации сахара гепарансульфатом опосредуют функции щелей и др. факторов, необходимых для развития спайки переднего мозга мышей. J. Neurosci. 31 , 1955–1970 (2011).

    КАС Статья пабмед Google ученый

36. Клегг, Дж. М. и др. . Гепарансульфотрансферазы Hs6st1 и Hs2st контролируют Erk в отношении развития мозолистого тела мышей. J. Neurosci. 34 , 2389–2401 (2014).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

37. «>

    Сяо Т. и др. . Сборка специфичных для пластинки нейронных соединений с помощью щели, связанной с коллагеном IV типа. Сотовый 146 , 164–176 (2011).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

38. Райт, К. М. и др. . Дистрогликан организует локализацию сигнала направления аксона и поиск пути аксона. Нейрон 76 , 931–944 (2012).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

39. Варадараджан, С. Г. и др. . Нетрин1, продуцируемый нейронными предшественниками, а не клетками пластины пола, необходим для направления аксонов в спинной мозг. Нейрон 94 , 790–799 (2017).

    КАС Статья пабмед Google ученый

40. «>

    Доминики, К. и др. . Нетрин-1, полученный из пластинки дна, необязателен для направления комиссуральных аксонов. Природа 545 , 350–354 (2017).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

41. Lau, E. & Margolis, R.U. Ингибиторы взаимодействия слитых белков с гепарансульфатным протеогликаном глипиканом-1: потенциальные средства для лечения травм спинного мозга. клин. Эксп. Фармакол. Физиол. 37 , 417–421 (2010).

    КАС Статья пабмед Google ученый

42. Tuckett, F. & Morris-Kay, G. Alcian Blue Окрашивание гликозаминогликанов в эмбриональном материале: влияние различных фиксаторов. Гистохим. Дж. 20 , 174–182 (1988).

    КАС Статья пабмед Google ученый

43. «>

    Танигучи, М. и др. . Нарушение гена семафорина III/D вызывает серьезную аномалию в проекции периферического нерва. Нейрон 19 , 519–530 (1997).

    КАС Статья пабмед Google ученый

44. Окада Т., Кейно-Масу К. и Масу М. Миграция и нуклеогенез премозжечковых нейронов мыши, визуализированные с помощью in utero электропорации гена зеленого флуоресцентного белка. Неврологи. Рез. 57 , 40–49 (2007).

    КАС Статья пабмед Google ученый

45. Охто, Т. и др. . Идентификация новой нелизосомальной сульфатазы, экспрессируемой в пластинке дна, сосудистых сплетениях и хрящах. Гены Клетки 7 , 173–185 (2002).

    КАС Статья пабмед Google ученый

46. «>

    Каметани, Ф. и др. . Идентификация сайтов фосфорилирования казеинкиназы-1 на TDP-43. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 382 , 405–409 (2009).

    КАС Статья Google ученый

Ссылки для скачивания

Предоставление сервисных решений по управлению аккумуляторными батареями

Во всем мире используются свинцово-кислотные аккумуляторные батареи для запуска автомобильных двигателей стоимостью около 60 миллиардов долларов. Каждому из них суждено проработать определенное количество лет, а затем перестать работать. Потребитель обязан в силу владения автомобилем покупать сменные аккумуляторы. Потребитель — неохотный покупатель, который, скорее всего, купит по цене, что, в свою очередь, ставит производителей аккумуляторов под коммерческое давление. Скорее всего, поэтому средний свинцово-кислотный автомобильный аккумулятор имеет относительно скромный срок службы.

Реклама стоимостью в миллионы долларов настаивает на том, что сульфатация является основной причиной отказа батареи. Это легло в основу того, что многие люди считают правдой. Мы изучили весь спектр зарегистрированных ноу-хау на предмет продления срока службы свинцово-кислотных аккумуляторов. Мы прочитали множество патентов, статей, документов, отчетов, комментариев, писем и рекламных объявлений и провели сотни тестов. Это то, что мы нашли.

В развитых странах насчитывается от 500 до 800 автомобилей на 1000 человек населения, другими словами, почти одна свинцово-кислотная батарея на человека. Почти четыреста миллионов батарей. Розничные продавцы автозапчастей по праву должны продавать огромные объемы импульсных десульфататоров. Некоторые производители продукции для импульсной десульфатации должны были стать достаточно крупными, чтобы стать публичными предприятиями. Но ничего не произошло. Импульсные десульфаторы продаются сейчас так же, как и двадцать лет назад, когда они впервые появились, поштучно и по паре, преимущественно мелкими специалистами по доставке по почте.

Сначала нам очень нравилась концепция импульсной сульфатации, и мы думали, что поняли ее. Мы были очень удивлены при поиске в патентных базах данных по всему миру, обнаружив 61 патент, натянутый, как жемчуг на ожерелье во времени, — все они были выпущены после 1991 года — последовательно описывая каждое предыдущее изобретение как ошибочное, а затем каждый, в свою очередь, предлагал принципиально иная пульсирующая техника. Электрические, а также магнитные, механические и ультразвуковые — от интенсивных импульсов длительностью всего лишь наносекунды — импульсов длительностью миллисекунды — прямоугольная волна включена-выключена — прямоугольная волна включена и треугольная выключена, с различными интервалами. В некоторых конструкциях используется сама батарея для питания импульсного блока, чтобы посылать импульсы обратно самому себе — довольно иррационально рискуя разрядить батарею до тех пор, пока она не сможет выполнять свою намеченную задачу. Пульсация при различных состояниях заряда, пульсация с различной частотой, устойчивая пульсация, структурированная пульсация, резонансная пульсация. Некоторые утверждают, что лучше всего пульсировать на частоте кристаллического резонанса серы 3,26 МГц. То, что они увидели, это собственный резонанс разъемов батареи, сделали предположение. В свинцово-кислотном аккумуляторе нет серы, только сульфат водорода (серная кислота) и сульфат свинца (сульфат свинца).

Импульсная зарядка — старая технология. Импульсная терапия появилась относительно недавно. Уилфорду Б. Беркетту ошибочно приписывают изобретение импульсного омоложения батареи в конце 1960-х — начале 1970-х годов. Он использовал импульсы для быстрой зарядки аккумуляторов. Омоложение батареи или десульфатация с помощью пульсации была изобретена Карлом Эдвардом Гали (1928-2009) (разработчиком микросхем на пенсии, Texas Instruments), патент США 5 063 341, подана 16 октября 1990 г., выдана 5 ноября 1991 г. [Нажмите, чтобы просмотреть первый патент, 1. USPTO: патент США 5 063 341 или 2. Google: патент США 5 063 341 и повторно рассмотренный патент, 3. US Re. 35643, 28 октября 1997 г. pdf. ] . Его патенты, очевидно, были не очень сильными. Импульсная технология десульфатации свинцово-кислотных аккумуляторов быстро начала привлекать большое количество энтузиастов, производителей и дистрибьюторов по всему миру.

Разнообразие последующих импульсных патентов обеспечивает удобный и удивительно точный способ определения истинного уровня понимания технологии. Базы данных показывают, что предмет патента на импульсную технологию необычайно широко разбросан, подтверждая, что с этой технологией определенно что-то не так.

Мы считаем весьма знаменательным тот факт, что пульсация начала набирать популярность в начале 1990-х годов, только после того, как все основные производители аккумуляторов представили автомобильные аккумуляторы, не требующие особого ухода. Эти батареи имеют сетки из свинцово-кальциевого сплава. Свинцово-кальциевые батареи в подавляющем большинстве случаев выходят из строя из-за того, что известно в торговле как «пассивация» или «разомкнутая цепь». Технологи аккумуляторов описали это как «эффект отсутствия сурьмы».

Свинцово-кальциевый сплав образует ультратонкий, очень плохо проводящий тетрагональный слой оксида свинца (альфа-PbO) на поверхностях сеток положительных пластин с течением времени, в результате чего положительный активный материал в положительных пластинах остается изолированным от несущей положительная сетчатая структура. Слой PbO начинается с PbSO4 и формируется с течением времени в результате реакций, приводящих к повышению pH в границах соединения. (См. ссылку внизу страницы.) Производители аккумуляторов используют олово для контроля этого оксидного слоя. Это далеко не просто. Добавление в сплав более 1,5 % олова снижает эффект пассивации – критически важно, что при 0,6 % олово фактически ухудшает эффект. Олово дорого, поэтому используется как можно меньше, что приводит к непредсказуемым результатам. Есть более 90 патентов, описывающих олово, а также другие металлы, сплавленные с положительными сетками или нанесенные на них, — предполагать, что это тоже является очень проблематичной технологией. Серебро еще более выгодно, но мучительно дорого. До свинцово-кальциевого сплава предпочтительным был сплав свинца-сурьмы. Свинцово-сурьмяные всегда были в этом плане абсолютно на 100% безотказными.

Тогда зачем менять? Очень хороший вопрос. В свинцово-кальциевых батареях используется в восемь раз меньше воды, чем в свинцово-сурьмяных, к тому же они могут быть полностью необслуживаемыми благодаря технологии рекомбинации водорода и кислорода. Стоимость свинцово-кальциевых сеток ниже свинцово-сурьмяных. Производители аккумуляторов очень быстро играют в «следуй за лидером», чтобы убедиться, что между аккумуляторами мало выбора. Очевидно, что отсутствие необходимости в обслуживании воспринимается как важное значение, а разумное время автономной работы — в меньшей степени. Эти Пиноккио быстро описывают AGM и Gel как обеспечивающие «оптимальную производительность» и «превосходную глубокую цикличность», но предпочитают не раскрывать фактические цифры срока службы при циклировании. Добро пожаловать в общество одноразовых!

Проблема заключается в том, что аккумулятор отказывается запускать двигатель. Затем, когда аккумулятор ставится на зарядку, его напряжение почти сразу повышается, как будто он уже полностью заряжен. Все внешние признаки (в том числе низкий SG в залитых батареях) идентичны сульфатации, но это точно не сульфатация. Применение сильных высокочастотных импульсов, импульсов с коротким временем нарастания, действующих в основном в том же направлении, что и зарядный ток батареи, разрушает сверхтонкий оксидный изолирующий слой и, таким образом, восстанавливает емкость батареи в ампер-часах до обслуживаемый уровень.

Наши исследователи провели серию экспериментов, чтобы выяснить из первых рук, какое влияние пульсация оказывает на сульфатированные аккумуляторы. Наше тестирование проводилось на элементах батареи, которые мы встроили в стеклянные контейнеры, чтобы мы могли точно видеть, от начала до конца, что происходит с пластинами батареи. Полностью заряженные, полностью разряженные и сульфатированные пластины имеют разные цвета, которые нетрудно отличить друг от друга. У нас были аккумуляторные пластины, которые бережно хранились неиспользованными в аккумуляторной кислоте в течение пяти лет. Пластины были 100% сульфатированы. Мы включили эти планшеты в наши тестовые ячейки.

При тестировании мы использовали двухлучевой осциллограф с частотой 100 МГц и коаксиальный токовый шунт с малой индуктивностью. Острые наносекундные/микросекундные импульсы вызывали «пинг» или затухающие синусоидальные колебания. Мы внимательно рассмотрели эти колебания. Волна тока была на 90 градусов не в фазе с волной напряжения из-за резонанса индуктивности цепи и емкости цепи, показывая, что практически вся пульсирующая энергия в конечном итоге бесполезно рассеивается в проводке и сопротивлении цепи, вместо того, чтобы идти. в батарею. (В электротехнике сильного тока это известно как нулевой коэффициент мощности.) Более длительные миллисекундные импульсы создают волны тока и напряжения, которые находятся в фазе и, следовательно, гораздо более эффективны. Тестовые клетки подвергались пульсации всеми возможными способами в течение нескольких недель подряд. Повторяем, они не стали достаточно десульфатированными.

Ячейка свинцово-кислотной батареи в некоторых отношениях похожа на гальваническую ячейку. К счастью, растворимость свинца в серной кислоте настолько низка, что, когда свинцово-кислотный элемент подключается к источнику питания, он заряжается, и количество гальванического покрытия незначительно. Зарядка имеет преимущество перед гальванопокрытием, за исключением случаев, когда ячейка значительно превышает 2,6 вольта, например, когда она заряжается импульсами. Свинцово-кислотный элемент, который заряжается в импульсном режиме, становится более эффективным гальваническим элементом. Если переборщить с пульсацией, металлический свинец переместится с плюсов на минусы, позитивные сетки подвергнуться коррозии, а на негативных пластинах появятся мшистые дендриты. Гальваническое покрытие приводит к тому, что металлические нити постепенно проникают в поры сепараторов от отрицательной пластины к положительной, что приводит к короткому замыканию и преждевременному выходу элемента из строя. (См. Статью — Свинцово-кислотное и внутреннее гальваническое покрытие, фильм № 4). Импульсный режим повышает температуру батареи. Мощность, теряемая из-за внутреннего сопротивления батареи, возрастает пропорционально квадрату тока: W=I²R, умноженное на рабочий цикл. Импульсы, которые 10%-ON, 90%-OFF увеличивает потери тепла в десять раз.

Мы не утверждаем, что пульсация вообще не работает. Средняя энергия импульсов импульсного устройства с электрическим питанием определенно может зарядить аккумулятор. Содержание энергии в импульсах индуктивного и емкостного разряда автоматически подстраивается под напряжение и силу тока батареи, и эта часть является хорошей идеей. Импульсный режим очень хорошо работает на батареях, которые «устали» и приобрели относительно мягкую форму сульфатации, рассеянной по их пластинам, и работает на батареях «разомкнутой цепи». Это определенно не работает на сильно сульфатированных аккумуляторах. Мы подвергли шесть аккумуляторов для гольф-мобилей, которые в последний раз использовались три года назад, десульфатации с использованием большого импульсного десульфатора промышленного класса. Напряжение всех шести было ниже 2 вольт. Все шесть остались сульфатированными.

Сульфатация представляет собой проблему, но незначительную, затрагивающую в основном аккумуляторы автомобильного типа. Предприниматели, стремящиеся получить прибыль от продажи продуктов десульфатации, уже давно пропагандируют это как универсальную проблему, связанную со свинцово-кислотными продуктами. Это привлекает многих новичков, которые изо всех сил пытаются попасть в то, что они считают очень легкой сферой бизнеса, но обнаруживают, что зарабатывать деньги практически невозможно.

Если Том хочет продать комплект для десульфатации, а Дик готов заплатить запрашиваемую цену, это свободное предпринимательство  на работе и никто не имеет права стоять на пути сделки . Если Гарри считает, что наборы для десульфатации не работают, и говорит об этом, не называя продавцов и покупателей, это свобода слова .

• Понимание аккумуляторным сообществом того, как работают свинцово-кислотные аккумуляторы, основано на многолетнем опыте, научных исследованиях, обширных испытаниях, достоверных данных и фактах —
• , но то, что сообщество аккумуляторов знает о свинцово-кислотных батареях, когда они используются пользователем, основано на воспоминаниях, интерпретациях, мнениях, анекдотах и ​​убеждениях.

Если, как утверждается, десульфатация удаляет слой белого сульфата, который образуется на пластинах аккумулятора, то почему производители продуктов для десульфатации не предоставили надлежащих доказательств, которые легко понять и которым можно верить — одноразовый, непрерывный замедленная съемка, показывающая полностью сульфатированную батарею в прозрачном корпусе , проходящую десульфатацию и показывающую восстановление емкости?

Проблема с исследованиями, проводимыми университетами от имени корпораций, заключается в том, что они могут адаптировать свои протоколы оценки таким образом, чтобы предоставлять информацию, которая может подтверждать или опровергать утверждения, сделанные в отношении коммерческих продуктов. Остерегайтесь отзывов клиентов. Попробуйте взглянуть на ситуацию с точки зрения автора отзывов. Создается впечатление, что автор берет на себя ответственность за скрытые дефекты продукта производителя. Кто пойдет на такой риск?

Сульфатация — это термин, который вошел в обиход на заре появления свинцово-кислотных аккумуляторов. Значение этого слова расширилось и теперь подразумевает право включать и оправдывать все мыслимые причины возможного ухудшения характеристик и выхода из строя свинцово-кислотных аккумуляторов. Однако……….

• Свинцово-кислотные аккумуляторы, за которыми осуществляется наилучший технический уход, регулярно доводятся до полного заряда, последовательно служат дольше всего — в конечном итоге изнашиваются в результате последствий положительной коррозии сетки.
• Свинцово-кислотные аккумуляторы, которые по целому ряду различных причин постоянно недозаряжены, не доводятся регулярно до полной зарядки — преждевременно выходят из строя в результате воздействия сульфатации.

Связанная статья: Демистификация средств защиты от сульфатации

Связанная статья: Почему важно понимать коррозию

Если вы планируете организовать такой бизнес, которым можно управлять из дома, всегда помните, что ваши прямые конкуренты будут делать то же самое . Неважно, насколько вы хороши, насколько вы лучше, в наше время, когда безработица стимулирует новые предприятия, такая конкуренция неизбежно ведет к снижению цен и уничтожению прибыли.

В начале 1980-х в мире насчитывалось 6,5 миллионов врачей, и все они были убеждены, что язва желудка вызывается стрессом. Два неизвестных врача, Барри Маршалл и Робин Уоррен из Перта, Австралия, обнаружили, что язва желудка вызывается бактерией под названием Helicobacter pylori . Больше никаких серьезных операций и пожизненной инвалидности. Курс антибиотиков решит проблему. Простой. Они игнорировались медиками в течение 10 лет. В конце концов было признано, что они были правы, и что 6,5 миллионов врачей все это время ошибались. Они оба получили Нобелевскую премию по медицине в 2005 году за свое открытие.

Это был не первый раз, когда все врачи в мире ошибались, и был один, кто возражал против распространенного заблуждения и был прав. Потребовались века и бесчисленное количество ненужных смертей, прежде чем врачи признали, что микробы вызывают болезни. Сегодня это звучит безумно, но это совершенно верно. Мораль этой истории такова: если кто-то скажет вам, что давнее убеждение ошибочно, и очень подробно объяснит, почему оно ошибочно, а вы проигнорируете совет, потому что хотите верить, что большинство всегда право, вы делаете ту же ошибку.

Спасибо, что прочитали эту страницу.

СПРАВКА:

Исследования, проведенные группой выдающихся ученых Л.Т. Ламом, Х. Озгуном, О.В. Линем, Дж.А. Гамильтоном, Л.Х. Ву, Д.Г. В свинцово-кислотных батареях непроводящий барьерный слой оксида свинца постепенно разрушается, образуя расширяющиеся островки проводимости с применением пульсации. «Зарядка свинцово-кислотных аккумуляторов импульсным током -», Journal of Power Sources 53 (1995), стр. 226-227. [Если вы серьезно интересуетесь импульсной технологией, мы рекомендуем вам погуглить название должности и имя первого ученого в списке как одно предложение, чтобы получить отчет в формате PDF. (Ссылка на этот доклад — www. vershv.narod.ru/sdarticle.pdf).

🛠️🔋 Десульфатация автомобильного аккумулятора

Десульфатация аккумулятора часто считается чистой магией, в которую либо веришь, либо нет. Причина такого отношения проста. Практически везде, где есть информация об этом методе реанимации автомобильного аккумулятора, шансы на успех не упоминаются. Многие пробуют и, не получив положительного результата, уходят в интернет, чреватым негативом. Там рождаются мифы, из-за которых естественно возникает недоверие к этой процедуре. А ведь десульфатация — это простая химия, которая при определенных условиях действительно помогает сэкономить.

Сульфатация пластин АКБ

Да простят автора Авто без СТО кандидаты хим. наук, но формул со сложной терминологией не будет. Феномен сульфатации свинцово-кислотных аккумуляторов можно легко объяснить с точки зрения человека. А это нужно для того, чтобы понять, как работает обратный процесс. Я имею в виду десульфатацию, ради которой вы пришли сюда.

Что такое батарея? Это пластиковый контейнер, разделенный на отсеки (баночки). В каждом таком отсеке размещены свинцовые пластины. Также вне зависимости от технологии есть электролит из воды и кислоты. Для того чтобы аккумулятор работал — заряжался и отдавал накопленную энергию, электролит должен контактировать со свинцом. Ключевым моментом здесь является контактная площадка.

От него зависят следующие показатели батареи:

1. Номинальная емкость (А*ч) — чем больше площадь взаимодействия пластин с электролитом, тем больше энергии может накопить батарея.
2. Максимальный пусковой ток (А) — тем выше, чем больше свинец контактирует с кислотой.
3. Падение напряжения на нагрузке (В) — с увеличением площади контакта аккумулятор увереннее держит нагрузку.

Сульфатирование — образование сульфата свинца на пластинах при разрядке аккумулятора. В результате на них появляется светло-серый налет. Если разряженную батарею сразу же зарядить, этот сульфат исчезает. Дальше все повторяется по циклу на протяжении всего срока службы батареи, и это норма.

Проблемы начинаются при длительном простое аккумулятора в разряженном состоянии. Сульфат, образовавшийся на пластинах, затвердевает до такой степени, что уже не может раствориться при последующей зарядке. Соответственно, если косяк повторяется, к старому налету добавляется новый. В итоге получаем аккумулятор, пластины которого закрыты от электролита.

Площадь контакта свинца и кислоты уменьшается. В результате пропадает емкость, уменьшается максимальный пусковой ток, а падения напряжения под нагрузкой стремятся к нулю вольт.

Принципы десульфатации аккумулятора

Десульфатация аккумулятора — это процесс, принципиально противоположный описанному выше сульфатированию. Когда аккумулятор эксплуатируется правильно — своевременно подзаряжается — то это происходит само собой, без всяких ухищрений и танцев с бубном. Однако в реальной жизни, к сожалению, многие автовладельцы обделяют своим вниманием аккумулятор, в результате чего большую часть жизни он катается под капотом в недозаряженном состоянии.

Задача, которую решает десульфатация, предельно проста. Он заключается в том, что необходимо как-то принудительно удалить вредный сульфат, из-за которого уменьшается площадь контакта с электролитом. Теоретически эту проблему можно решить несколькими способами. На практике не все работает. Но для более глубокого понимания темы давайте зацепим все основные методы десульфатации.

Одним из наиболее очевидных способов удаления сульфата со свинцовых пластин автомобильного аккумулятора является механическая очистка. Его принцип аналогичен очистке металла от следов коррозии. В Сети можно найти массу инструкций, которые по-серьезному щи подробно и понятно описывают этот процесс. Более того, авторы таких материалов обязуются гарантировать, что этот метод очень эффективен, и обязательно вернет к жизни сдохший от сульфатов аккумулятор. На самом деле механическая десульфатация — это нонсенс. Хотя бы потому, что для того, чтобы получить доступ к пластинам для их очистки, придется варварски распиливать корпус принципиально неразборной батареи.

Еще один метод десульфатации, которым не стесняются делиться блогеры ради просмотров и лайков, чисто химический. Заключается он в том, что надо заправить убогий аккумулятор какой-нибудь ядреной химией, которая в силу своей агрессивности способна растворять сульфат. Что не советуют лить — от банальной газировки до препаратов типа Трилон-Б. Абсолютно ни один адекватный автолюбитель, конечно, не осмелился бы так жестко использовать химию. И Авто без СТО тоже настоятельно советует не чудить.

Из адекватных технологий десульфатации можно выделить только один метод, для реализации которого ничего не нужно пилить, сверлить и заливать в банки. Он заключается в том, что сульфаты разрушаются в процессе естественной зарядки аккумулятора, но выполняемой особым образом. Как именно это делается, описано ниже.

Шансы на успешную десульфатацию

Но сначала стоит немного рассмотреть вопрос, на который почему-то обычно вообще не обращают внимания. Между тем всегда полезно задать этот вопрос перед десульфатацией аккумулятора. Возможно, правильный ответ на него поможет вам сэкономить массу времени, нервов, здоровья и денег. Суть в том, поможет ли десульфатация вашей батареи?

Оценить шансы на успех этой процедуры достаточно просто. Десульфатацию стоит делать, если :

1. Аккумулятор не «старше» 5 лет (со дня выпуска, не покупки).
2. Электролит прозрачный, не имеет коричневого оттенка.
3. Ваш аккумулятор исправен, и вы проверяли уровень электролита не реже двух раз в год.
4. Аккумулятор не простаивал в разряженном состоянии более 3-х месяцев.
5. В аккумуляторе точно нет закороченных банок.

Во всех остальных случаях не верьте ни в какие чудодейственные методы и «особые» воспоминания, о которых также речь ниже. Ничто не поможет вашей батарее. Вы просто тратите свое время и деньги.

О ЗУ с функцией десульфатации аккумулятора

В наше время бурного развития электроники никого не удивишь зарядным устройством с функцией десульфатации. Хотя и сейчас нетрудно найти автомобилистов, отзывающихся о подобных устройствах со скепсисом. На самом деле такие ЗУ есть, и они не только стоят дороже обычных, но и реально справляются с сульфатами на пластинах аккумуляторов. Но не всегда. Как и везде, чудес в этом деле тоже не бывает, и шансы на успешное восстановление аккумулятора зависят не только от зарядного устройства.

Кратко рассмотрим, чем реально отличаются ЗУ с подобной функцией от обычных моделей.

Важное уточнение! Ниже перечислены отличия, большая часть которых присутствует только в тех моделях, которые имеют функцию десульфатации не только в виде надписи на корпусе, но и в начинке. К сожалению, рынок буквально переполнен зарядными устройствами, на которых красуется надпись «десульфатация», однако после вскрытия оказывается, что внутри обычная пустышка.

Первое, что отличает зарядные устройства с функцией десульфатации, это продуманная схема стабилизации и ограничения зарядных характеристик — напряжения и тока. Это крайне важное условие успешного восстановления аккумулятора, так как в основе рассматриваемой технологии восстановления аккумулятора лежат специальные настройки и точная дозировка заданных параметров.

Второе отличие в том, что зарядное устройство не только заряжает, но и «умеет» разряжать аккумулятор. Причем прямо в процессе десульфатации. Существует множество способов реализации такой функции, начиная с простейших реле и заканчивая программой, зашитой в микропроцессор.

Третий , чем отличаются ЗУ с функцией десульфатации — заряд осуществляется так называемым пульсирующим током. Если объяснять на пальцах, то это режим, когда ток в аккумулятор загоняют не постоянно, а периодически, малыми дозами. Это позволяет избежать быстрой подзарядки аккумулятора и добиться лучшего «сбивания» сульфатов.

Четвертое отличие , которым могут похвастаться далеко не все модели, это наличие функции оценки реальной емкости аккумулятора. На сайте Авто без СТО об этом неоднократно упоминается в других материалах об автомобильных аккумуляторах. Суть в том, что емкость б/у аккумулятора всегда меньше, чем указано на корпусе. Соответственно и ток заряда нужен меньше. В противном случае батарея будет заряжаться очень быстро, но как бы поверхностно. Это значит, что о качественной десульфатации не может быть и речи.

Именно из-за этих отличий зарядные устройства с функцией десульфатации заметно дороже обычных. Часто даже дороже, чем новый аккумулятор. Стоит ли это покупать? Если у вас в хозяйстве всего одна-две батареи, то ждать, пока окупится такая память, придется очень долго. Кроме того, при большом желании и знании теории, изложенной ниже, можно восстановить аккумулятор простейшим зарядным устройством. Естественно, если ваша батарея проходит вышеописанный пятибалльный тест. Если аккумуляторов, которые нужно обслуживать, много, или вы делаете это для людей за деньги, то покупка «умного» мощного зарядного устройства для вас просто необходима.

Десульфатация аккумулятора с помощью простого зарядного устройства

Если все же вы решили приобрести зарядное устройство с функцией десульфатации, то вам не нужно разбираться в сути этой процедуры. Устройство, соответствующее заявленному описанию, все сделает само. Однако можно попробовать восстановить аккумулятор с помощью обычной зарядки. Это вполне возможно, хотя и требует определенных знаний и большого количества времени. Если вы хотите попробовать, вот проверенное руководство.

Для начала следует уточнить, какое зарядное устройство подходит для десульфатации, так как это сможет сделать не каждый. Все, что вам нужно, это возможность контролировать и регулировать параметры зарядки. А именно напряжение и ток. Для контроля достаточно обычного мультиметра (лучше два, чтобы контролировать и напряжение, и ток одновременно). Но для регулировки должна быть предусмотрена установка напряжения.

Алгоритм десульфатации следующий:

1. Определить фактическую емкость аккумулятора . Это можно сделать с помощью обычной лампы автомобильной фары – полностью зарядить аккумулятор в обычном режиме, а затем разрядить лампу до тех пор, пока напряжение на клеммах не упадет до 10,5 В. Средний ток, потребляемый лампой, рассчитывается путем деления мощности на Напряжение. Далее, зная силу тока и время, рассчитать емкость (пример для наглядности ниже).
2. Ограничение зарядного тока . Оптимальный ток как для обычной зарядки аккумулятора, так и для десульфатации составляет 10% от емкости. Не выше.
3. Предельное напряжение . Оно не должно превышать 14,4 В на протяжении всей процедуры. На первом этапе, когда батарея полностью разряжена, напряжение при вышеуказанном токе будет в районе 12,7-13,0 В. Далее, по мере заряда, оно будет повышаться.
4. Зарядить аккумулятор. Но не до конца, как в обычном режиме, а на 30-60 минут.
5. Немного разрядите аккумулятор. Можно использовать ту же лампочку. Отсоедините аккумулятор от зарядного устройства и зарядите его лампой на 5-10 минут.
6. Повторяйте шаги 4 и 5 до полной зарядки. То есть заряжать аккумулятор, периодически разряжая его. Продолжайте до полной зарядки аккумулятора в этом режиме. О полном заряде можно судить по току, который упал до 0,1 А при напряжении 14,4 В.
7. При необходимости повторить. Как правило, если аккумулятор не сильно сульфатирован, для его восстановления достаточно одного такого цикла. Если батарея сильно убита, то желательно повторить процедуру 2-3 раза. Но не более.

Во время ручной десульфатации избегайте:

• перегрева батареи;
• «кипящий»;
• ток выше 10% емкости;
• напряжения выше 14,4 В.

По завершению десульфатации, ради интереса, можно повторно замерить емкость аккумулятора. Если она увеличилась, то вы не зря парились. После очередного разряда можно зарядить аккумулятор в обычном режиме, либо пройти тренировочный цикл по вышеописанному алгоритму еще раз.

Пример емкости . Допустим, у вас есть аккумулятор с заявленной на корпусе емкостью 70 Ач, и лампочка в фаре на 50 Вт. Среднее напряжение разряда можно принять равным 11 В, так как оно будет постепенно уменьшаться с 12,7 В до 10,5 В. В этом случае средний ток разряда будет 50:11 = 4,5 А. Допустим, ваш аккумулятор был разряжен таким лампочка до 10,5 В 12 часов. Умножаем ток на время, то есть 4,5*12, и получаем реальную приблизительную емкость — 54 А*ч. Соответственно такая батарея должна как заряжаться, так и тренироваться током не более 5,4 А (10% от емкости).

Результаты

Десульфатация автомобильного аккумулятора — это не волшебство и не миф. Это вполне реальный метод восстановления, который можно реализовать двумя способами. Первый — купить специальную память с соответствующим режимом и довериться электронике. Второй – провести процедуру в ручном режиме по описанному выше алгоритму. Конечно, не забывайте оценивать свои шансы на успех, чтобы не тратить время зря. Напишите в комментариях под статьей, что вы думаете о десульфатации автомобильного аккумулятора, поделитесь своими успехами и неудачами по этому поводу.

ВИДЕО: десульфатация аккумулятора (2 части)

ОБЗОР ДЕСУЛЬФАЦИИ СВИНЦОВО-КИСЛОТНОЙ АККУМУЛЯТОРНОЙ БАТАРЕИ ДЛЯ HEV

• Идентификатор корпуса: 212476662

 @inproceedings{Singh3015REVIEWOD,
  title={ОБЗОР ДЕСУЛЬФАЦИИ СВИНЦОВО-КИСЛОТНЫХ АККУМУЛЯТОРОВ ДЛЯ ГЭМ},
  автор = {Анупама Сингх и доктор П. Б. Карандикар},
  год = {2015}
} 

• Анупама Сингх, доктор П. Б. Карандикар
• Опубликовано в 2015 г.
• Инженерное дело

В современном мире электромобили с гибридным приводом (EHV) представляют собой преобладающую технологию транспортных средств, в которой основной частью является электрическая батарея. Свинцово-кислотная батарея является широко используемой батареей в EHV из-за ее стоимости и эффективности. Настоящим недостатком свинцово-кислотных аккумуляторов является то, что они легко сульфатируются из-за неправильной зарядки или разрядки. Следовательно, схема десульфатации или контроллер заряда размещается вместе с перезаряжаемой свинцово-кислотной батареей для надлежащей зарядки, и впоследствии сульфатация снижается…

Десульфатация свинцово-кислотных аккумуляторов высокочастотным импульсом

• W. Jamratnaw

• Машиностроение

  2017 14-я Международная конференция по электротехнике/электронике, компьютерам, телекоммуникациям и информационным технологиям (ECTI-CON)

• 2 3017290
• 0
• 0

После того, как свинцово-кислотная батарея была заряжена высокочастотными импульсами, внутреннее сопротивление батареи стало ниже, а напряжение полностью заряженной батареи и ток холодного пуска были выше, что привело к повышению производительности батареи.

Повторное использование наследия для модернизации микросетей — доступное решение для тестирования и восстановления перепрофилированных свинцово-кислотных аккумуляторов

В этом документе предлагается быстрая, недорогая и массовая процедура тестирования для определения характеристик свинцово-кислотных аккумуляторов, измерения емкости и восстановления без какой-либо их известной истории или таблицы с использованием процесса глубокого циклирования.

Новый пирометаллургический метод переработки свинцовой аккумуляторной пасты без образования SO2: термодинамическое и экспериментальное исследование

• Yun Li, Yongming Chen, A. Jokilaakso

• Материаловедение, машиностроение

• 2018

Представлен инновационный процесс переработки свинца из отходов пасты для свинцово-кислотных аккумуляторов. Новшеством в этом процессе является предотвращение образования и выбросов SO2 за счет использования метода восстановительной фиксации серы.…

Новый процесс переработки пасты для свинцово-кислотных аккумуляторов без образования SO2 — механизм реакции и промышленная пилотная кампания

• Yun Li, Shenghai Yang, A. Jokilaakso

• Материаловедение, машиностроение

  Журнал чистого производства

• 2019

Система восстановления свинцово-кислотных аккумуляторных батарей с использованием двухпозиционного заряда постоянного тока и коротких-больших импульсов разряда

• I. Mizumoto, Y. Yoshii, K. Yamamoto, H. Oguma

• Engineering, Environmental Science

  Electronics Letters

• 2018

Мы сообщаем о методе восстановления разложившихся свинцово-кислотных батарей – выключенный метод заряда постоянным током и короткий–большой импульсный разряд. Когда увеличение внутреннего импеданса находится в пределах ∼20% от…

, показывающий 1-10 из 66 ссылок

Сорт Byrelevancemost, повлиявший на работу,

Идентификация и восстановление сульфатирования в батареях свинцовой кислоты с использованием клеточного напряжения и зондирования давления

• Ying Shi, Christopher A. Ferone, C. rahn
• Ying Shi, Christopher A. Ferone, C. rahn
• 9
• Ying Shi, Christopher A. Ferone, C. Rahn
• Ying Shi, Christopher A. Ferone. Инженерное дело

• 2013

Восстановление емкости сульфатированного свинцово-кислотного аккумулятора с использованием управления зарядкой с обратной связью по давлению

• Ин Ши, Кристофер А. Фероне, К. Ран

• Инженерия, наука об окружающей среде

• 2012

Свинцово-кислотные аккумуляторы с клапанным регулированием (VRLA) могут разлагаться из-за различных механизмов, включая коррозию, жесткую сульфатацию, потерю воды, осыпание и активное разложение массы. Жесткое сульфатирование может быть…

Характеристики заряда и разряда свинцово-кислотного аккумулятора и аккумулятора LiFePO4

В данной статье предложены характеристики заряда и разряда свинцово-кислотного аккумулятора и аккумулятора LiFePO4. Цель этой статьи состоит в том, чтобы предложить зарядное устройство импульсного тока с более высоким пиковым значением…

Стратегия контроля аккумуляторной батареи маховика для электромобилей

Электромобили (EV) являются идеальным транспортным средством для уменьшения загрязнения воздуха и выбросов углекислого газа. Однако современные источники энергии не подходят для электромобилей по плотности энергии,…

Усовершенствованная динамическая модель свинцово-кислотных аккумуляторов с использованием данных производителей

Моделирование и моделирование свинцово-кислотных аккумуляторов имеет первостепенное значение для транспортных систем, таких как гибрид электромобили, тележки для гольфа, электрические скутеры и инвалидные коляски; и для батареи…

Использование свинцово-кислотных аккумуляторов при разработке систем возобновляемой энергии в Китае

• Ю Чанг, Сяньсянь Мао, Яньфан Чжао, С. Фэн, Хонгю Чен, Д. Финлоу

• Инженерия, наука об окружающей среде

• 2009

Вспомогательная система питания на основе ультраконденсаторов для электромобиля: реализация и оценка

Результаты показали значительное снижение затрат при включении конфигураций AES по сравнению с системой, работающей только на топливных элементах, и снижение затрат было выше при использовании ультраконденсаторов. для этой цели.

Расчет нечеткой оценки SOC для герметичных свинцово-кислотных аккумуляторов электромобилей в Reflex TM

В этом документе предлагается нечеткая оценка состояния заряда (SOC) для зарядки аккумуляторов ReflexTM, которая обеспечивает быструю и эффективную зарядку герметичных свинцово-кислотных аккумуляторов. аккумуляторы, используемые в электромобилях. The…

Сравнение стратегий бортовой зарядки для гибридных автомобилей с увеличенным запасом хода со свинцово-кислотными батареями

• N.