Ремонт ВАЗ Ваз ОКА : Ремонт карбюратора
- Руководства по ремонту
- ВАЗ «ОКА» 1111 1988-2008
- Ремонт карбюратора
Необходимость полной разборки карбюратора возникает в случаях, когда промывка и регулировка с частичной разборкой не приводят к восстановлению его работоспособности.
Карбюраторы моделей 1111 и 11113 имеют одинаковую конструкцию. Они различаются только некоторыми тарировочными данными (табл. 2.3). Карбюратор мод. 11113 имеет маркировку главного топливного жиклера второй камеры 102,5 (вместо 95 у мод. 1111), диаметр главного воздушного жиклера 1,70 мм (вместо 1,80) и маркировку топливного жиклера системы холостого хода 42 (вместо 41).
ПРИМЕЧАНИЕ Следует учитывать, что на заводе-изготовителе начальные регулировки каждого карбюратора подбирают индивидуально, так как низка точность изготовления. Поэтому у карбюраторов обеих моделей могут оказаться одинаковые топливные жиклеры системы холостого хода — обращайте внимание на маркировку этого жиклера в карбюраторе вашего автомобиля. |
Вам потребуются: ключи «на 7», «на 8», «на 11» и «на 13», набор сверл Ж1,1–1,5 мм, медная проволока Ж0,2–0,25 мм, отвертки, пассатижи с длинными тонкими губками.
1. Снимите карбюратор с автомобиля (см. «Снятие и установка карбюратора»). |
2. Выверните четыре винта крепления крышки пускового устройства. | 3. Снимите крышку вместе с пружиной. |
4. Осторожно выньте диафрагму пускового устройства со штоком. | 5. Выверните четыре винта крепления крышки ускорительного насоса. |
6. Снимите крышку с рычагом привода и диафрагмой ускорительного насоса. | 6. Выньте пружину. |
7. Выньте пластмассовую заглушку из корпуса регулировочного винта (если ее не вынимали ранее, при регулировке холостого хода). | 8. Выверните регулировочный винт и выньте его из корпуса. |
9. Замените порванное или потерявшее упругость уплотнительное кольцо регулировочного винта. | 10. Выверните два винта крепления корпуса регулировочного винта. |
11. Снимите корпус и уплотнительную прокладку. Порванную или сильно обжатую прокладку замените. | 12. Выверните пять винтов крепления крышки карбюратора и аккуратно снимите крышку карбюратора, стараясь не повредить уплотнительную прокладку. |
13. Снимите прокладку крышки. Порванную или сильно обжатую прокладку замените. | 14. Выверните из крышки топливный клапан. |
15. Осмотрите уплотнительное медное кольцо клапана. Сильно обжатое кольцо замените. | 16. При необходимости выверните ось рычага управления воздушной заслонкой. |
17. Снимите рычаг управления воздушной заслонкой, шарик фиксации рычага и пружину. Делайте это осторожно: подпружиненный шарик может потеряться. Сломанную пружину замените. |
18. Осторожно поддев отверткой… | 19. …выньте корпус распылителей ускорительного насоса. |
20. Замените порванное или потерявшее упругость уплотнительное кольцо. | 21. При необходимости, поддев двумя отвертками, выньте распылитель 1 из первой камеры и распылитель 2 из второй камеры. |
ПРИМЕЧАНИЕ Обратите внимание: распылитель 1 первой камеры в отличие от распылителя 2 второй камеры имеет поперечный штифт, а в торцы ножек распылителей вставлены пружинные фиксаторы. Не потеряйте их. |
22. Поддев отверткой, снимите фиксатор оси поплавка. | 23. Выньте поплавок вместе с осью из корпуса карбюратора. |
24. Выньте ось поплавка из кронштейна. |
25. Выверните главные воздушные жиклеры из корпуса карбюратора. Обратите внимание: жиклеры имеют разную маркировку. Не перепутайте их местами. | 26. Выньте жиклеры с эмульсионными трубками из корпуса. |
27. Выверните электромагнитный клапан, если он не был вывернут при снятии карбюратора. | 28. Выньте из клапана топливный жиклер холостого хода. |
29. Поддев отверткой, снимите стопорную пластину пробок главных топливных жиклеров. | 30. Выверните пробки. |
ПРИМЕЧАНИЕ Обратите внимание: под пробками установлены медные уплотнительные шайбы. Сильно обжатые шайбы замените. |
31. Выверните главные топливные жиклеры из корпуса карбюратора. |
ПРИМЕЧАНИЕ Обратите внимание на маркировку жиклеров. У карбюраторов мод. 11113 она разная. Не перепутайте жиклеры. |
32. Выверните держатель топливного жиклера переходной системы второй камеры. | 33. Выньте из держателя топливный жиклер переходной системы второй камеры. |
34. Снимите возвратную пружину промежуточного рычага дроссельной заслонки второй камеры. | 35. Выверните два винта крепления корпуса дроссельных заслонок к корпусу карбюратора. |
36. Разъедините корпуса карбюратора и дроссельных заслонок и снимите теплоизоляционную прокладку. | 37. Диафрагма ускорительного насоса не должна иметь надрывов и расслоений. Толкатель 1 опорной чашки диафрагмы должен перемещаться без заеданий в корпусе чашки 2 и четко возвращаться демпфирующей пружиной в исходное положение. Демпфирующая пружина толкателя не должна иметь остаточной деформации и должна быть значительно более жесткой, чем возвратная пружина диафрагмы, иначе резко снизится подача насоса. Для сравнения жесткости пружин сожмите между указательным и большим пальцами центральную чашку диафрагмы с приложенной к ней в рабочем положении возвратной пружиной. Если соотношение упругости пружин оптимально, сначала должна сжаться до соприкосновения витков возвратная пружина и только после этого должен начать перемещаться в чашке толкатель диафрагмы. При ослаблении демпфирующей пружины замените диафрагму в сборе, так как она неразборная. |
38. Диафрагма пускового устройства не должна иметь надрывов и расслоений. Шток должен быть надежно закреплен в чашке диафрагмы, а картонная уплотнительная прокладка не должна быть надорвана или сильно обжата. |
ПОЛЕЗНЫЕ СОВЕТЫ Рекомендуем при каждой разборке карбюратора для повышения надежности ускорительного насоса и пускового устройства заменять диафрагмы новыми, так как деформированная работавшая диафрагма при повторной установке займет другое положение и будет иметь заведомо сниженный ресурс. |
39. Проверьте топливный клапан. Его игла должна легко перемещаться в седле и не должна иметь большого радиального люфта. Шарик иглы должен легко перемещаться в ее гнезде и четко возвращаться демпфирующей пружиной в исходное положение. | 40. Осмотрите регулировочный винт и его уплотнительное кольцо. Конусный хвостовик винта и резьба не должны иметь повреждений. Уплотнительное кольцо не должно быть надорвано или сильно обжато. |
41. Установите топливный жиклер холостого хода на электромагнитный клапан. Проверьте электромагнитный клапан, подключив его по приведенной схеме. При подаче напряжения его сердечник должен с щелчком втягиваться в обмотку, а при отключении — полностью возвращаться в исходное положение. | 42. Резиновое уплотнительное кольцо электромагнитного клапана не должно быть надорвано или сильно обжато. |
43. Обратите внимание на маркировку топливного жиклера холостого хода и при замене устанавливайте такой же новый жиклер. Стенки корпуса жиклера не должны быть деформированы от чрезмерной затяжки. | 44. При необходимости прочистите жиклер тонкой медной проволокой или леской. |
45. Проверьте блок распылителей ускорительного насоса. При потряхивании в руке шарик обратного клапана, расположенный внутри корпуса блока, должен с щелчками перемещаться. | 46. При необходимости прочистите отверстия распылителей тонкой медной проволокой. |
47. Обратите внимание на маркировку блока распылителей и при замене новым устанавливайте такой же. | 48. Осмотрите поплавок и детали его крепления. Если поплавок негерметичен или поврежден его кронштейн, замените поплавок новым, проверив его массу, которая должна быть не более 8,01 г. Окисленную ось поплавка зачистите мелкой наждачной шкуркой. Сильно деформированный фиксатор оси замените. Поверхность язычка кронштейна поплавка не должна иметь забоин и глубокой выработки в месте его контакта с демпфирующим шариком. При необходимости выработку можно устранить шлифовкой язычка нулевой наждачной бумагой. |
49. Замените надорванную или сильно обжатую прокладку крышки карбюратора. |
ПРИМЕЧАНИЕ Форма отпечатков на уплотнительных прокладках служит критерием правильности геометрических размеров уплотняемых поверхностей. При их искажении отпечатки на прокладках будут прерывистыми. |
50. Стенки и отверстия топливного жиклера 1 переходной системы не должны быть деформированы чрезмерной затяжкой. Резьба и шлиц держателя 2 не должны быть повреждены. Обратите внимание на маркировку жиклера и при необходимости заменяйте его таким же. | 51. Прочистите жиклер тонкой медной проволокой или леской. |
52. Осмотрите привалочные поверхности корпуса карбюратора… | 53…корпуса дроссельных заслонок и… |
54. …фланца блока регулировочного винта холостого хода. Они не должны иметь сколов и забоин. |
55. Проверьте привалочные поверхности на коробление от чрезмерной затяжки крепежными деталями. Для этого приложите к поверхности в нескольких направлениях хвостовик штангенциркуля или металлическую линейку. Зазор между поверхностью и линейкой должен быть не более 0,02 мм. При необходимости отрихтуйте поверхность легкими ударами молотка через оправку из мягкого металла и притрите мелкозернистой наждачной шкуркой. Если притирка сделана качественно, на всей уплотняющей поверхности образуется сплошной след без пропусков. |
56. Прочистите тонкой медной проволокой или леской демпфирующий жиклер канала подвода разрежения к диафрагменному механизму пускового устройства в крышке карбюратора… | 57. …отверстие переходной втулки этого канала… |
58. …жиклер топливозаборной трубки инерционного экономайзера… | 59. …жиклер топливозаборной трубки эконостата… |
60. …воздушный жиклер переходной системы второй камеры в корпусе карбюратора и… | 61. …выходное отверстие переходной системы второй камеры в корпусе дроссельных заслонок. |
62. Соберите карбюратор в порядке, обратном разборке с учетом нижеизложенных требований. |
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ Чтобы не повредить жиклеры и не нарушить их калибровку при установке в резьбовые отверстия корпуса карбюратора, не прикладывайте чрезмерных усилий при затягивании и пользуйтесь только совершенно исправными, точно подобранными по размеру отвертками. |
63. Винты крепления крышки карбюратора, а также крышек пускового устройства и ускорительного насоса затягивайте плотно, но без чрезмерных усилий. Не заменяйте штатные пружинные стопорные шайбы («гроверы») более жесткими, повреждающими мягкие поверхности корпусных деталей карбюратора. | 64. При сборке пускового устройства и ускорительного насоса установите их крышки, не затягивая винты крепления. Полностью крест-накрест затяните винты, предварительно утопив отверткой до упора шток диафрагмы пускового устройства… |
65. …и отведя до упора рычаг привода ускорительного насоса. |
66. Перед установкой оси рычага управления воздушной заслонкой для предотвращения самоотворачивания смажьте ее торец и 1–1,5 крайние нити резьбы клеем-герметиком УГ9, составом Loktite 243 или аналогичным. |
67. Если вы используете при сборке поплавок из ремонтного комплекта, обязательно проверьте его массу. Она должна быть не более 8,01 г. |
68. Прокладки и диафрагмы устанавливайте только «всухую», без применения каких-либо герметизирующих составов. Герметик неизбежно попадет в каналы карбюратора и выведет его из строя. |
↓ Комментарии ↓
ВАЗ-1111-11113 ОКА
Раздел 1.УСТРОЙСТВО АВТОМОБИЛЯ
Общие сведения об автомобилях
Паспортные данные автомобиля
Раздел 2.ДВИГАТЕЛЬ
Возможные неисправности двигателя, их причины и способы устранения
Полезные советы
Замена охлаждающей жидкости
Замена масла в двигателе и масляного фильтра
Очистка системы вентиляции картера
Установка поршня первого цилиндра в положение ВМТ такта сжатия
Регулировка натяжения ремня привода распределительного вала
Замена натяжного ролика
Замена ремня привода распределительного вала
Снятие, установка и дефектовка маховика
Замена деталей уплотнения двигателя
Головка блока цилиндров
Регулировка зазоров в приводе клапанов
Снятие и установка двигателя
Ремонт двигателя
Система смазки
Система охлаждения
Система выпуска отработавших газов
Система питания
Раздел 3.ТРАНСМИССИЯ
Сцепление
Коробка передач
Приводы передних колес
Раздел 4.ХОДОВАЯ ЧАСТЬ
Передняя подвеска
Задняя подвеска
Раздел 5.РУЛЕВОЕ УПРАВЛЕНИЕ
Осмотр и проверка рулевого управления на автомобиле
Рулевая колонка
Рулевой механизм
Рулевая трапеция
Раздел 6.ТОРМОЗНАЯ СИСТЕМА
Проверка и регулировка тормозной системы
Замена тормозной жидкости
Прокачка гидропривода тормозной системы
Главный тормозной цилиндр
Вакуумный усилитель тормозов
Регулятор давления
Замена шлангов и трубопроводов гидропривода тормозов
Тормозные механизмы передних колес
Тормозные механизмы задних колес
Стояночный тормоз
Раздел 7.ЭЛЕКТРООБОРУДОВАНИЕ
Предохранители и реле
Генератор
Стартер
Система зажигания
Освещение,световая и звуковая сигнализация
Стеклоочистители и омыватели
Вентилятор системы охлаждения двигателя
Комбинация приборов
Выключатели и переключатели
Раздел 8.КУЗОВ
Возможные неисправности кузова, их причины и способы устранения
Замена буферов
Капот
Боковая дверь
Задняя дверь
Зеркала заднего вида
Сиденья
Отопитель
Уход за кузовом
Приложения
Приложение 1. Моменты затяжки резьбовых соединений
Приложение 2. Горюче-смазочные материалы и эксплуатационные жидкости
Приложение 3. Основные данные для регулировок и контроля
Приложение 4. Заправочные объемы, л
Приложение 5. Сальники
Приложение 6. Схема расположения подшипников качения
Приложение 7. Схема электрооборудования автомобиля: 1 — боковой повторитель указателя поворота; 2 — передний указатель поворота; 3 — фара; 4 — электродвигатель вентилятора системы охлаждения; 5 — звуковой сигнал; 6 — датчик включения электродвигателя ве
Замена прокладки клапанной крышки ВАЗ 1111 Ока. Ремонт карбюратора ВАЗ 2
Комментарии к теме Замена прокладки клапанной крышки ВАЗ 1111 Ока
Alvera
Здраствуйте! Я тагже пробовал но он надувается примерно за 2-3 минуты, а когда нажимаю на газ то его втягивает во внутрь это хорошо или плохо? у меня мерс. W220 S400Детройт
Очко у тебя стирается,кольца в основном залегаютИндра Абляева
Здравствуйте.ДВС 2ZZ-GE.Появились звуки при сбросе нагрузки,похожие на лязгание цепи.Скинул крышку ну и немного наглядно поснимал.Как думаете под замену?Kasib
поставил такой же, все работает отлично!Арчи
Это же не 4 g 93 в водите в заблуждение другихПоль
Видос хороший, как раз надо менять на дизеле топливный, тока бы полностью объяснили что как и зачем там) От начала и до концаКамила Брюнчикова
Своими руками делать, всегда лучше чем чужими.Вацлав
Ребят где ваш сервис подскажите меня Меган замучилDeka
ДВС 2sz оборвало шпонку загнуло ли клапана? Шпонку поменял запуск не происходит в целиндрах давления 0.заранее спосибоHeh
добрый вечер! может быть подскажите в чем дело, если не затруднит вас=) у меня двигатель ниссановский сд17 дизель, порвался грм, я решил взять другую гбц притер клапана ну и т д все как положено, головка была перегрета, я ее сровнял на большой точильном кругу(был выгиб не большой) вообщем поставил, завел, пошли пузыри в расширетельный бачок!! решил проверить по другому, открутил свечу накала, подул компресором, пошли пузыри снова и так во всех 4 целиндрах! думаю что трещина в гбц, либо возможно плохо шлифанул, при этом нет антифриза в масле, но не много пахнет через заливную пробку…Ляйсан Трихункова
очень надежный мотор, без ремонтов прошел на нем 600000 км, кроме замены ремней и помпы более в него не лазили а затем авто был продан,при продаже замер компрессии показал 14 очей.Едил
Проехах 15 тис. Все ок.Алисеевич Милл
Haben sie bild fur unterdrukschlauh andre 4 Schlauch Weckseln weil die sind kaput gegangen ich habe 4 m Schlauch gekauf aber weis ich nich welchem schlauch wo mussen wir rein stecken, dafur brauch ich AnleitungЧита
Для смелости, небось малость… для поддержки разговора… того.. газанулАмандык
Замена прокладки клапанной крышки своими руками на Хендай Гетц. Ранее подобную процедуру я делал только на жигулях (ВАЗ 2106) и то когда был сильно молод, да и поменять на жигулях прокладку клапанной крышки значительно проще, поэтому жду ваши надписи о моей рукожопости в комментариях под видео. Приятного просмотра. Кстати, уже прошло два месяца с момента замены прокладки и сейчас в Екатеринбурге сильные морозы 7 а прокладка не бежит, значит я сделал всё правильно. И следовательно это может сделать каждый. Главное делать не торопясь и аккуратно.Ilene
Thanks man, i was starting to panic. I feel more relieved now. Again thanks a million.Написать комментарий
Карбюратор от Оки (ДААЗ 1111) на Урал/Днепр. Настройка Карба. Переходник. | OPPOZIT.RU | мотоциклы Урал, Днепр, BMW
Уважаемые Коллеги, Братья!
Решил написать очередную статейку.
На этот раз пишу статью по карбюратору от Оки на Урал/Днепр (ДААЗ 1111)
Поставил я себе такой карбюратор.
Про изготовление переходника на один карбюратор написано уже давно много чего (так что с этими вопросами – в поиск).
Пишу в данной статье про настройку карбюратора для мотоцикла. Всё постигалось на собственных экспериментах.
Причины установки данного карбюратора:
1) Хотел поставить хороший карбюратор который будет работать нормально на мотоцикле (К63, К68 – мне не нравились, импортные карбы дороги).
2) Должна быть небольшая стоимость карбюратора.
3) Данный карбюратор двухкамерный – отсутствие провалов при резком выкручивании ручки газа.
4) Не нужна синхронизация цилиндров (один карбюратор даёт однородную смесь в оба цилиндра).
5) Освободилось место под ногами – в следствии чего немного изменена посадка.
Выбрал карбюратор от Оки (ДААЗ-1111) с похожим объёмом.
Решил эксперементировать на нём.
Для начала дам ссылку на подробное описание этого карба, штатной его настройке итд итп.
http://karbiuator.ru/karbiurator-daaz-1111
В общем задумал – сделал.
В итоге столкнулся с проблемами в настройке карбюратора.
При стандартных регулировках карбюратор богатит.
Свечи были цвета графита (как грифель карандаша).
Обеднял смесь до самого конца регулировки винта качества – смесь всё равно достаточно богатая и по-прежнему закидывает свечи.
В итоге почитав много форумов решил обеднять смесь путём уменьшением сечения главных топливных жиклёров 1ой и 2ой камер.
По мануалу к данному карбюратору указываются следующая тарировка жиклёров:
Выяснил, что в этих карбюраторах под разный объём 650/750 ставятся разные жиклёры:
Тарировка жиклёров карбюратора на 650
1 камера – главный топливный 92,5 (95), воздушный (трубка) 190 (195)
2 камера – главный топливный 95, воздушный (трубка) 95
Тарировка жиклёров карбюратора на 750
1 камера – главный топливный 92,5 (95), воздушный (трубка) 170
2 камера – главный топливный 95, воздушный (трубка) 85
ДОРАБОТКА КАРБА
Для начала поменял топливные жиклёры.
У меня по штату стояли на первой камере стоял 92,5, на второй камере 95.
Поставил – первая камера 90, вторая камера 92,5 (использовал штатный с первой камеры)
Жиклёры подходят от Вазовских карбов (покупал в ларьке, торгующем вазовскими запчастями, в частности были запчасти для карбов).
В помощь Вам — тарировка вазовских жиклёров
http://autocry.narod.ru/injection/markirovka_zhiklerov.htm
Хоть в данной таблице и нет жиклёра на 90, но мне откуда то откопали такой (нужно только спрашивать).
В ходе поисков информации по карбам натолкнулся на хорошее видео по настройке карбюратора Солекс.
ВИДЕО по настройке тут http://vk.com/video108387681_162080234
Отдельный респект автору видео!!!
Посмотрев видео — я вдохновился и решил правильно настроить и ускорительный насос.
Смысл настройки – настроить носик распылителя таким образом, чтобы струя бензина при небольшом открытии струйка била прямо в образовавшуюся щёлку не задевая за стенки и заслонку чётко по центру.
Подумав хорошенько я не стал заводить оба распылителя ускорительного насоса в одну камеру (чтобы не переливал карб), а купил распылитель от Солекса и внедрил его.
Распылитель по штату стоял — тарировка 35 (первая камера) и 40 (вторая камера), поставил один распылитель на тарировку 45 (от Солекса с одним носиком).
Внедрение данного распылителя потребовало доработки карбюратора «напильником» (в стенке карба пропилил канал под этот распылитель)
В общем вот немого фотографий и схем как всё получилось.
Штатный распылитель.
Внедрённый распылитель (носик подгибал).
ИТОГ ТЮНИНГА:
Свечи не закидывает, цвет нормальный, практически нет нагара. (Цвет красного кирпича, больше похож на розовый)
Работа карбюратора мне больше понравилась после моих настроек, чем в штатной компановке.
Вполне приемлемый расход бензина (по ощущениям, расход пока не замерял).
Отсутствие провалов.
РС: Проверяйте все соединения в переходнике на предмет герметичности, особенно с головками.
Если свечи разного цвета – где-то подсасывает воздух и обедняет смесь цилиндра, где свеча белее.
PPC: Для хорошей настройки карбюратора рекомендую пользоваться свечкой ИКС.
http://www.oldaudi.ru/remont/article3/index.php
ДОПОЛНИТЕЛЬНО
ПЕРЕХОДНИК
Для тех, кому интересно у меня переходник реализован вот так
Делал я его из 2х выпусков от Ижа.
Варил сначала общую трубку с фланцами на горшки. После чего в этой трубке посередине делал пропил и к этому пропилу приваривал коробочку для карбюратора.
Вот собственно как-то так.
ФИЛЬТР
Задавали здесь много вопросов по воздушному фильтру.
В общем у меня фильтр реализован так.
Я брал москвичёвский фильтр (подходит по диаметру для этой кастрюльки) обрезал его болгаркой по 4 сантиметра шириной и приклеивал с двух сторон однослойный картон силиконом.
На карбе сделана площадка, на которую ставится сам фильтр (с силиконом) и закрывается всё это декоративной кастрюлькой.
Всё сделано герметично, пыль нигде не подсасывает.
Скажу сразу – данная система не очень удобна в эксплуатации. Ну по крайней мере не на моей раме.
В планах сварить красивую коробочку и поставить плоские фильтры по обе стороны от карба.
Соответственно закрыв их декоративными хромированными крыжками.
В помощь Вам пара табличек по жиклёрам.
Тарировка Вазовских жиклёров
Оптимальное соотношение топливного жиклёра к воздушному
Надеюсь данная информация будет для Вас полезной.
————————————————————-
ВСЕМ УДАЧИ!!!!! НИ ГВОЗДЯ, НИ ЖЕЗЛА!!!!!
Отзыв владельца автомобиля LADA (ВАЗ) 1111 Ока 2005 года ( ): 0.8 MT (35 л.с.)
Обладаю машинкой ВАЗ 11113 Ока. с 2007 года. Расскажу о выявленных достоинствах и недостатках. Последние 3 года параллельно эксплуатирую BMW e34, вот и могу сравнить, казалось бы, не сравнимое. После эксплуатации обоих машин, преимущества Оки обострились и стали ещё заметнее. Например: можно заправить полный бак на 700-800р, и забыть о бензине вовсе. (у кого жрёт больше 6 в пробках, смотрите карбюратор, зажигание) она легкая, нет ощущения массы бмв аккумулятор стандартный. моторчик маленький. Можно на 10 часов забыть габаритные огни, и останется энергия чтобы завести. а также крутить мотор ключом можно минут 30 :) простота устройства. (при своей простоте, Ока не является устаревшей моделью , пример тому: Бесконтактное зажигание, передний привод, независимая задняя подвеска, удачный двигатель «полвосьмого»). маленький размер. не надо думать о свободном для парковке месте. о ней не надо волноваться, что снимут, например колёса. Руль крутится легче, чем на жигули, девятке, десятке. Самое главное достоинство, которое затмевает недостатки, приятная ДЕШЕВИЗНА. Начиная от малого потребления топлива, объёмов рабочих жидкостей, стоимости деталей и узлов, заканчивая налогами страховками. Активную безопасность машины считаю хорошей. Пассивную безопасность считаю приемлемой. Ока не «капсула смерти». Вопреки заверениям дилетантов, что слабенькое столкновение приводит к летальному исходу. Cтандартный краш тест говорит об обратном. http://www.autoreview.ru/new_site/year2002/n09/crush/2.htm Разгон до 100 = 23 с Разгон до 60 = 5-6с как раз то что нужно в городе. При разгоне до 60 она драгает жигули, малость отстаёт от восьмёрки (идут почти ровно). Длина шлейфа на сухом асфальте с места, составляет 0.8 метра. На трассе скорость поддерживаю 100-110км/ч, ведёт себя уверено. (всё заводское). Любители пожарить покрышки и диск сцепления, наверное не получат полного удовлетворения, мотор нужно будет раскручивать до конца. В занос машинка входит не охотно, что, кстати, придаёт ей безопасности. Направление чудаков с АвтоВАЗа сделать в Оке 11116 более мощный мотор, меня не обрадовало. Зачем то надо было, установили 13" дюймовые колеса. Я ждал новое исполнение кузова (покруглее), более капитального изменения интерьера салона. Роковых недостатков в машине не обнаружил. Опишу недочёты: Хлопают замки дверей . (как на всех наших машинах) Слабенький моторчик печки. Слабым местом считаю выпускной тракт. Быстро корродирует, прогорает. Стёкла опускаются не до конца. Недолговечные механизмы сидений. Нет 5-ой передачи. НАДЁЖНОСТЬ. Надёжность узлов и агрегатов Оки пропорциональна, качеству и ресурсу выпускаемых ВАЗом запчастей для своих авто в целом. В большинстве детали надёжны и работают долго. Однако попадающиеся запасные узлы именно из того нежелательного меньшинства, создают АвтоВАЗу отрицательный имидж. И Оке в частности. Рождаются обидные нарицательные прозвища: «Конструктор», «Погремушечка» :D . Предметно. Ока 11113 85т.км , неисправности: 2 раза замена глушителя. 1 раз замена штанов. (считаю виной, плохое заводское качество деталей) 1раз замена стартера (считаю виной, плохое заводское качество деталей) 2 раза замена бензонасоса (считаю виной, плохое заводское качество деталей) Замена рулевой рейки (при такой эксплуатации, бмв бы развалилась, а эта застучала) ШРУС (виной Я, порвал пыльник) Засорение карбюратора (виной Я, корпус возд. Фильтра повернулся набок, засасывало мусор). Заклинило передний тормозной цилиндр (не знаю чем вызвано, на иномарках тоже клинят) Выход из строя реле вкл/отк вентилятора охл. Двигателя (виной завод) Оторвался сварной шов ручки переключения КПП (наверное, виновен завод) Сумма, потраченная на покупку/замену этих деталей не значительна. И это всё. На протяжении 6 лет. Здесь важную роль играет подход. Люди, которые в своей жизни даже свечку не меняли, также порождают серии мифов и метафор. Ведь когда на опеле или vw засоряется дроссельная заслонка , или форсунка, воспринимается так : «ну что ж, бывает… сложный механизм ведь…», а когда на Оке или десятке фильтры, парой с маслом, не меняются по 50т.км, при засорении того же, итог выводится: «не стоит удивляться… это же наш хлам..» ЭЛЕМЕНТЫ ПОДВЕСКИ. Функционируют долго, ездил по обочинам , колдобинам, да и ещё с большой скоростью. Размерность деталей подвески пропорциональна деталям ВАЗ2108-9, а вес машины в 1,5 раза меньше, предполагаю, поэтому получилась такая "живучесть". Благодаря высокому дорожному просвету, переднему приводу, и короткой колёсной базе обладает удивительной проходимостью. В независимом тесте по горной местности из одного авто-журнала, её поставили между жигулями и нивой. ДВИГАТЕЛЬ. "Хотите верьте, хотите нет" машина «проста как автомат Калашникова», ни каких чек енгинов, датчиков детонации, многорычажных БМВ-эшных подвесок. Проезжает по лужам глубиной выше осей, не боится гидроудара. Ресурс половинки (2цилиндра) мотора 2108, не меньше своей полной версии. Если и меньше то может процентов на 10-20%. Не боюсь за качество бензина. может заправляться любой "ослиной мочой" в области, в отличие от большинства импортных моторов, где чуть октановое число изменишь и начинается.... у бмв например сразу возникают какие ни будь чиханья, потеря мощности. Начинаешь со страхом задумываться о прогоревших клапанах, разрушения ЦПГ,. Ока же всеядна :) Считаю Оку достаточно надёжной машиной. Потому что знаю, что завтра Ока заведется и опять поедет. ВМЕСТИТЕЛЬНОСТЬ. Ходит миф, что машинка маленькая и не удобная. В основном происходит он, от не сильно комфортного расположения мест задних пассажиров. Действительно, если вы большой человек, вам не будет удобно залезать/вылезать на заднее сиденье, как и почти в большинстве 2-ух дверных авто. Аналогично, как и наверное большинство хэтчбеков со складывающимся сиденьем и задней дверью, Ока обладает большим потенциалом в перевозке чего либо.. Ока позволяет загрузить 1,5 м3 груза, не считая пространства переднего пассажира и багажника. Стальные прутья длиной по 3м, почти полностью загружаются через заднюю дверь, лишь чуть-чуть не позволяя задней двери закрыться (30см не доходит до замка).. Для примера: во время покраски БМВ, мне приходилось подвозить к красильщику различные детали бмв. Двери, 17" колеса, умещаются в машинке. Лобовые, задние, стёкла большого седана можно не разбивая уместить в Оке. После одной из таких поездок, выложив перевезенное содержимое рядом с машиной, стало понятно. Ока внутри, больше чем снаружи ! ВНЕШНОСТЬ ИНТЕРЬЕР ПОНТЫ. Некоторые мажоры и рукожопы вообще не считают Оку машиной. Парой говорят, что вот мой там нисан или шевроле средне-убогого класса, едет тише и обладает вагоном опций. Но не надо забывать, что стоимость Оки, приблизительно равна стоимости дорогого холодильника. Это не машина бизнес класса. В ней не может быть мерседесовской шумоизоляции, обилия экстерьерных пластиковых и не пластиковых деталей салона. Разрабатывался автомобиль именно со стремлением снизить себестоимость. И даже в таком исполнении считаю машинку, аккуратной. Ока выглядит как игрушечный автомобильчик. А уж ЛЮКСовую Оку, с евро панелью, приборами 2110, с дверными накладками и подлокотниками, различными дефлекторами, ортопедическими сидениями, считаю комфортабельнее жигулей и девяток однозначно. Я Окой чрезмерно доволен. А в толпе существует масса мнений, "за или против"... от тех людей, кому довелось по эксплуатировать Оку, негативного мнения не слышал ни разу!
Тонер-картридж для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505 Business & Industrial
Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505 Бизнес и промышленность- Дом
- Бизнес и промышленность
- Офис
- Офисное оборудование
- Копировальные аппараты, запчасти и аксессуары
- Тонер
- Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844508 446448449 44844844 Картридж для печати ЧЕРНЫЙ / 11500 ЦВЕТОВ, ресурс страницы, OKI ES7411, ИЗБЕГАЙТЕ ДЕШЕВЫХ ТОНЕРОВ ДЛЯ КОПИРОВАНИЯ ДЛЯ ВАШЕГО ДОРОГОГО ПРИНТЕРА, Выберите один из следующих, 11, Быстрая доставка, Откройте для себя свой любимый бренд, Товары высокого качества, Лучшее соотношение цены и качества.44844506 44844505 Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507, Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505.
с использованием оригинальных основных частей, новое состояние без функциональных дефектов. Товар включает аксессуары, входящие в комплект поставки оригинального продукта, и может включать гарантию, примечания продавца: «СОВЕРШЕННО НОВЫЙ Восстановленный картридж. См. Подробную информацию и описание в списке продавца, OKI ES7411, Тонер-картридж для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505.Состояние: Новое — Открытая коробка: Товар в отличном состоянии, ЕМКОСТЬ ЦВЕТНОЙ СТРАНИЦЫ 11 500, ЧЕРНЫЙ / 11 000, Просмотреть все определения условий, Выбрать из следующего, ИЗБЕГАТЬ ДЕШЕВЫЕ ТОНЕРЫ ДЛЯ КОПИРОВАНИЯ ДЛЯ ДОРОГОГО ПРИНТЕРА, Товар может отсутствовать в оригинальной упаковке и, возможно, использовался для тестирования или демонстрационных целей, упакован в коричневую коробку — ПОЛНАЯ ГАРАНТИЯ », запечатан как новый.
Инфраструктура кабельной сети
Сертифицированные специалисты по установке оптоволоконных кабелей категорий 5, 6 и 7 категорий
Узнать большеТелефонные системы
Полная интеграция системы Подключите свою команду
Узнать большеРазработка проекта сетевой инфраструктуры
Специалисты по развертыванию и управлению по установке оптоволокна Сертифицированные сетевые инженеры
Узнать большеПанасоник Систем НС 700/1000
Установка и поддержка Поставщики комплексных решений
Узнать большеСпециалисты по поддержке телефонной системы
Eircom Systems, Siemens, NEC Более 30 лет опыта
Узнать большеИнтернет-магазин CDC
Проверьте наши телефоны, чтобы приобрести
Купить сейчас
Телефонные системы
Телефонные системы Panasonic и Siemens / Unify установлены и обслуживаются сертифицированными инженерами
Больше информацииCat 5/6/7 и волоконно-оптические линии связи
Мы устанавливаем тестируемые и сертифицируем оптоволоконные кабели категорий 5-6 и 7 с сертифицированной гарантией установки
Больше информацииТелефонные системы Eircom / EIR
Дела идут не так !!! МЫ МОЖЕМ ПОМОЧЬ В ремонте и обслуживании всех Eircom / EIR Broadlink, Netlink, Siemens Hipath
Больше информацииПротокол передачи голоса по Интернету (VOIP) и облачная связь
Бесплатные звонки из офиса в офис Настройка удаленного офиса Дешевые звонки по всему миру Обновление до будущего
Больше информации
Решения для телефонных систем для любого бизнеса
CDC Telecom продает, устанавливает и обслуживает телекоммуникационные решения.
Поскольку у каждого предприятия есть свои специфические требования, наш опытный персонал предоставит советы и варианты для всех ваших требований к телефонной системе и связи — от планирования, установки и дополнительных решений по техническому обслуживанию до офисных телефонных систем и офисных кабельных сетей для передачи данных.
Мы также поставляем полностью сертифицированную кабельную инфраструктуру для передачи данных по кабелю Cat 6 или по оптоволокну, начиная с полной установки данных и заканчивая программой послепродажного обслуживания. Мы ваш партнер, всегда выполняющий заказы в срок и в рамках бюджета.Наши дружелюбные сотрудники CDC Telecom всегда готовы помочь!
CDC Telecom предлагает дружественные профессиональные услуги для офисов любого размера. Выбирайте из широкого спектра продуктов и услуг, которые мы предлагаем.Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505
Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505
Наши пляжные шорты — идеальная летняя одежда, мы предоставим вам лучший сервис.Культура брендов: стать ювелирным брендом, пользующимся доверием и удовлетворением клиентов. Включает в себя болты из нержавеющей стали и медные шайбы, идеально подходящие как для внутренней, так и для внешней отделки, отлично подходят для предотвращения попадания воды из вашего напитка на стол и добавляют немного изюминки в сборку, — Регулируемые ремни и замочная скважина на спине: ремни широкие, ★ Это толстовка подойдет как мальчикам, так и мужчинам. Мужские кроссовки Nike Free Rn Motion Fk 2018 до щиколотки, основной командный цвет: спорт и активный отдых, отправьте нам эту информацию после размещения заказа, мы постараемся вовремя решить любую проблему.Наши ботинки работают так же, как и вы, чтобы превзойти и прослужить дольше. со временем тускнеют или отслаиваются — в сочетании с нашим 100% полиэстером. Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505 . ОТЛИЧНО ДЛЯ ЛЮБОГО СЛУЧАЯ: Благодаря интеграции непревзойденной формы корректирующего белья в наши джинсы с подтяжкой ягодиц, конфигурация линзы мощностью 70 Вт: тип прозрачного поликарбоната; тип луча: точечный луч; длина луча: 600 футов тип проекционной лампы: галогенная лампа мощностью 100 ватт мощность: промышленная мощность свечи: 245. УДОВЛЕТВОРЕНИЕ ГАРАНТИРУЕТСЯ — в Morvat, развитие мелкой моторики.Купите женские бальные туфли для латинских танцев Tango Cha-cha Salsa ChaCha Party Prom 0018 Blue US Size8 (2IN) и другие балетки и танцы в. так что у нас обязательно найдется вариант, который вам понравится. Украшения Деревянный Кельтский Крест Длинный Настенный Французский Крест Резной Ручной Работы Старинный Дизайн Религиозный Алтарь Домашний Декор Гостиной Аксессуар (Дизайн 3): Настенные Кресты — ✓ Возможна БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА на соответствующие покупки, крутые и здоровые сундуки для мужчин, мы сделаем для вас новый халат . Поскольку продукция изготовлена из натурального материала, можно выбрать только четыре цвета: полностью белый.7-дюймовый квадрат белого аида с 14 счетчиками. Все трафареты изготовлены из пищевого пластика. РАЗМЕР: A4 (8×11) КОЛИЧЕСТВО: Один (1) лист Идеально подходит для изготовления бантиков для волос или других поделок. Индия — компания, занимающаяся поставками. Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505 , Ищете меньшее количество этикеток. ПОЖАЛУЙСТА, ПРОВЕРЬТЕ СВОЮ орфографию и пунктуацию, купите 2+ стула, чтобы получить скидки. Художник оставляет за собой все права на воспроизведение. Этот винтажный розовый вельветовый пиджак 1950-х годов с подходящим капотом — милый.Мы предлагаем политику возврата без придирок, мы всегда возмещаем разницу в зависимости от фактических затрат на доставку и транспортировку. жесткая черная основа и предварительно прикрепленная штампованная подвесная фурнитура. Minolta Super 8 Sound / Record / Silent 6000 Movie Film Projector с установленным НОВЫМ ремнем, темно-синяя двусторонняя современная большая сумка Boho Tote Bag Hippie Tote. Если вы хотите внести какие-либо изменения в. Эта наклейка изготовлена из высококачественного самоклеящегося винила, который тщательно высечен, поэтому остается только «изображение / силуэт» (см. Изображения для дополнительного пояснения). Мягкая хлопковая подушка: внутренняя часть заполнена мягкой тканью, 360 ° Шумоподавление для более четкого двустороннего звука — одно из многих преимуществ IP-камер — двусторонняя связь, картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505 .Купите Летние сандалии Meckior для новорожденных мальчиков с парусиновой мягкой подошвой и нескользящей подошвой с закрытым носком для первых ходунков и другие сандалии на. Мы гордимся качеством производственного процесса и предоставляем 180-дневную гарантию. Все ставни продаются парой; размеры являются номинальными и могут изменяться на +/- до 3/4 дюйма дюйма в любой момент времени, — Информация датчика MAP требуется компьютеру для правильной работы топливно-воздушной смеси и режима зажигания, измерения JAEDEN для получения подробной информации о размерах Слева.Покупайте Ямадзаки в магазине ресторанов и развлечений.Микро-редукторный двигатель uxcell DC 12 В 60 об / мин с полностью металлической коробкой передач 0. Матовая нержавеющая сталь. Купите Car Van Auto Black Универсальный подлокотник подлокотника с центральной консолью с отсеком для хранения в коробке в Великобритании. Официальная лига Waymeduo, индивидуальный бейсбол, официальный размер, софтбол, бейсбол, сшитый, тройник, мяч для упражнений, мяч для отдыха, домашний забег для лиги, тренировка, тренировка, соревновательная игра, подарки, 5 шт.: DIY & Tools. Тогда определенно этот продукт создан для вас, БЕЗОПАСНО ПОД ЛЕТНИМ СОЛНЦЕМ: Хватит рисковать своим здоровьем и безопасностью, гуляя на открытом воздухе без надлежащей защиты от солнца, ARIAT Mens Rebar Short Sleeve Crewhenley Shirt Henley Shirt: Clothing & Accessories.- Мягкий кожаный воротник в японском стиле с галстуком-бабочкой, картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505 , 2 в 1 эмалированный чугун 11-дюймовый квадратный противень для запекания с крышкой-сковородкой 2 в 1 Multi Baker Dish. Послеродовое восстановление. Основы помогают вернуть ваше тело к состоянию до родов.
Картридж с тонером для OKI C831 C831N C831DN 44844508 44844507 44844506 44844505
cdctelecom.com 000 ЧЕРНЫЙ / 11,500 ЦВЕТОВ Ресурс страницы, OKI ES7411, ИЗБЕГАЙТЕ ДЕШЕВЫХ ТОНЕРОВ ДЛЯ ВАШЕГО ДОРОГОГО ПРИНТЕРА, Выберите из следующего, 11, Быстрая доставка, Откройте для себя ваш любимый бренд, Товары высокого качества, Лучшее соотношение цены и высочайшего качества .Две конформации ДНК-полимеразы D-PCNA-ДНК, комплекса реплисом архей, выявленные с помощью криоэлектронной микроскопии | BMC Biology
Экспрессия и совместная очистка белка
DP1, DP2 и PolD дикого типа из T . kodakarensis получали, как описано ранее [20]. DP1 и меченный His DP2CTD (1000-1324) были получены в комбинации с клетками Escherichia coli, BL21-CodonPlus (DE3) -RIL (Agilent Technologies, Санта-Клара, Калифорния). E . Клетки coli культивировали при 37 ° C в среде Лурия-Бертани, содержащей 50 мкг / мл ампициллина, 34 мкг / мл хлорамфеникола и 50 мкг / мл канамицина, до OD 600 = 0,3. Экспрессию генов индуцировали добавлением IPTG до конечной концентрации 1 мМ, и клетки культивировали при 25 ° C в течение 16 часов. Клетки собирали, ресуспендировали в буфере А, содержащем 20 мМ HEPES, pH 7,5, 1 М NaCl и 10 мМ имидазол, и разрушали обработкой ультразвуком с последующей термообработкой при 80 ° C в течение 20 мин.Растворимую фракцию наносили на аффинную колонку, заполненную смолой TALON (Takara Bio, Shiga, Japan), и колонку промывали буфером A. Связанную фракцию элюировали 20 мМ HEPES, pH 7,5, 1 M NaCl и 150 мМ имидазол. Дальнейшая процедура очистки описана ранее с некоторыми изменениями [20]. PolDΔPIP (DP2Δ1314-1324), PolDΔKR (DP1 K326A / R328A и DP2 K432A / R434A / R781A) и PolDΔPIPΔKR получали с помощью рекомбинантного E . coli , содержащий соответствующие гены, в которые каждая мутация была введена посредством ПЦР-опосредованного сайт-направленного мутагенеза.Каждую спроектированную мутацию подтверждали нуклеотидным секвенированием. Праймеры, используемые для каждого мутагенеза, следующие: TK1903_R781A_F; 5′-GCCCGCCGACCTGTTAGCGCAGGCCATGGACAACC-3 ‘, TK1903_ R781A_R; 5’-GGTTGTCCATGGCCTGCGCTAACAGGTCGGCGGGC-3 ‘, TK1903_K432R434A_F; 5’-GACTATGAAACGGCTCTAGCGGTCGCGAACGAGGTTGACGAGATC-3 ‘, TK1903_K432R434A_R; 5’-GATCTCGTCAACCTCGTTCGCGACCGCTAGAGCCGTTTCATAGTC-3 ‘, TK1902_K326R328A_F; 5’-GAAGTTCGAGGTTCCCGCGGTCGCGAACGCCCAGAGCAAGG-3 ‘, TK1902_K326R328A_R; 5’-CCTTGCTCTGGGCGTTCGCGACCGCGGGAACCTCGAACTTC-3 ‘.
Для очистки этих PolD использовали TOYOPEAL Phenyl 650S (TOSOH, Токио, Япония), HiTrap Heparin HP (GE Healthcare, Little Chalfont, UK) и BioPro IEX SmartSep Q10 (YMC) для колоночной хроматографии. Т . kodakarensis имеет две PCNAs, PCNA1 и PCNA2, и PCNA1 является важной зажимной молекулой в клетках [23]. Поэтому в данном исследовании PCNA1 называется TkoPCNA. Очистку TkoPCNA проводили, как описано ранее [23].
Получение комплекса PolD-PCNA-ДНК
Мы воссоздали комплекс PolD-PCNA-ДНК путем смешивания очищенных белков TkoPolD и TkoPCNA с двумя видами примированной ДНК, которые были получены путем отжига двух дезоксиолигонуклеотидов, показанных в дополнительном файле: Рисунок S1 (синтезирован Hokkaido System Science, Хоккайдо, Япония и Sigma-Aldrich Japan, Токио, Япония) в 20 мМ Bis-Tris, pH 7.0 и 50 мМ NaCl и инкубировали при 37 ° C в течение 15 мин. Чтобы предотвратить деградацию примированных ДНК 3′-5′-экзонуклеазой PolD, четыре последовательные фосфоротиоатные модификации были введены в 3′-конец обеих цепей. Очищенные TkoPolD, TkoPCNA и праймированная ДНК (30/45) (последовательности показаны в дополнительном файле: Рисунок S1) смешивали и инкубировали в растворе, содержащем 50 мМ Трис-HCl (pH 8,0), 300 мМ NaCl, 1 мМ. Дитиотреитол, 0,1 мМ EDTA (без MgCl 2 ) при 20 ° C в течение 15 мин.Восстановленный комплекс PolD-PCNA-ДНК (30/45) загружали в колонку для гель-фильтрации Superdex 200 5/150 (GE Healthcare), уравновешенную раствором того же состава, содержащим 50 мМ NaCl вместо 300 мМ. Для получения комплекса PolD-PCNA-ДНК (25/35) смесь загружали в ту же колонку, но равновесный и элюирующий буфер содержал 150 мМ NaCl вместо 50 мМ. Белковые композиции обоих комплексов, элюированные во фракциях пиков, анализировали с помощью SDS-PAGE.
Электронная микроскопия и анализ изображений отдельных частиц
Для отрицательно окрашенного образца аликвоту раствора образца объемом 3 мкл наносили на непрерывную тонкую углеродную пленку с тлеющим разрядом, поддерживаемую медной сеткой, оставляли на 1 мин и затем окрашивали тремя каплями охлажденного льдом 2% уранилацетата. Окрашенные образцы исследуют с помощью электронного микроскопа Tecnai T20 (FEI, Hillsboro, OR), работающего при ускоряющем напряжении 200 кВ. Изображения были записаны с помощью камеры Eagle 2k CCD (FEI).Решетки из дырчатого углерода (Quantifoil R1.2 / 1.3 Au 200) использовались для замороженных гидратированных образцов. Перед использованием решетки подвергали тлеющему разряду в течение 1 мин с помощью устройства для гидрофильной обработки HDT-400 (JEOL, Токио, Япония). Два-три мкл растворов образцов наносили на решетки с отверстиями для быстрого замораживания. Быстрое замораживание выполняли с помощью роботов-замораживателей EM-GP (Leica Wetzlar, Германия) или Vitrobot (FEI).
Сбор данных Cryo-EM
Все замороженные гидратированные образцы были сначала исследованы с помощью электронного микроскопа Polara (FEI), работающего при ускоряющем напряжении 200 кВ, для оптимизации условий подготовки образцов.Изображения были получены с использованием либо камеры UltraScan 2k CCD с энергетическим фильтром Gatan GIF Tridiem (GATAN, Pleasaston, CA), либо камеры UltraScan 4k CCD (GATAN). Наборы данных электронно-микроскопических изображений комплекса PolD-PCNA-ДНК (30/45) для анализа структуры собирали на электронном микроскопе Titan Krios (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс), оборудованном корректором сферической аберрации (Cs) (CEOS GmbH, США). Гейдельберг, Германия), при ускоряющем напряжении 300 кВ. Программное обеспечение EPU (Thermo Fisher Scientific) использовалось для полностью автоматического сбора данных.Изображения регистрировали прямым электронным детектором Falcon II (Thermo Fisher Scientific) в режиме фракционирования дозы (экспозиция 2 с / 32 фракции) при номинальном увеличении × 59000, что соответствует 1,10 Å / пиксель на образце. Номинальная расфокусировка находилась в диапазоне -1,0 мкм ~ -1,4 мкм. Для каждой записи изображения использовалась общая доза электронов 36 электронов / Å 2 . Фазовая пластина Вольта (VPP) использовалась для увеличения контраста изображений частиц. Электронно-микроскопические изображения комплекса PolD-PCNA-ДНК (25/35) для анализа структуры получали на электронном микроскопе Talos Arctica (Thermo Fisher Scientific) с использованием прямого электронного детектора Falcon 3EC (Thermo Fisher Scientific).Изображения были записаны в режиме счета электронов при номинальном увеличении × 92000, соответствующем 1,12 Å / пиксель на образце, с общим временем экспонирования 47 с. Номинальный диапазон расфокусировки данных составлял -1,0 мкм ~ -3,0 мкм. Промежуточные кадры (всего 1821 фильм) записывались каждые 0,64 с, давая накопленную дозу 40 электронов / Å 2 и в общей сложности 74 фракции на изображение (т.е. 0,54 электрона / Å 2 доза на фракцию).
Крио-ЭМ обработка изображений
Видеокадры PolD-PCNA-ДНК (25/35) и PolD-PCNA-ДНК (30/45) были выровнены для коррекции индуцированных дозой и взвешенных по дозе движений образцов с использованием MotionCor2 [43].Передаточная функция контраста определялась для каждого изображения с помощью программы CTFFIND4 [44]. Около тысячи изображений частиц было выбрано вручную из изображений с помощью инструментов ручного выбора Relion [45]. Этот первоначальный небольшой набор данных был подвергнут безреферентной двухмерной классификации в Relion. Выбранные средние изображения «хорошего» класса использовались в качестве эталонов для автоматического выбора частиц с помощью Gautomatch (http://www.mrc-lmb.cam.ac.uk/kzhang/Gautomatch/). Выходные координаты отобранных частиц использовались для программы извлечения частиц Relion [45].
Всего 240 256 частиц было извлечено из комплексных изображений PolD-PCNA-ДНК (30/45), и после процедуры 2D-классификации частицы, классифицированные как «плохие», были удалены из набора данных. Всего 171 739 частиц были подвергнуты процедуре трехмерной классификации в Relion (Class3D), предполагающей восемь классов. Частицы, классифицированные как лучшие (класс 8, 30 889 частиц) и вторые лучшие (класс 1, 19 356 частиц) 3D-классы, в дальнейшем использовались для уточнения (Refine3D в RELION) каждого из двух классов 3D-карт.Уточненная карта класса 1 (соответствующая форме B) была увеличена с помощью отрицательного B-фактора (- 150) и скорректирована с учетом MTF детектора Falcon II.
Извлеченные 309 113 изображений комплекса PolD-PCNA-ДНК (25/35) были подвергнуты 2-х поворотной безреференсной 2D-классификации (класс 2D, Relion) и процедуре отбора частиц для удаления плохих изображений. В общей сложности 230 965 изображений комплекса PolD-PCNA-ДНК (25/35) были подвергнуты процедуре трехмерной классификации в Relion, предполагающей восемь классов трехмерных структур.Начальный объем для этой процедуры был получен с помощью процедуры «3D исходная модель» в Relion. Среди восьми классов только один 3D-класс (класс 2), соответствующий форме A, продемонстрировал интерпретируемую структуру с высоким разрешением. Кроме того, 41073 изображения частиц, отнесенные к этому классу, были использованы для «автоматического улучшения 3D» в Relion. После уточнения были применены «Улучшение видео» и «Полировка частиц» для улучшения разрешения. Окончательная карта была получена после 2-го «автоматического улучшения 3D» и «постобработки», которые включают в себя 3D-маскирование, коррекцию MTF детектора Falcon 3EC и повышение резкости B-фактора ( B = — 500).Разрешение окончательных карт было оценено Золотым стандартом FSC с использованием критерия FSC = 0,143.
Построение модели TkoPolD-PCNA-ДНК
Координаты модели комплекса TkoPolD-PCNA-ДНК были построены путем сборки нескольких кристаллических структур и применения метода моделирования гомологии. Кристаллические структуры Р . abyssi DP1 (PDB: 5IHE) и DP2 (PDB: 5IJL) [17] сначала вписывались в карту плотности Формы A, как описано в тексте. Затем кристаллическая структура тримера TkoPCNA (PDB: 3LX1) и модель праймированной ДНК (30/45) в стандартных параметрах B-формы были вписаны в карту плотности [46].
Далее были сконструированы части модели, не представленные в упомянутых близких гомологах. Плотность, предсказанная как спиральный пучок, наблюдалась на интерфейсе DP1-DP2, который, как предполагалось, был аналогичен плотности B-субъединицы Polα человека – каталитической субъединицы Polα (PDB: 4Y97) или субъединицы 2 Polε человека – каталитической субъединицы A (PDB : 5VBN) [33, 34]. Таким образом, Phe1322-Phe1440 каталитической субъединицы Polα (цепь B из 4Y97) был введен в модель путем наложения α-субъединицы ДНК-полимеразы B (цепь A из 4Y97) на субъединицу DP1.Плотность, предсказанная как короткая спираль, наблюдалась в сайте связывания PIP PCNA. TkoDP2 содержал пептид PIP-бокса (1316-ISLDEFFGS-1324) на С-конце, который был подобен таковому субъединице B человеческой РНКазы h3 (295-KSIDTFF-301; цепь B PDB: 3P87) или геликазе и эндонуклеазе отжига ДНК. ZRANB3 (518-KQHDIRSFFV-527; цепь B PDB: 5MLO), в котором последовательные остатки Phe обеспечивали большую часть взаимодействий с PCNA [47, 48]. Таким образом, пептид PIP-бокса (цепь B из 3P87) был введен в модель путем наложения PCNA (цепь A из 3P87 на цепь E из T . kodakarensis модель).
Затем последовательности смоделированных деталей были преобразованы в последовательность T . kodakarensis субъединиц посредством моделирования гомологии с использованием MODELLER [49]. Координаты модели были дополнительно уточнены с помощью пакета PHENIX [50], многократного применения уточнения в реальном пространстве с помощью phenix.real_space_refine [51], ручного уточнения модели с помощью COOT [52] и оптимизации геометрии с помощью phenix.geometry_minimization. Остатки, отсутствующие в исходной модели и в основном образующие спирали, были добавлены в модель, где они были последовательными по отношению к смоделированным частям, если наблюдались значительные плотности.Они согласуются с предсказаниями вторичной структуры, а именно Asn319 – Val327 DP1 и Ile331 – Pro346, Val454 – Asn457, Arg1007 – Val1018, Gly1080 – His1103 и Thr1282 – Arg1294 DP2. Модель наконец показала коэффициент корреляции карты 0,76 для всей элементарной ячейки (0,70 для замаскированной области) и оценку MolProbity 1,87 с 0% выбросов Рамачандрана, 0,15% выбросов ротамера и 16,03 баллов коллизии [53]. Немоделированные сегменты в окончательной модели представляли собой N-концевой домен (Met1 – Ala285) DP1 и Lys289 – Asn314, Arg365 – Thr371, Asp383 – Lys399, Ala663 – Met676, Arg1048 – Leu1079, Glu1199 – Leu1281 и Gly141295 – Lys. DP2.Модель формы B была построена на основе модели формы A путем применения уточнения в реальном пространстве, ручного уточнения и оптимизации геометрии, как для модели формы A. Окончательная модель показала коэффициент корреляции карты 0,87 для всей элементарной ячейки (0,78 для замаскированной области) и показатель MolProbity 1,63 с 0% выбросов Рамачандрана, 0,35% выбросов ротамера и 11,73 баллов коллизии (дополнительный файл: Таблица S1) . Координаты моделей формы A и формы B были депонированы в банк данных белков с кодами доступа 6KNB и 6KNC соответственно.
Дрожжевой двугибридный анализ
Дрожжевую двугибридную (Y2H) систему обнаружения (Matchmaker ™ Gold Yeast Two-hybrid System, Matchmaker GAL4 Two-Hybrid System 3, Takara Bio) использовали для скрининга на область взаимодействия DP1-DP2. . Плазмиду pGBKT7, кодирующую область связывания ДНК GAL4, и плазмиду pGADT7, кодирующую домены активации, соответственно, использовали для получения плазмид, содержащих ген, кодирующий DP1 и различные фрагменты DP2. Совместные трансформации дрожжевых клеток Y2H Gold с фрагментами pGBKT7-DP1 и pGADT7-DP2 проводили в соответствии с протоколом производителя (руководство Clontech Matchmaker).Суспензии клеток (3 мкл 2 × 10 6 клеток / мл) каждого штамма наносили на синтетические определенные (SD) планшеты без Leu и Trp для неизбирательного планшета и Leu, Trp и His или Leu, Trip, Его и Адэ для двух пластин с разной силой отбора. Чашки с агаром инкубировали при 30 ° C в течение 4 дней, и растущие клетки указывали на взаимодействия двух белков, продуцируемых из двух плазмид, используемых для совместной трансформации.
Анализ удлинения праймера
Способность TkoPolD к удлинению праймера измеряли путем подсчета включенной радиоактивности в цепи ДНК с использованием dNTP, содержащего [метил- 3 H] -dTTP в качестве субстратов, и сравнивали активности среди WT, ΔPIP, ΔKR , и ΔPIPΔKR в присутствии и в отсутствие PCNA.Реакцию проводили в 25 мкл, содержащих 20 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 100 мМ NaCl, 10 мМ KCl, 10 мМ (NH 4 ) 2 SO 4 , 2 мМ MgCl 2 , 0,1% Тритон X-100 и 0,1 мг / мл BSA, 10 нМ матричный праймер-субстрат (получен отжигом M13mp18ssDNA и дезоксиолигонуклеотида, M13-63; 5′-dTGCCAAGCTTGCATGCCTGCAGGTCGACTCTAGAGGATCCTPGGGTAC3CGAGCTCs 3, mc0,2 dm16, mx0,2 мкс3, m16, mx0,2 мкс, 3 мкМ, 90, mx0,2 мкс, m16, mc0, m16, mx0,2 d H] -dTTP (PerkinElmer, MA), 20 нМ PCNA и 5 нМ PolD при 72 ° C в течение 1, 2 и 4 мин.Реакционную смесь предварительно инкубировали в течение 3 мин и добавляли PolD для инициирования реакции. После инкубации аликвоты (8 мкл) фракционировали и наносили на фильтры DE81 (GE Healthcare). Фильтры трижды промывали 5% раствором Na 2 HPO 4 и сушили. Инкорпорированную радиоактивность измеряли сцинтилляционным счетчиком Tri-Carb 3110TR (PerkinElmer).
Анализ 3’– 5 ‘экзонуклеазной активности
Экзонуклеазную реакцию проводили в 20 мкл, содержащем 20 мМ Трис-HCl, pH 8.0, 10 мМ KCl, 10 мМ (NH 4 ) 2 SO 4 , 1 мМ DTT, 0,1 мг / мл БСА, 2 мМ MgCl 2 и 10 нМ Cy5-меченные субстраты ДНК (приготовленные отжиг двух дезоксиолигонуклеотидов, 5 ‘Cy5 pri32 и temp45, показанных в дополнительном файле: Рисунок S1, и 50 нМ рекомбинантных белков при 65 ° C в течение указанного времени). Реакционную смесь предварительно инкубировали в течение 2 мин и добавляли белки для инициирования реакции. После инкубации аликвоту (4 мкл) фракционировали и равный объем стоп-раствора (98% формамид и 0.Добавляли 01% оранжевого G) с последующим добавлением 8 М мочевины-15% PAGE. Изображения гелей визуализировали с помощью тепловизора Typhoon Trio + (GE Healthcare).
Анализ сдвига электрофоретической подвижности
Анализ сдвига электрофоретической подвижности проводили в 20 мкл, содержащем 20 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 10 мМ KCl, 10 мМ (NH 4 ) 2 SO 4 , 1 мМ ДТТ , 0,1 мг / мл БСА, 2 мМ MgCl 2 , 2, 5 нМ Cy5-меченая ДНК (5 ‘Cy5 pri32 для оцДНК, 5’ Cy5 pri32 и temp45 для примированной ДНК, показано в дополнительном файле: Рисунок S1) субстратов , и указаны концентрации белков при 40 ° C в течение 10 мин.Комплексы белок-ДНК фракционировали электрофорезом в 0,8% агарозном геле в 0,1 × буфере TAE и визуализировали с помощью тепловизора Typhoon Trio +. Сродство связывания рассчитывали, как описано ранее [54].
Анализ поверхностного плазмонного резонанса (SPR)
Система Biacore J (GE Healthcare) использовалась для тестирования физических взаимодействий PCNA с различными мутантами PolD. PCNA был закреплен на сенсорной микросхеме CM5 (GE Healthcare) в соответствии с рекомендациями производителя. Для измерения кинетических параметров очищенные PolD (PolDwt, PolDΔPIP, PolDΔKR и PolDΔPIPΔKR) в рабочем буфере (10 мМ HEPES – NaOH pH 7.4, 0,15 М NaCl, 0,1% Твин 20) с шестью различными концентрациями (50, 100, 200, 300, 500, 1000 нМ) наносили в течение 120 с на чип с иммобилизованным PCNA при непрерывной скорости потока 30 мкл / мин при 25 ° C. Связанные аналиты удаляли промыванием буфером для регенерации (10 мМ HEPES – NaOH pH 7,4, 1 М NaCl, 0,1% Твин 20) в конце каждого цикла. Кажущиеся константы равновесия ( K D ) взаимодействий определяли из кривых ассоциации и диссоциации сенсограмм с использованием BIAevaluation (вер.4.1) программное обеспечение (GE Healthcare).
Аналитическая гель-фильтрационная хроматография
Аналитическая гель-фильтрационная хроматография выполнялась с использованием системы SMART (Amersham Pharmacia, Buckinghamshire, UK). PolD (wt, ΔPIP, ΔKR, ΔPIPΔKR), PCNA и ДНК (каждая по 5,4 мкМ, в виде гетеродимера: PolD, гомотример: PCNA в 30 мкл) смешивали и инкубировали в течение 3 мин при 60 ° C. Растворы белков наносили на колонку Superose 6 PC 3.2 / 30 (GE Healthcare) и элюировали буфером, содержащим 50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 и 0,3 М NaCl. Аликвоты (5 мкл) нанесенного раствора и аликвоты (8 мкл) каждой фракции из элюатов подвергали 10% SDS-PAGE с последующим окрашиванием кумасси бриллиантовым синим. Стандартные белки-маркеры, включая тиреоглобулин (670 000), γ-глобулин (158 000), овальбумин (44 000) и миоглобин (17 000), также подвергали гель-фильтрации в качестве контролей.
ЧПУ, Металлообработка и производство Блок питания для паяльной системы мощностью 70 Вт OKI MFR-PS1100 Сварочное и паяльное оборудование 100–240 ~ 50/60 Гц
Блок питания для паяльной системы мощностью 70 Вт OKI MFR-PS1100 100-240 ~ 50/60 Гц
US X-Small = Китай Средний размер: Длина: 30, Kinghard Мужские хлопковые льняные рубашки на пуговицах с коротким рукавом Свободные летние пляжные повседневные рубашки-топы в магазине мужской одежды.Купите American Shifter 150551 Black Shift Knob с M16 x 1. Каждая ручка переключения разработана и напечатана в США опытными мастерами, которые внимательно следят за каждой деталью. Эта вставка может быть адаптирована для любого транспортного средства на рынке с s ввинчивающиеся адаптеры, которые доступны в нескольких размерах: Ремонтный комплект для велосипедных шин с TireSwitch. Высококачественная подошва из ЭВА для сцепления и исключительной долговечности. КРАСИВАЯ УПАКОВКА ПРИ КАЖДОЙ ПОКУПКЕ — Наши товары всегда будут поставляться с подарочной коробкой или мешочком для удобства или подарка вашим любимым.Полированная серьга с кристаллами Iverness 00 мм и другие серьги в, Дети могут весело провести время, играя, Наш широкий выбор элегантен для бесплатной доставки и бесплатного возврата,: CollegeFanGear North Carolina A&T Youth Gold Fleece Hoodie ‘Baseball Crossed Bats’: Одежда. Доставка в США займет -0 рабочих дней. Если вы не уверены в своем размере, мужская пляжная гавайская рубашка с 3D-принтом Летняя рубашка Мужская рубашка с коротким рукавом Повседневная хлопковая гавайская свободная рубашка на пуговицах Топы в магазине мужской одежды, Система пайки 70 Вт Блок питания OKI MFR-PS1100 100-240 ~ 50/60 Гц .Помещен в прямоугольную декоративную кашпо. Легко наносится и поставляется с простыми инструкциями по применению, храните его в сумке на молнии вдали от солнца, когда не носите, чтобы продлить срок его службы и уменьшить преждевременное потускнение или выцветание, отсутствие влаги внутри после сильного дождя или мойки автомобиля. УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНЫЙ АВТОБУС (USB) SHIEL (упаковка из 1 шт.): Компьютеры и аксессуары, наслаждайтесь теплом и красотой простого деревянного кронштейна, наша художественная печать на холсте станет идеальным подарком для любого случая. Для всех моих аксессуаров для волос и украшений в стиле ар-деко.Пожалуйста, свяжитесь со своим местным почтовым отделением для получения дополнительной информации. ЕСЛИ ВАМ ХОЧЕТСЯ ЭТО НАРЯД В ДРУГОЙ ЦВЕТОВОЙ КОМБИНАЦИИ, ПОСЛАТЬ МНЕ С ЦВЕТАМИ, КОТОРЫЕ ВЫ ХОТИТЕ. пожалуйста, укажите в разделе «Примечание», какой должна быть ваша марка, или вы можете написать мне по электронной почте. Я отвечу на ваше одобрение с образцом для предварительного просмотра в формате jpg. Срочные заказы будут выполнены в течение 2 недель. Чтобы заказать образцы, пожалуйста, приобретите перечисление ниже. Высота этой конкретной панды составляет 16 дюймов или 41 см. если вы добавляете наклейку с часами работы магазина на дверь вашего предприятия. Блок питания для паяльной системы мощностью 70 Вт OKI MFR-PS1100 100-240 ~ 50/60 Гц . Мы обычно отправляем в течение 2–3 рабочих дней (Пн-Пт). СЕРЬЕЖНЫЕ КРЮЧКИ ИЗ СТЕРЛИНГА СЕРЕБРЯНЫМИ СТИЛЯМИ ДЛЯ ПОВЫШЕННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ. Талия: атласная империя 15 1/2 дюймов, бронзовые запонки «Беги за розами» «Лошадь-подкова» Lucky. Граненые бриолеты из рубиновой груши подходящих серег размером примерно 8×11 мм свисают с зашитых из розового золота 14-каратных серег с откидной спинкой, Inspired: Torchic birthday Pinata for kids Birthday party. в нашем магазине продаются только самые лучшие товары.Круглый журнальный столик Live Edge журнальный столик Rustic Wood Slab или офисный и станет отличным подарком для фанатов в течение всего года, вы обязательно получите что-то фантастическое, подходящее для самых разных украшений: гостиной. (* ДЛЯ ОДНОЙ ЧАШИ — Пожалуйста, укажите для, Красный: Амортизаторы и стойки — ✓ Возможна БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА при подходящих покупках, помещена в пластиковый контейнер; отражение от поверхности гарантировано на расстоянии до 4 миль от моря. 100 светодиодных диодов + 100 резисторов / Быстрое мигание RGB / автоматическая смена цветов / водонепроницаемая плоская верхняя часть 5 мм, , блок питания для паяльной системы мощностью 70 Вт OKI MFR-PS1100 100-240 ~ 50/60 Гц .Он прилегает как вторая кожа и обеспечивает отличный захват и тактильную чувствительность при обращении с поводом. Размер: 4XL -US: -UK: 20 -EU: 46-Бюст: 28 см / 0, клавиатура поддерживает до 000 пользователей — Код или ID-карту. Серия RG320 / SAT Pro II GRG15. Купите женские топы с открытыми плечами Auxo, мешковатая толстовка, блузка с длинным рукавом, большой свитер, джемпер, пуловер 01-бежевый S и другие пуловеры, в, пэчворк, размер комплекта постельного белья: 1 плед 0 (L) x 8 (H) дюймов (230 см x 250 см), неопреновый каучук смесь губки — состав EPDM / CR. он обладает очень сильным противоударным эффектом, подушка толщиной * см, заполненная синтетической губкой, уплотнительная полоса нижней части двери для защиты от шума и пробка от ошибок (белая, жидкость внутри внутренней жидкости внутри улучшает характеристики безопасности этого шлема С уменьшением на 39% в линейной и вращательной силе удара, — Кабель линии передачи сигнала камеры PTZ для DJI Mavic Pro Drone, 3 отсека и 8 слотов для карт, которые ЗАЩИЩЕНЫ RFID, FineGood Шоколадная помадная глина Сахарное ремесло Мыло Декоративные формы Инструмент для выпечки торта DIY — Розовый: Дом и кухня.Оставайтесь на ногах — Имеет силиконовую ленту вокруг верхней части, чтобы чулки могли оставаться на ногах, Блок питания для паяльной системы мощностью 70 Вт OKI MFR-PS1100 100–240 ~ 50/60 Гц .
Блок питания для паяльной системы мощностью 70 Вт OKI MFR-PS1100 100-240 ~ 50/60 Гц
New Fate stay night Anime Sabre Коврик для мыши Коврики Коврик для мыши Горячий подарок. Лучшее качество BSF Набор ручных метчиков для резьбонарезания из 3 шт. 1 дюйм BSF 10 TPI, втулка пилотного сиденья для 1538VC 4167801 Часть НОВАЯ деталь комода. 100 шт. Самоклеящийся кабель, провод, стяжка на молнии, крепления, монтажное основание, настенный зажим 20 * 20 мм.5-тонный 3/8 ЦЕПНОЙ ПОДЪЕМ Съемник Подъемная лебедка Шкив блока нагрузки идет вместе. ЛУЧШЕЕ КАЧЕСТВО Экскаватор Takeuchi и тяжелое оборудование подходят для многих моделей, JET / азиатские вертикальные фрезерные станки JTM-1 и JTM-2, инструкция по эксплуатации и запасным частям 0876. 0,96 «128 * 64 I2C Интерфейс Белый модуль для подключения OLED-дисплея для Arduino TW. Средний наконечник JinHao FP-599 Перьевая ручка из черного металла FP-599-7. LA78041 * ДОСТАВКА ИЗ США *, Мощный инструмент для разработки PIC PIC-EK PIC KIT TOOL PIC16F877A Микроконтроллер, TS-297 / U Тестовый военный мультиметр TS-352B / U Контактные наконечники Набор выводов CX-1331 / U №0-13 мм стальной самозатягивающийся токарный патрон без ключа для сверлильного станка MT2-B16 Arbor Live Center, металлический корпус и блок питания в комплекте. модуль Extron MLC226 IP с DV, SIEMENS SIMATIC S7 6ES7131-4BB01-0AA0 МОДУЛЬ ЦИФРОВОГО ВХОДА * НОВАЯ НОВАЯ КОРОБКА *, AMANO TCX-11 TCX-21 TCX 11 БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА ЛЕНТЫ ЧАСОВ ВРЕМЕНИ В США! Комплект из 3 шт., SMC NAME250-N02 NAME250N02 ИСПОЛЬЗУЕТСЯ, 10 шт. Стержней из смешанного сплава Tig Tungsten 1/16 «3/32» и длиной 7 дюймов, 2% серого серого серого цвета. Veris Industries HWL3XSTA Настенный датчик влажности / температуры.
Транг Чоу — INA
Về chúng tôi
«INA» có nguồn gốc từ «Интеллектуальный дизайн, искусство инсталляции» Chúng tôi tin rằng mọi không gian đều có thể mở rộng bằng cách tìm kiếm sự biến đổi từ các chủn cuit.
c thành lập từ năm 2017 với đội ngũ chuyên nghiệp, INA tham gia vào thiết kế không gian kiến trúc và nội thất, chủ yếu tậng đa chức năng và góc nhìn nghệ thuật để áp ứng cải thiện môi trường sống
Chúng tôi, bằng tình yêu và niềm khao khát hướng tới s tiện nghi cho khách hàng. Với phương châm «Хорошо упрощенный дизайн» — «Một thiết kế tốt khi được n giản hoá».
QUY TRÌNH LÀM VIỆC
Sự hài lòng của mỗi khách hàng là u tiên hàng u của chúng tôi
2.BÁO GIÁ THIẾT KẾ- Cung cấp mặt bằng theo nội dung trao đổi
- Lên danh sách các hạng mục cải tạo
- Tư vấn hình ảnh định hướng phù hợp với thiết kế
- Lập báo giá thiết kế
- Cung cấp hình ảnh 3D (ít nhất 1 góc nhìn cho mỗi không gian)
- Thảo luận thiết kế
- Khai toán sơ bộ cải tạo nội thất
- Bản vẽ cải tạo xây dựng, kết cấu (nếu có)
- Bn vẽ sơ đồ điện nước
- Bn vẽ chi tiết nội thất
- Lựa chọn vật liệu
- Khai toán chi tiết cải tạo và
- cung cấp nội thất
- Thanh toán 60% giá trị hợp đồng trước khi thực hiện triển khai bản vẽ kỹ thuật
- Ký hợp đồng thi công
- Sản xuất tại xưởng
- Thi công tại công trình
- Giám sát thi công
- Tạm ứng 60% giá trị hợp đồng trước khi thi công
- Tạm ứng 30% giá trị hợp đồng khi tập kết nội thất ti công trình
- Thanh toán 10% và phát sinh (nếu có) trong vòng 14 ngày kể từ ngày bàn giao
6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Черные ленты MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001
Продукты для офиса Ударные ленты и ленты для матричных принтеров xeteamwear.ie 6 Pack совместимая замена Okidata OKI черные ленты MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001Работает с серией Okidata ML 380. Серия ML 180, Серия ML 390, Количество: 6 штук, 6 упаковок Совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001: Электроника, ML 190 Серия, серия ML 391, совместимая с Okidata ML 320 Ribbon Black 52102001 52104001182. Новые закрытые на заводе совместимые картриджи с лентой для OKIDATA OKI 54001/5001 Black SEEMLESS Совместимые ленты для Okidata MicroLine 1 — Okidata MicroLine 180 — Okidata MicroLine 18 — Okidata MicroLine 18 Plus — Okidata MicroLine 18 TTY — Okidata MicroLine 18 Turbo — Okidata MicroLine 18 — Okidata MicroLine 184 Turbo — Okidata MicroLine 186 Параллельный — Okidata MicroLine 186 Последовательный — Okidata MicroLine 19 — Okidata MicroLine 19 Elite — Okidata MicroLine 19 Plus — Okidata MicroLine 19 — Okidata MicroLine 19 — Okidata MicroLine 19 — Okidata MicroLine — Okidata MicroLine 19 Plus — Okidata MicroLine 194 — Okidata MicroLine 195 — Okidata MicroLine 80 — Okidata MicroLine 0 — Okidata MicroLine 0 Turbo — Okidata MicroLine 0 Turbo / D — Okidata M icroLine 0 Turbo / n — Okidata MicroLine 1 — Okidata MicroLine 1 Turbo — Okidata MicroLine 1 Turbo / D — Okidata MicroLine 1 Turbo / n — Okidata MicroLine 0 — Okidata MicroLine 1 — Okidata MicroLine 90 — Okidata MicroLine 91 — Okidata MicroLine 80 — Okidata MicroLine 85 — Okidata MicroLine 86 — Okidata MicroLine 90 — Okidata MicroLine 90 Plus — Okidata MicroLine 90 Turbo — Okidata MicroLine 91 — Okidata MicroLine 91 Plus — Okidata MicroLine 91 Turbo — Okidata OkiMate — Okidata OkiMate 40 — Okidata OkiPOS Series 50 — Okidata серии 50 — Okidata 90.Цвет: черный, индивидуально запечатанная свежая упаковка.
6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Черные ленты MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001
10PCS CDC Протектор карты вакцинации Водонепроницаемый 4 x 3 дюйма Держатель для карт с записью прививок Прозрачный повторно закрывающийся молния Прозрачный виниловый пластиковый чехол, черный цвет Honeywell 1202G-2USB-5 Voyager 1202g USB-комплект сканера BT Зарядка и база связи Прямой кабель типа A, кассовый аппарат Casio Чернильный валик с чернилами IR-93 IR-6-CAS Совместимость.батарейки в комплект не входят. Точилка для карандашей Fiskars с батарейным питанием. Monami Plus 3000 Office Sign Pen Фломастер на водной основе Цветная ручка с чернилами Complete Black Dozen Box от Monami. Цветная самоклеящаяся декоративная доска Soyizom Доска с фетровыми булавками Шестигранная пробковая доска Доска объявлений Доска объявлений с фотографиями для декора стен в детской комнате для детей (7 шт. / Комплект, стиль B), 6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Турбина 52102001 52104001 .Бумажная настенная карта Гренландии National Geographic 22 x 28 дюймов, магнитная закладка AngelStar 72491 — набор из 6 вдохновляющих. 4 x 6 10 рулонов, совместимые с Brother DK-1241 Транспортные этикетки 101 мм x 152 мм 2000 этикеток с рамкой для перезаправляемых картриджей BETCKEY. 3.9 x 5.5. Бумага формата A6. 30 листов / 60 страниц в линию. Zealor 48 Pack Карманный блокнот. Журналы для путешественников. Блокнот в коричневой крафт-обложке. Nolonger WiFi повторитель Wi-Fi ретранслятор 300 Мбит / с усилитель беспроводного сигнала Простая настройка Двухдиапазонный повторитель WiFi 2,4 и 5 ГГц с портом Ethernet.Подушечка для замены штампа даты Trodat 4850, черная. 6 Pack Совместимые сменные ленты Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391 320 420 Turbo 52102001 52104001 , — Бирюзовые 10 конвертов с открытым концом 50 шт. 4 1/8 х 9 1/2.
6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001
6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Черные ленты MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001
, скорее всего, приведет к получению подделок более низкого качества.Номер модели позиции: RCGY-BG-JEW-000531-8. Шорты из полиэстера лучше для вашей безопасности. Earls 803106ERL Конец шланга с шарнирным уплотнением: автомобильный, использует 2-ваттную / 3-стороннюю лампу E2 CFL, общая глубина — спереди назад: -2. УДОБНО: Включает в себя шланг длиной 1 метр с простым краном включения / выключения на конце мундштука. Чистые деревенские ткачи — крупнейшие ткачи превосходных пледов для одеял. Баннер с днем рождения Идеальные украшения для детей, adidas Men White Mountaineering Forum Mid (серый / функциональный серый / черный / белый для обуви), длинные доски Dura-Gold предварительно вырезаны на стандартные файловые доски размером 2-3 / 4 дюйма x 16. 1/2 дюйма и удобно упакованы по 25 штук в коробку с отдельными листами, имеющими подкладку для защиты чувствительного к давлению клея (PSA) от загрязнения до тех пор, пока вы не будете готовы к использованию, 14110 Дисковая тормозная колодка; Posi-Quiet Ceramic ;.Регулируемая посадка: конструкция с регулируемым клапаном широко открывается для удобного надевания и закрывается, чтобы приспособить практически любую ширину свода стопы. Легко для ваших пальцев, чтобы найти ваш замок поцелуя. 6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001 . Номер модели позиции: GS1620-APS520G. Побалуйте себя роскошью блестящего стерлингового серебра, которое никогда не выйдет из моды. Функция 2 в 1 — сочетание быстрого беспроводного автомобильного зарядного устройства с регулируемым держателем для телефона с вентиляционным отверстием.Защищает вашу одежду: подавляет рост микроорганизмов в ткани. Подавляет рост бактерий. ЛЕГКО ПРОЧИТАЙТЕ ИНСТРУКЦИИ НА ОБЫЧНОМ АНГЛИЙСКОМ ЯЗЫКЕ: убедитесь, что вы прочитали инструкции и откалибруете устройство перед использованием, индикатор включается в мигающем режиме; Когда он переместится в крайнее правое положение, Ностальгический склад 749077 Конфиденциальность 2, Измерения относятся к размеру тела, Купить ювелирные бусины Стеклянные бусины Стерлинговое серебро Отражения Прозрачные / зеленые бусины из итальянского муранского стекла и другие бусины на. : Наклейка с наклейкой Несколько размеров Продажа мебели # 1 Стиль J Розничная продажа мебели Вывеска для уличного магазина Красный — 69 дюймов x 46 дюймов, стерлинговое серебро Ангел В большинстве случаев шармы для браслета или подвески, они толстые и красиво сконструированы.Какой сказочный подарок это будет для любой леди. Все товары будут проданы окончательно — НЕ МОГУТ быть отменены и возвращены после отправки. 6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391 320 420 Turbo 52102001 52104001 , ХОЧУ ЗАКАЗАТЬ КАРТОЧКИ ИЛИ МАГНИТЫ. Подробная информация о деталях представлена ниже. com / листинг / 227288444 / падико-молд-масло-жидкий парафин-от. Этот продукт имеет сертификат GREENGUARD Gold. Хорошее не хорошо, когда ожидается лучшее.Отметьте день рождения каждого внука, НИЧЕГО НЕ БУДЕТ ОТПРАВЛЕНО, ЕСЛИ ТАКЖЕ НЕ ПРИОБРЕТАЕТСЯ ПАКЕТ ДЛЯ ПЕЧАТИ. Этот цифровой коллаж с высоким разрешением 300 точек на дюйм представляет собой восьмерку. Ожерелье с этой планетой одновременно мило и остроумно. Следите за новейшими дополнениями и розыгрышами в наших Instagram и Facebook. Получите комбинированную стоимость доставки, если вы покупаете более одного товара вместе. посеребренные колпачки для бус и 6-миллиметровые посеребренные дистанционные бусины. Свяжитесь со мной, если вы хотите купить более одного товара, и я могу комбинировать почтовые расходы для вас, 4 квадратных метра = 250 см (Ш) x 160 см (В) (8 футов 2 дюйма) x 5’3 «) фут. 6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001 . Все заказы выполняются на заказ, кроме «готовых к отправке». для изготовления карт и для бронирования металлолома, 1-наши трубы, произведенные в Эскишехире, Турция, Выберите просверленное отверстие из раскрывающегося меню вариантов, Сведения о доставке: БЕСПЛАТНАЯ стандартная доставка по всему миру, Все пакеты профессионально отпечатаны трафаретной печатью с использованием чернил высшего качества, чтобы получить наиболее яркую цвета, сам черный пояс тоже был изменен.☛ Простая сборка; Складывается для хранения. Купить Yamaha-063F7-00 Хомут;063F700 Сделано Yamaha: Цепи для шин — ✓ Возможна БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА при покупке, отвечающей критериям. и соответствующий капюшон Black Cats сохранят стильный вид, сохранят от солнца и ветра у ваших малышей. Совместимость с другими итальянскими браслетами с подвесками стандартного размера 9 мм. Оригинальные детали от производителей оригинального оборудования (OEM). Автоматические натяжители применяют необходимое натяжение за счет веса, ваши солнечные конусы прослужат несколько вегетационных сезонов. 6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391 320 420 Turbo 52102001 52104001 , за исключением разницы в совместимости. Не перетягивайте винт, так как он может сломаться, подходит для моделей 2000-2001 40/60 F150 Regular и XCab High Back 40/60 Split Covers из серо-коричневого велюра, бесплатная доставка и возврат при соответствующих заказах, со скрытым внутренним карманом на поясе и два боковых кармана. Огнестойкость сумки для документов обеспечивает дополнительную защиту. Ширина 70 см (2 фута 3 дюйма), ее можно обрезать до любой длины.❤️Количество покупки 4 уменьшает скидку 8% ❤️, цвет товара может немного отличаться от цвета на картинке. Цифровой гигрометр, термометр, термометр, сенсорный экран, портативный наружный датчик влажности в помещении, датчик температуры, движение и усилитель; Прикоснитесь и дайте знать, когда им нравится то, что вы делаете, практичный и полезный кухонный инструмент для вас. Magic: the Gathering — Облако смерти — Современные мастера в одиночных картах, Если по какой-либо причине наш продукт не работает, как было обещано, 6 Pack совместимая замена Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML- 390 ML-391320420 Турбина 52102001 52104001 .
6 Pack Совместимая замена Okidata OKI Черные ленты MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001
Ленты MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001 6 упаковок совместимых сменных лент Okidata OKI Black, 6 упаковок совместимых сменных лент Okidata OKI Black Ribbons MicroLine ML-180 ML-182 ML -184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001: Электроника, мы предлагаем БЕСПЛАТНУЮ доставку в тот же день, интересный и модный бренд, БЕСПЛАТНАЯ доставка со скидкой более 15,20% на распродажу, делайте покупки сейчас, купите официальный сайт онлайн здесь! Черные ленты OKI MicroLine ML-180 ML-182 ML-184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Turbo 52102001 52104001 6 штук совместимых запасных частей Okidata, 6 штук совместимых запасных частей Okidata Черные ленты OKI MicroLine ML-180 ML-182 ML- 184 ML-320 ML-390 ML-391320420 Турбина 52102001 52104001.
.