Продажа квадроциклов, снегоходов и мототехники
second logo
Пн-Чт: 10:00-20:00
Пт-Сб: 10:00-19:00 Вс: выходной

+7 (812) 924 3 942

+7 (911) 924 3 942

Содержание

Перевозка грузов между городами: грузоперевозки межгород

Уральск, Центральный рынок

Сегодня 21:21

Семей Сегодня 21:19

Караганда, Казыбекбийский район Сегодня 21:11

Талдыкорган, Микрорайон 1

Сегодня 21:09

Услуги перевозки и хранения на складе

Уральск, Центральный рынок Сегодня 21:21

Семей Сегодня 21:19

Караганда, Казыбекбийский район Сегодня 21:11

Талдыкорган, Микрорайон 1

Сегодня 21:09

Алматы, Наурызбайский район Сегодня 21:00

▷ ГРУЗОПЕРЕВОЗКИ ГАЗЕЛЬ БОРТ КИЕВ

Компания «Мотор-М» в Киеве и Одессе предлагает вам воспользоваться такой популярной услугой, как «грузоперевозки ГАЗелью борт». По своим свойствам именно открытая Газель является универсальной. Машина славится не только своей маневренностью, но и тем, что идеально проходит под мостом, въезжает в подземный паркинг, а также транспортирует тот груз, который не уместится в крытый фургон. В бортовике просто закрепить груз, независимо от его веса, габаритов. Компания готова предложить вам бортовую Газель в Киеве по наиболее выгодным ценам.

Бортовые грузоперевозки – это услуга по транспортировке груза различного назначения, комплектации, веса. Она особенно актуально в случае, если отсутствует возможность разобрать и собрать конструкцию. Перевозка при помощи бортовых грузовиков отличается специфическими особенностями, что и делает данный вид транспорта преимущественным.

Почему выгодно сотрудничать с компанией «Мотор-М»?

• Четкое время подачи машины с открытым верхом

• Оперативная и бережная транспортировка

• Возможность организовать переезд в любое время

Бортовые транспортировки используются для перевозки следующих грузов:

• Неразборных, длинномерных элементов

• Негабаритных грузов

• Механизмов, станков, а также устройств, использующихся в промышленности

• Стройматериалов, контейнеров

• Бытовок, палаток, а также открытых прилавков

• Арматуры, кирпича

Перевозка открытым способом иногда может быть дешевле, чем услуга, оказываемая при помощи тентованной Газели, либо фургона. Но идеально подходит исключительно для тех грузов, которые не способны поместиться в закрытый кузов, не подвергаются негативному влиянию окружающей среды. Грузчики компании максимально деликатно, аккуратно разместят груз, осуществят фиксацию. Это необходимо с той целью, чтобы снизить возможность нанесения повреждений товару.

Грузчики, которые работают в компании, отличаются огромным опытом работы, что поможет выбрать наиболее удобный, безопасный метод транспортировки. Перед началом работы сотрудники компании заключают договор, где будет зафиксирована ответственность, если транспортируемому имуществу будет нанесен вред.

Особенностью компании является то, что сотрудники никогда не опаздывают, приезжают на объект в точно оговоренное время. Если желаете воспользоваться качественными услугами, то заказывайте ГАЗель БОРТ в компании «Мотор-М», которая отвечает за качество.

Удачного Вам переезда!

грузовое такси Газель по выгодным ценам (город, межгород, Россия) — «Грузовичок12»

Компания «Грузовичок12» предоставляет услуги грузоперевозок (город, межгород, Россия) по низкой стоимости, но не в ущерб качеству. Сотрудничаем как с физическими, так и с юридическими лицами, принимаем наличный и безналичный расчет. Мы работаем на рынке грузовых перевозок больше 6 лет. В нашем автопарке 10 машин для грузоперевозок различной тоннажности — от 1,5 до 7 тонн (изотерм, рефрижератор, фургон, тент).

Особенности грузового такси

У вас планируется переезд или просто нужно доставить с одного места в другое определенное количество товара? Обычное такси для этих целей не подойдет, а нанимать фуру не всегда целесообразно. Поэтому наша фирма готова предоставить вам выгодную альтернативу — грузовое такси. Стоимость аренды такого транспорта значительно ниже, а для небольших грузоперевозок подходит как нельзя лучше.

Вызвать грузовое такси без посредника — это идеальный вариант решения вопроса с небольшим переездом. По сути, это аренда ТС, но с водителем и в полной технической исправности, ведь на вызов мы отправляем только такие автомобили.

Грузоперевозки при помощи грузового такси «Газели» по городу обладают лучшей манёвренностью, чем полноценные грузовики, поэтому даже по плохим дорогам осуществить доставку груза будет значительно проще и быстрее. Такой вид ТС для перевозки подается максимально быстро — по принципу службы обычного такси. Если вам нужно перевезти что-то очень срочно, то личный грузовой автомобиль для грузоперевозок — именно то, что нужно!

Преимущества заказа грузоперевозок в компании «Грузовичок12»

  • быстрая подача авто — мы подаем машину за 20–30 минут;
  • услуга грузоперевозки «под ключ» — не тратьте время на упаковку вещей и вынос до места подачи авто, мы берем это на себя;
  • доставка товаров, которые требуют определенного температурного режима;
  • большой собственный автопарк – МАЗ «Зубренок», Газели «Пирамида», «Ивеко», «Валдай», «Фермер».

У нас вы можете заказать грузовое такси «Газель» с длиной кузова 3, 4, 5 метров по приемлемой стоимости. Если у вас возникли трудности при самостоятельном выборе типа ТС, обращайтесь за помощью к нашим консультантам по указанным телефонам.

Цена аренды грузового такси

Цена на грузоперевозки (Газель) зависит от времени аренды автомобильного транспортного средства. Однако обратите внимание, что мы не являемся посредником, а потому мы предлагаем действительно недорогие услуги.

Узнать сколько стоит грузовое такси вы можете у наших менеджеров. Для этого вам не обязательно звонить по телефону — можете просто отправить заявку, и мы перезвоним в удобное для вас время.

Как заказать грузоперевозки?

Компания «Грузовичок12» предлагает вам выгодный вариант грузоперевозки без посредника как по межгороду, так и по России. В автопарке имеются транспортные средства различного конструкционного типа — с закрытым и открытым верхом, «Пирамида», «Катюша». Заказать грузотакси «Газель» или другой вид ТС для грузоперевозок вы можете, воспользовавшись специальной формой.

Открытая газель

Несмотря на широкий выбор грузовых газелей (тентовых, будок, цельнометаллических и др.), открытые (бортовые) машины встречаются не так часто.  На таких автомобилях нельзя перевозить по Москве и  Московской области домашние вещи (дождь и снег могут их повредить). На них не доставить партию бытовой химии и не перевезти продукты в магазин. Именно по этой причине  грузовые автомобили с открытым верхом не так часто встречаются в столице и  Подмосковье.  Однако существует ряд направлений, для которых заказ подобного открытого грузовика  является наиболее подходящим видом транспорта. И компания «100ПЕРЕЕЗДОВ» с радостью предоставит вам такие автомобили (с длинной кузова 3, 5 и 6 метров) для выполнения любых задач.

ОТКРЫТАЯ ГАЗЕЛЬ ДЛЯ ГРУЗОПЕРЕВОЗОК.

Перевозка любого товара, материалов и оборудования, где требуется услуги верхней погрузки  требует наличия открытого верха у грузового автомобиля.   Мы с радостью предложим вам газели без тента, а так же автомобили со сдвигающейся крышей.   Например, многие наши газели, в том числе с длинной кузова 5 и 6 метров, имеют специальную, заказываемую нами  конструкцию тента, позволяющую сдвигать его верхнюю часть  (как на фуре). Таким образом по прибытии на место погрузки большая тентовая газель за несколько минут оказывается открытой-бортовой.   А после погрузки верхняя часть тента снова задвигается и вашему грузу не страшны ни снег ни дождь ни мелкая дорожная пыль. Если вы хотите узнать сколько стоит грузоперевозка, вам достаточно позвонить нашему сотруднику и он с радостью проконсультирует вас по всем вопросам.

Незаменимыми являются услуги открытой газели и при перевозке станков и негабаритного (высокого) груза.  С некоторыми нашими заказчиками из Москвы, Мытищ, Щелково, Королева, Пушкино, Балашихи, Ивантеевке мы работаем уже много лет.  И будем рады видеть среди наших заказчиков и вашу компанию.

Организация доставки высоких станков и оборудования зачастую ограниченна высотой тента или будки грузового автомобиля. В  газелях у которых верх открыт такой  проблемы нет.  Высота перевозимого груза ограниченна только техникой безопасности и правилами транспортировки грузов.

ЗАКАЗАТЬ ОТКРЫТУЮ ГАЗЕЛЬ.

Еще одним направлением, в котором используются услуги газель без тента и будки, является заезд на территорию и в помещения с невысоким въездом или пролетом.  Например, в гаражные многоярусные комплексы.  Если вам необходимо заказать грузовичок и вывезти вещи из квартиры в двух или трех ярусный гараж, то вам потребуется именно такая газель. Ни бортовая, ни тентовая машина ГАЗ-3302 — газель, ни многочисленные импортные аналоги не проходят в такой гаражный комплекс.  То же касается многочисленных подземных паркингов и других невысоких заездов.

Если вам необходимо оформить заказ на наш транспорт для перевозки строительных материалов,  саженцев крупных растений или иных задач, вы можете связаться  с нашим менеджеров в любое удобное для вас время.  Наш сотрудник  с готовностью, грамотно и  доброжелательно ответит вам на все интересующие вас вопросы по грузоперевозкам.  Он поможет вам рассчитать маршрут, определит стоимость   вашей перевозки и запишет удобное для вас время и адрес подачи автомобиля.  Стоит отметить, что хотя у нашей компании достаточно большой парк открытых газелей, желательно оформлять заявку на перевозку за один или два дня.    В то же время, если вам необходимо доставить ваш  товар (с верхней загрузкой) день в день, то мы всегда сможем помочь вам, возможно с некоторой отсрочкой по времени.

ОТКРЫТАЯ (БОРТОВАЯ) ГАЗЕЛЬ С ПРОПУСКОМ В ЦЕНТР МОСКВЫ.

Наибольшее количество заказов в нашей компании связанно с доставкой строительных материалов и оборудования в центр города. Поэтому все наши газели имеют специальные пропуска на въезд в центр столицы.  Стоит отметить, что такие пропуска есть далеко не в каждой транспортной компании, и многим грузовым (бортовым) машинам для заезда в пределы третьего транспортного и садового кольца приходится дожидаться вечернего времени, когда открывается (разрешается) въезд для грузовиков  г/п свыше 1000 кг (в том числе газелям).  Наша компания с радостью доставит ваш груз в любое удобной для вас время в любую точку Москвы. И на Таганку и на Николо-Ямскую улицу и в любую точку Центрального округа. 

При этом стоит отметить, что мы работаем не только по Москве, но и по многим городам Московской области (например, по Мытищам, Щелково, Королеву, Пушкино, Балашихе, Ивантеевке, Ногинску, Электростали, и многим другим)

Если вам потребовались качественные и недорогие услуги открытой газели, то транспортная компания «100ПЕРЕЕЗДОВ» всегда к вашим услугам. Наши цены приятно удивят вас, а качество выполненных работ, надеемся, вам понравится.

Будем рады вашему звонку. Мы не подведем вас.

грузовой транспорт в разных модификациях

Перевозки на а/м Газель по Москве — наиболее востребованная услуга среди населения и организаций, так как является самой недорогой и удобной. Если вам предстоит перевозка мебели, бытовой техники, пианино, возникла необходимость в небольшом переезде, то перевозка на автомобиле Газель самый верный и недорогой выбор. Заказывают а/м Газель при любых видах переездов, офисных, квартирных, дачных. Сделав заказ в нашей компании мы гарантируем вам лучшую цену, выполним ваш заказ быстро и качественно.

Газель недорого в ТК Автовозов на выгодных условиях

Заказать грузоперевозки (Москва и Московская область) дешево можно в транспортной компании Автовозов, воспользовавшись услугой найма грузовой газели. В целом это самый оптимальный транспорт, который пользуется популярностью во всех городах России благодаря небольшой стоимости аренды и возможности перевозить грузы при переездах в один заход.

Автовозов предлагает перевозки дешево: наши цены на найм машины и работу грузчиков доступны каждому. При перевозке мебели недорогая грузовая машина газель на 1, 1.5 и 3 т используется чаще всего. Если вас интересуют недорогие перевозки – позвоните нам!

В нашей компании вы можете заказать газель на 1 час или больший период времени. ТК Автовозов осуществляет грузоперевозки на газели по ценам, ниже среднерыночных. Воспользовавшись арендой грузового транспорта, вы обеспечите своему имуществу безопасность в процессе транспортировки.
Наш автопарк позволяет предоставлять клиентам грузовой транспорт таких моделей как открытая газель и закрытая газель с разными типами кузова. В зависимости от особенностей груза, менеджер транспортной компании подскажет оптимальный в конкретном случае выбор транспорта. Если вы уже определились с выбором, заказать газельнедорого в Москве и Подмосковье можно по телефону, а также заполнив специальную форму заказа на сайте.

Наша компания успешно занимается доставкой грузов по всей России в течение последних 5-ти лет. Благодаря накопленному опыту мы досконально изучили все нюансы и тонкости перевозки различных грузов. Для удобства клиентов мы также предлагаем услуги грузчиков и сборщиков мебели. Такой подход сделал возможным проведение срочного переезда одним днём.

Презентация услуги

Газель Москва, заказать газель в Москве

В Москве и в Подмосковье теперь работает наша компания, которая предлагает заказать Газель под любые нужды. Для этого в распоряжении частных лиц и организаций есть автопарк нашей компании, где представлены машины не только разной грузоподъемности, но и отличающиеся по проходимости, наличию и отсутствию кузова с закрытым верхом, а также по другим характеристикам. Заказать Газель вы можете по телефону, поговорив со специалистом нашей компании. Для этого необходимо позвонить в удобное для вас время в промежутке с 9 до 21 часа, объяснив нашему специалисту весь перечень работ. Не забудьте арендовать у нас грузчиков, которые помогут полностью исключить ваше участие в рабочем процессе.

Что касается аренды Газели, то в нашей компании вы можете взять абсолютно любой автомобиль, подходящий для разных нужд. Например, заказать Газель можно для перевозки строительного материала. Это будет автомобиль с открытым верхом, кузов которого может иметь длину от 3 до 6 метров. На нем можно перевозить пиломатериал, арматуру, профилированную трубу, утеплитель, а также кровельный материал и другие виды грузов. Здесь кузов не защищен дополнительным брезентом, а, значит, что-то ценное на нём перевозить опасно.

Напротив, у нас вы можете заказать Газель с закрытым кузовом. Здесь будет располагаться тент. Тент представляет собой брезент, который защищает содержимое кузова от непогоды и посторонних глаз. Грузить в такие автомобили можно только при помощи грузчиков, поскольку сверху погрузка предметов невозможна. Такие Газели часто называют грузовым такси, поскольку их используют частные лица и организации, для доставки товара на склад, в офис, в квартиру и частный дом. Именно на таких машинах перевозят мягкую и корпусную мебель, электронику, бытовую технику и другие объекты интерьера и обыденности человека.

В нашей компании доступно заказать Газель с увеличенным количеством пассажирских мест. Это может быть Газель марки «Фермер», в которой предусмотрено три дополнительных места. Благодаря этому, вы сможете не только перевозить груз в кузове автомобиля, но брать с собой бригаду монтажников, либо бригаду грузчиков.

Amazon.com: Кобура MyHolster Gazelle Open Top с двумя слотами для Walther 7. 65: Спорт и туризм


В настоящее время недоступен.
Мы не знаем, когда и появится ли этот товар в наличии.
Марка Моя кобура
Материал Кожа
Цвет коричневый

  • Убедитесь, что это подходит введя номер вашей модели.
  • Премиум воловья кожа
  • Формованный для надежной посадки
  • Кожаная подкладка для защиты отделки вашего пистолета
  • Фото — стоковое фото, все кобуры сделаны для каждого указанного оружия.

Mercedes-Benz Gazelle 1978 года, подержанное, $ 11 995 | VIN B1198

Мы знаем, почему вы смотрите на этот родстер.В этих репродуцированных автомобилях Mercedes-Benz Gazelle есть что-то крутое, когда все сделано правильно. У него культовые линии, стильная комбинация кремово-коричневого цвета и механическая коробка передач, чтобы взять под контроль проселочные дороги. Все это обеспечивает привлекательный и выразительный откидной верх по привлекательной цене.

Внешний вид до Второй мировой войны с гораздо более современной надежностью — вот что действительно предлагает этот. Вы не собираетесь вводить судей в заблуждение, заставляя их думать, что это настоящий Мерседес. Вместо этого, это кабриолет для тех, кто любит получать одобрительный кивок в трафике от других, которые испытывают такое же желание ностальгии, что и вы.Эта Gazelle имеет отличные классические черты, от хрома на фарах Lucas до искусственных внешних выхлопных отверстий. Эти тела всегда выглядят изысканно в кремовых тонах с длинными перекатывающимися крыльями коричневого цвета. Поскольку он спроектирован с учетом подлинной европейской изысканности, спереди есть высокая решетка радиатора в стиле Mercedes, яркая проволочная накладка на колеса по всем четырем углам и блестящая полноразмерная запаска, установленная сзади.

Откройте спортивные двери с низким вырезом, и вы увидите неподвластный времени красивый коричневый интерьер.Сядьте в ковшеобразное сиденье, и вас встретит деревянное трехспицевое спортивное рулевое колесо. Справа от вас — великолепно выглядящий полный набор приборов в винтажном стиле, установленных на деревянной панели. AM / FM / кассетная стереосистема легко адаптируется, поэтому она позволяет вам отправиться на воскресную поездку, слушая самые современные мелодии, которые вы хотите. А если во время вашего отсутствия погода испортится, полный складной верх и боковые шторы с комфортом доставят вас домой.

Под капотом находится мотор Ford объемом 2,3 литра.Этот силовой агрегат Pinto заработал надежную репутацию, а наличие запасных частей лучше и доступнее, чем у любого Mercedes, который вы знаете. У него аккуратная установка, которая показывает, что он находился на хорошем техническом обслуживании, и его надежная работа доказывает это. У вас есть лучший контроль над всем диапазоном мощности этого двигателя благодаря четырехступенчатой ​​механической коробке передач. Вы можете чувствовать себя уверенно, взяв его для небольшого удовольствия, благодаря проворному рулевому управлению и современной резине Firestone на всех четырех углах.

Это чистая и полная классическая копия Mercedes, созданная для автомобилей с открытым верхом. Итак, по такой цене, вы знаете, что эта Газель скоро выйдет из нашего автосалона. Звоните сегодня !!!

Посмотреть больше

Газель Спорт Совладелец на кампусе

Крис Лэмпен-Кроуэлл ( BS ’82, биомедицинские науки ), совладелец местного магазина спортивной одежды Gazelle Sports, будет следующим докладчиком на серии выступлений Форума предпринимательства в бизнес-колледже Хаворт университета Западного Мичигана.

Лэмпен-Кроуэлл выступит в 8 утра в пятницу, 12 февраля, в 2150 Шнайдер Холл. Мероприятие является бесплатным и открытым для публики и начинается с завтрака в 7:30 утра. Требуется предварительный заказ, его можно сделать по телефону (269) 387-6059 или по адресу wmich.edu/business/e-rsvp. Бесплатная парковка предоставляется на участке Fetzer Center, 72F.

Gazelle Sports
С момента открытия в декабре 1985 года в Каламазу, Gazelle Sports выросла из одного магазина в несколько подразделений по всему Западному Мичигану.Помимо местоположения в Каламазу, у Gazelle Sports есть магазины в Гранд-Рапидс, Голландия и Нортвилл. Ритейлер был отмечен за свой успех и высокий уровень обслуживания, в том числе был признан в числе 50 лучших беговых магазинов и Мичиганского малого бизнеса года, а также был удостоен награды The North Face Never Stop Exploring в 2011 году. Помимо продажи спортивной одежды и тренировок продуктов в своих обычных и интернет-магазинах, Gazelle Sports также способствует реализации программ тренировок, помогая сообществу больше узнать о беге и здоровом образе жизни.

Крис Лэмпен-Кроуэлл
Лэмпен-Кроуэлл, уроженец Каламазу и заядлый бегун, является одним из основателей компании Gazelle Sports. Он создал, провел и организовал сотни мероприятий и программ в сообществе, таких как Borgess Run Camp и Greater Kalamazoo Girls on the Run. Лэмпен-Кроуэлл также основал Ассоциацию розничных торговцев и ресторанов Каламазу в центре города и является менеджером по бренду и взаимодействию в центре Каламазу, а также председателем правления Независимой ассоциации бегущих магазинов розничной торговли.

О Форуме предпринимательства

Форум предпринимательства — это ежемесячная серия, проводимая Колледжем бизнеса Хаворт при ВМУ и призванная донести истории о предпринимательском успехе до более широкого сообщества Каламазу. Серия посвящена предпринимателям и уникальным историям успеха стартапов. Чтобы узнать больше о серии, посетите wmich.edu/business/entrepreneurship-forum.

Спикеры Форума будущего предпринимательства

• 18 марта: Стив Лахам, Chocolates by Grimaldi
• 15 апреля: Сьюзан Сонди, Emerald eCycling

Для получения дополнительной информации или для регистрации свяжитесь с Кейтлин Смит по телефону (269) 387-6059 или посетите wmich.edu / business / e-rsvp. Чтобы предложить предпринимателя, которого следует рассмотреть для участия в сериале, свяжитесь со Стейси Маркин по адресу [email protected].

Открытое исследование краткосрочной инфузии обинутузумаба на одной руке у пациентов с ранее нелеченой распространенной фолликулярной лимфомой — Просмотр полного текста

Онкологический центр Скалистых гор; Медицинская онкология
Боулдер, Колорадо, США, 80303
BRCR Medical Center, Inc.
Плантация, Флорида, США, 33322
Центр рака и заболеваний крови
Bethesda, Мэриленд, США, 20817
Summit Medical Center
Florham Park, Нью-Джерси, США, 07932
San Juan Oncology Associates
Фармингтон, Нью-Мексико, США, 87401
Центр рака Уилламетт-Вэлли — 520 Country Club
Юджин, Орегон, США, 97401-8122
Texas Onc-Central Austin CA Ct
Остин, Техас, США, 78731
Онкологический центр Техаса
Остин, Техас, США, 78731
NOHC — Núcleo de Oncologia e Hematologia do Ceará
Fortaleza, CE, Brazil, 60115-281
Hospital das Clinicas — UFRGS
Porto Alegre, RS, Brazil,-903
Centro de Pesquisas Oncologicas — CEPON
Флорианополис, Южная Каролина, Бразилия, 88034-000
Больница Амарал Карвалью
Jau, SP, Brazil, 17210-120
Klinikum Chemnitz gGmbH, Klinik für Innere Medizin III, Hämatologie und Onkologie
Хемниц, Германия, 09113
Städtisches Klinikum Dessau
Дессау-Росслау, Германия, 06847
Universitätsklinikum Frankfurt; Медицинская клиника II; Онкология
Франкфурт, Германия, 60596
OncoResearch Lerchenfeld GmbH
Гамбург, Германия, 22081
Klinik der Uni zu Köln; Я.Med. Клиника
Кельн, Германия, 50937
Onkologische Praxis Landshut
Ландсхут, Германия, 84036
Onkologische Schwerpunktpraxis Lübeck
Любек, Германия, 23562
Онкологический центр Чиба
Тиба, Япония, 260-8717
Университетская больница Хоккайдо
Хоккайдо, Япония, 060-8648
Городской медицинский центр Кобе Больница общего профиля
Хиого, Япония, 650-0047
Университетская больница Киндай
Осака, Япония, 589-8511
Больница Национального онкологического центра
Токио, Япония, 104-0045
Больница Института рака JFCR
Токио, Япония, 135-8550
Albert Schweitzer Ziekenhuis — loc Dordrecht
Дордрехт, Нидерланды, 3318 AT
Martini Ziekenhuis
Гронинген, Нидерланды, 9728 MG
Hospital De Txagorritxu; Servicio de Hematologia
Витория, Алава, Испания, 01009
Больница Университарио Пуэрта-дель-Мар; Servicio de Hematologia
Кадис, Кадис, Испания, 11009
Госпиталь дель Мар; Servicio de Hematologia
Барселона, Испания, 08003
Больница Университарио ла Пас; Servicio de Hematologia
Мадрид, Испания, 28046
Больница General Universitario J.М. Моралес Месегер; Servicio de Hematología
Мерсия, Испания, 30008
Университетская больница Уэльса
Кардифф, Великобритания, CF14 4XW
Kings College Hospital NHS Foundation Trust
Лондон, Великобритания, SE5 9RS
Портсмутские больницы NHS Trust — Госпиталь королевы Александры
Портсмут, Великобритания, PO6 3LY
Гематологическое отделение Королевской больницы Корнуолла

Abstract

Основной проблемой малярии является отсутствие инструментов для точной и своевременной диагностики в полевых условиях, которые имеют решающее значение для ведения больных и эпиднадзора.Микроскопия, наряду с экспресс-диагностическими тестами, в настоящее время является основой диагностики малярии в большинстве эндемичных регионов. Однако эти методы имеют несколько ограничений. В этом исследовании оценивалась точность нового устройства для быстрой диагностики малярии Gazelle на основе образцов, собранных в перуанской Амазонии в период с 2019 по 2020 год. Диагностическая точность сравнивалась с результатами микроскопии и двух быстрых диагностических тестов (SD Bioline и BinaxNOW) с использованием 18ssr вложенной ПЦР в качестве эталонный тест. Кроме того, для количественной оценки паразитов использовался анализ ПЦР в реальном времени (ПЭТ-ПЦР).Из 217 включенных и протестированных пациентов с лихорадкой 180 образцов (85 P , vivax и 95 отрицательных) были включены в окончательный анализ. При использовании вложенной ПЦР в качестве золотого стандарта чувствительность и специфичность Gazelle составила 88,2% и 97,9% соответственно. Используя пороговое значение 200 паразитов / мкл, чувствительность Gazelle для образцов с более чем 200 мкл / мкл составила 98,67% (95% ДИ: от 92,79% до 99,97%), тогда как чувствительность для образцов менее 200 мкл / мкл (n = 10) составлял 12,5% (95% ДИ: от 0,32% до 52.65%). Чувствительность и специфичность Gazelle были статистически аналогичны микроскопии (чувствительность = 91,8, специфичность = 100%, p = 0,983) и выше, чем у SD Bioline (чувствительность = 82,4, специфичность = 100%, p = 0,016) и BinaxNOW (чувствительность = 71,8%). , специфичность = 97,9%, p = 0,002). Диагностическая точность Газели по выявлению малярии Р . vivax инфекций были сравнимы с результатами световой микроскопии и превзошли оба ДЭТ даже при наличии инфекций с низкой паразитемией.Производительность «Газели» делает ее ценным инструментом для диагностики малярии и активного выявления случаев заболевания, который можно использовать в различных эндемичных по малярии регионах.

Образец цитирования: Valdivia HO, Thota P, Braga G, Ricopa L, Barazorda K, Salas C, et al. (2021) Полевая валидация магнитооптического устройства обнаружения (Газель) для портативной диагностики в пунктах оказания медицинской помощи Plasmodium vivax . PLoS ONE 16 (6): e0253232. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232

Редактор: Luzia Helena Carvalho, Instituto Rene Rachou, BRAZIL

Поступила: 9 февраля 2021 г .; Принята к печати: 31 мая 2021 г .; Опубликовано: 22 июня 2021 г.

Это статья в открытом доступе, свободная от всех авторских прав, и ее можно свободно воспроизводить, распространять, передавать, изменять, строить или иным образом использовать в любых законных целях. Работа сделана доступной по лицензии Creative Commons CC0 как общественное достояние.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в рукописи и S1 Fig, S1 Table.

Финансирование: Эта работа была частично профинансирована Hemex Health, США в рамках CRADA 18-10302 и Отделом по надзору за здоровьем вооруженных сил Министерства обороны США (AFHSD) / Global Emerging Infections Surveillance (GEIS) Branch, PROMIS ID P00144_20_N6_02, 2019- 2020. Спонсоры предоставили поддержку в виде заработной платы авторам PT и KB, но не сыграли никакой дополнительной роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.Конкретные роли этих авторов сформулированы в разделе вкладов авторов.

Конкурирующие интересы: PT является сотрудником Hemex Health и отчитывается о личных и других гонорарах от Hemex Health, KB является сотрудником Vysnova и сообщает о личных гонорарах помимо представленных работ. CAJ, DKB, HOV, GB, LR, KB, CS и DKB сообщают о грантах и ​​нефинансовой поддержке Hemex Health, США во время проведения исследования. Это не влияет на нашу приверженность политике PLOS ONE в отношении обмена данными и материалами.

Введение

Малярия — серьезная угроза общественному здоровью, в 2018 г. привела к более чем 228 миллионам случаев заболевания и 405 000 смертельным исходам [1]. Заболевание вызывается пятью различными видами Plasmodium ( P . falciparum , P . vivax , P . malariae , P , ovale и P . ). knowlesi ), что подвергает риску более 40% населения мира [1].Малярия также представляет собой риск для военной оперативной готовности, поскольку в тропических регионах потери людских ресурсов больше, чем травмы, связанные с боевыми действиями [2].

В настоящее время лечение малярии во всех эндемичных регионах, независимо от интенсивности их передачи, назначается после того, как только случаи заболевания подтверждены диагностическим тестом, который представляет собой либо ДЭТ, либо световую микроскопию. Однако оба метода имеют ряд недостатков, ограничивающих их использование. Для световой микроскопии требуется постоянная мощность, высококвалифицированный персонал, длительное время обработки, а на ее чувствительность влияет низкий уровень паразитемии [3].В случае ДЭТ их чувствительность также ограничена при инфекциях с низкой паразитемией, и их универсальность не может быть гарантирована из-за высокого уровня ложноотрицательных результатов из-за делеций HRP2 и HRP3 в P . falciparum [4–6].

Молекулярные подходы, такие как ПЦР и петлевой изотермической амплификации (LAMP), были разработаны для высокочувствительного и специфического обнаружения [7–9]. Однако эти методы могут быть относительно дорогими и требуют лабораторных мощностей и обученного персонала, которые недоступны ни в эндемичных регионах, ни в полевых условиях [10].

Методы на основе

LAMP были широко изучены, и многие варианты были протестированы, показав хорошие результаты в полевых и лабораторных условиях [11–13]. Оптимальные характеристики LAMP объясняются использованием полимеразы Bst, которая считается более устойчивой, чем обычная полимераза Taq, и использованием 4–6 специфичных праймеров [14].

Фотоиндуцированный перенос электронов (ПЭТ-ПЦР) — это анализ в реальном времени, разработанный в качестве инструмента для надзора за малярией в эндемичных условиях [15, 16].Эта методология имеет преимущества по сравнению с традиционной вложенной ПЦР и другими платформами реального времени из-за использования самозатухающих праймеров, короткого времени обработки и простоты проведения реакции [7]. Метод ПЭТ-ПЦР можно использовать как мультиплексную платформу, позволяющую сократить время и стоимость [17].

Тем не менее, по-прежнему существует потребность в высококачественных, эффективных и эффективных с точки зрения затрат инструментах диагностики малярии, позволяющих выявлять случаи малярии на местах и ​​оперативно обнаруживать малярию, которая не только улучшит здоровье пациентов, но и поможет предотвратить передачу и снизить тяжесть заболевания [1, 10].

Чтобы восполнить этот пробел, мы оценили новое быстрое устройство с питанием от батареи, которое позволяет обнаруживать частицы гемозоина в крови инфицированных пациентов по имени Газель. Кристаллы гемозоина образуются в результате полимеризации димеров феррипротопорфирина IX, который является побочным продуктом переваривания гемоглобина, генерируемого всеми видами малярии [18]. Ранее предпринимались попытки использовать гемозоин в качестве биомаркера для диагностики малярии [19–22], многие из них были безуспешными и неприменимыми в полевых условиях [18, 23].

Однако есть многообещающие доказательства того, что магнитооптическое обнаружение потенциально может позволить чувствительную идентификацию малярии. Предыдущее исследование in vitro на P . falciparum показал, что эта технология потенциально может обнаруживать до 40 паразитов на микролитр крови [24]. Более того, обнаружение может происходить на ранних стадиях заражения и поддерживается на разных стадиях жизненного цикла паразита [25]. Кроме того, появляется все больше клинических данных, показывающих, что магнитооптическое обнаружение может быть полезно в P . vivax преобладающие параметры исключения [26].

Предыдущее исследование с использованием Газели показало многообещающие результаты для P . falciparum обнаружение в условиях высокой передачи в Индии [27]. Основываясь на этом исследовании, мы стремились оценить диагностические возможности «Газели» на участке с низким уровнем передачи данных с помощью P . vivax преобладание в перуанском бассейне Амазонки.

Методы

Учебные площадки

Образцы были собраны в результате пассивного эпиднадзора, в котором участвовали участники с лихорадкой в ​​период с 2019 по 2020 год в девяти медицинских учреждениях, расположенных в городе Икитос и близлежащих населенных пунктах.Икитос — столица региона Лорето, расположенного на северо-западе перуанского бассейна Амазонки ( Рис. 1 ). На этот регион приходится 28,7% территории Перу, где заболеваемость малярией в 2019 году составила 1,8% (в 2019 году было зарегистрировано 21 973 случая малярии), что составляет более 90% всех случаев малярии, зарегистрированных в Перу за этот год.

случаев малярии в Лорето распространены в сельских общинах с ограниченным доступом к медицинскому обслуживанию. Большинство случаев вызвано P . vivax в соотношении 4: 1 с P . falciparum . Диагностика малярии в первую очередь основана на микроскопии в соответствии с национальными рекомендациями Перу [28].

Этические соображения

Протокол исследования был одобрен Наблюдательным советом Военно-морского медицинского исследовательского подразделения США 6 (NAMRU-6) в соответствии со всеми применимыми федеральными нормативными актами, регулирующими защиту людей (протокол NMRCD.2007.0004). Взрослые участники предоставили письменное согласие, а несовершеннолетние — письменное согласие и согласие родителей / опекунов.

Размер выборки

Размер выборки был оценен исходя из чувствительности не менее 70% для Газели с относительной точностью 10%, достоверностью 95% и мощностью 80%. В результате минимальный размер выборки составил 165 человек.

Отбор проб и микроскопия малярии

Обученные флеботомисты собрали четыре мл цельной крови от каждого участника венепункцией в стерильные вакуумные пробирки, обработанные ЭДТА. Образцы были доставлены в рамках холодовой цепи в течение двух часов после сбора на объекты NAMRU-6 в Икитосе.Для каждого участника были приготовлены два тонких и толстых мазка крови, окрашены 10% Гимза и прочитаны двумя микроскопистами в лаборатории NAMRU-6 в Икитосе. Результаты были предоставлены после считывания 200 иммерсионных полей, а положительные слайды были количественно определены с использованием 6000 лейкоцитов / мкл крови в качестве эталона. Собранная кровь использовалась для RDT и тестирования Gazelle в Икитосе, а аликвота была отправлена ​​в лабораторию NAMRU-6 в Лиме для экстракции ДНК и молекулярных анализов.

Тестирование устройств РДТ и Газель

Два RDT использовались для диагностики малярийной инфекции в лаборатории NAMRU-6 Iquitos одним лаборантом: i) SD BIOLINE (05FK80-40-0) и ii) BinaxNOW (665–025).Эти два RDT основаны на обнаружении антигена, содержащего богатый гистидином протеин II (HRP-II) P . falciparum и лактатдегидрогеназа (SD Bioline) или альдолаза (BinaxNow) видов Plasmodium в цельной крови человека.

Тестирование устройства «Газель» было проведено в лаборатории Икитос тем же лаборантом со свежими образцами, которые были обработаны в течение четырех часов с момента забора. Устройство состоит из настольного ридера и одноразовых одноразовых двухкамерных картриджей (, рис. 2, ).С помощью пипетки в нижнюю камеру картриджа закапали 15 мкл цельной крови вместе с 80 мкл буфера Gazelle (2% тритона в воде). Затем поместили верхнюю камеру, и образец обработали ультразвуком через стенку картриджа с помощью ультразвукового устройства, встроенного в Газель.

Рис. 2. Порядок проведения испытаний аппарата «Газель».

15 мкл цельной крови помещают в картридж с 80 мкл буфера Gazelle цельной крови. Образец помещается в устройство «Газель», которое лизирует образец ультразвуком, а затем многократно пропускает магниты через образец.Обнаружение малярии оценивается путем сравнения количества света, проходящего через образец, с магнитным полем и без него.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g002

На этапе обработки ультразвуком лизируются эритроциты и высвобождается гемозоин в положительных образцах. Затем внутренние магниты проходят несколько раз над образцом, и результирующие магнитные поля выравнивают кристаллы гемозоина, если они присутствуют. Эта конфигурация может блокировать прохождение света через образец.Наконец, внутренний светодиод излучает свет через образец, и количество света, проходящего через образец, измеряется с магнитным полем и без него ( Рис. 2) . Количество заблокированного света пропорционально количеству гемозоина в образце. Наличие любого количества гемозоина указывает на малярийную инфекцию.

Результат отображается на считывателе в течение одной минуты. Тест теоретически обнаруживает все виды малярии, поскольку гемозоин вырабатывается всеми ими, однако он не может различать виды.Калибровку прибора проводили с использованием положительного и отрицательного контроля каждую неделю или при смене номера партии картриджей. Для целей настоящего исследования результаты «Газели» не отображались, чтобы сотрудники лаборатории NAMRU-6 были ослеплены.

Вложенная ПЦР

Вложенная ПЦР была проведена двумя лаборантами в NAMRU-6 в Лиме. Сначала ДНК выделяли из 200 мкл цельной крови с помощью набора DNeasy Blood & Tissue (Qiagen, Germantown, MD), элюировали 70 мкл буфера для элюции и использовали для ПЦР с вложенной 18S рРНК [29].Первая реакция амплифицирует рибосомный ген субъединицы 18S рРНК (ssrRNA), а вторая реакция нацелена на специфические области для каждого вида плазмодия ( P . falciparum и P . vivax) . Для первой реакции использовали 5 мкл ДНК-матрицы, а 5 мкл амплифицированного продукта использовали во второй реакции. Обе реакции проводили в объеме 50 мкл, содержащем 1X буфер, 2 мМ MgCL2, 125 мкМ dNTP, 250 нМ каждого праймера и 1 единицу полимеразы Taq (Invitrogen, Waltham, MA).Результаты были визуализированы в 2% агарозном геле, окрашенном GelRed®. Техники не видели результатов микроскопии, RDT и Gazelle.

Фотоиндуцированный перенос электронов (ПЭТ-ПЦР)

Все образцы были протестированы в двух экземплярах с использованием ПЭТ-ПЦР Plasmodium для количественной оценки плотности паразитов [17, 30]. Все положительные по роду образцы были дополнительно протестированы с помощью одноплексных реакций для обнаружения P . falciparum и P . vivax .

Реакцию рода проводили в объеме 20 мкл, который содержал 5 мкл очищенной ДНК, 2X TaqMan Environment buffer 2.0 (Applied BioSystems, Фостер-Сити, Калифорния) и 250 нМ прямого праймера рода и обратного FAM-праймера. Одноплексные видоспецифичные реакции содержали ту же смесь, но с концентрацией 125 нМ HEX-меченного видоспецифичного праймера.

реакций ПЭТ-ПЦР запускали в системе для количественной ПЦР Mx3005P (Agilent technologies, Санта-Клара, Калифорния), а результаты визуализировали в программе для количественной ПЦР MXpro.Условия термоциклирования для родовой и видоспецифичной ПЭТ-ПЦР состояли из начальной денатурации при 95 ° C в течение 10 минут и 45 циклов денатурации при 95 ° C в течение 10 секунд с последующим отжигом при 60 ° C в течение 40 секунд. Пороговый цикл (Ct) ниже 41 использовался для разделения положительных и отрицательных образцов. Техники не видели результатов микроскопии, RDT и Gazelle.

Анализ сроков окупаемости и затрат

Мы оценили время обработки и стоимость одного образца для экспертной микроскопии, вложенной ПЦР, SD Bioline, BinaxNOW и Gazelle.Смета включала подготовку образцов для микроскопии; Выделение ДНК, реакция амплификации и визуализация результатов для ПЦР; Стоимость ДЭТ за образец, а также затраты на картридж и буфер для Газели. Стоимость рабочей силы и оборудования не была включена в анализ.

Статистические методы

Чувствительность и специфичность с 95% доверительным интервалом (95% ДИ) были рассчитаны для микроскопии, RDT и Gazelle с использованием 18S рРНК-вложенной ПЦР в качестве эталонного теста. Тест МакНемара использовался для выявления статистических различий между микроскопией, RDT и Gazelle.Коэффициент Каппа использовался для оценки соответствия между этими диагностическими тестами, в то время как U-критерий Манна-Уитни использовался для оценки различий в паразитемии между истинно положительными и ложно отрицательными результатами. Эти анализы проводились в пакете «stats», реализованном в R [31]. Данные микроскопии и количественной оценки ПЭТ-ПЦР были использованы для оценки предела обнаружения (LoD) Gazelle на клинических образцах с использованием загрузочных контрольных точек, реализованных в пакете «cutpointr» в R.

.

Результаты

Охват и характеристика населения

За период исследования 217 участников были обследованы на малярию.В общей сложности 32 участника были исключены из окончательного анализа из-за того, что образец крови не соответствовал требованиям для выполнения всех четырех тестов. Из этих 32 образцов микроскопия идентифицировала 11 P . vivax , 3 P . falciparum и 18 негативов; BinaxNow привел к 10 non-P . falciparum положительных и 22 отрицательных, тогда как SDBioline дало 10 P . vivax и 22 негатива.

Из оставшихся 185 образцов частота выявления малярии при микроскопии составила 44.9% (83/185), SD BIOLINE 38,9% (72/185), BinaxNOW 35,6% (66/185), Nested PCR 48,6% (90/185) и Gazelle 43,8% (81/185) ( S1 Таблица ).

Всего четыре P . falciparum и один смешанный P . vivax / P . falciparum случаев были обнаружены с помощью вложенной ПЦР. Все последующие анализы проводились с оставшимися 180 образцами (85 P , vivax и 95 отрицательных, как определено с помощью вложенной ПЦР).

Средний возраст составлял 33 года (диапазон 5–79), 60,5% составляли мужчины. У участников была средняя плотность паразитов 606 паразитов / мкл (12–61 773 паразитов / мкл), а недавняя история противомалярийного лечения была описана у 6 участников (, таблица 1, ).

Диагностические характеристики Газель и другие диагностические тесты

При использовании ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона микроскопия имела чувствительность для P . vivax 91,8% (95% ДИ: 83,8% — 96,6%) и специфичность 100% (95% ДИ: 96.2% — 100%). SD BIOLINE имел чувствительность 82,4% (95% ДИ: 72,6–89,8%) и специфичность 100% (95% ДИ: 96,2–100%), тогда как BinaxNOW имел чувствительность 71,8% (95% ДИ: 61%). — 81%) и специфичность 97,9% (95% ДИ: 92,6% — 99,7%). Газель имела чувствительность 88,2% (95% ДИ: 79,4–94,2%) и специфичность 97,9% (95% ДИ: 92,6–99,7%) (, рис. 3, ).

Рис. 3. Чувствительность (синие точки), специфичность (красные точки) и 95% доверительные интервалы для обнаружения малярии с помощью микроскопии, SD Bioline, BinaxNOW и Gazelle в P . vivax с использованием ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g003

Используя пороговую величину 200 паразитов / мкл, как в программе обеспечения качества БДТ ВОЗ [32], чувствительность Gazelle к образцам с более чем 200 паразитов / мкл составляла 98,67% (95% ДИ: от 92,79% до 99,97%), тогда как чувствительность для образцов менее 200 паразитов / мкл составляла 12,5% (95% ДИ: от 0,32% до 52,65%).

Каппа

Коэна показала, что у Газели каппа 0.94 (95% ДИ: 0,89–0,99) по сравнению с микроскопией и каппа 0,87 (95% ДИ: 0,79–0,94) по сравнению с вложенной ПЦР. Площадь под кривой ROC составляла 0,93 для Gazelle, 0,96 для микроскопии, 0,91 для SD Bioline и 0,85 для BinaxNOW ( рис. 4 ). Тест МакНемара не показал статистических различий между результатами Газели по сравнению с микроскопией (р = 0,983). Однако статистически значимые различия были обнаружены между Gazelle и SD Bioline и BinaxNOW (p = 0,016 и p = 0,002, соответственно).

Рис. 4. ROC-анализ.

На рисунке показаны кривые ROC для BinaxNow, SD BIOLINE, микроскопии и Gazelle в сравнении с вложенной ПЦР в качестве эталонного теста. Газель показала AUC 0,93, что сопоставимо с микроскопией с AUC 0,96 и выше, чем у BinaxNow (AUC = 0,85) и SD BIOLINE (AUC = 0,91).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g004

Предел обнаружения Газели при инфекциях P. vivax

При использовании ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона для Gazelle было обнаружено всего 10 ложноотрицательных результатов (FN).Из них все были FN по обоим RDT и 7 по микроскопии. Средняя паразитемия в 3 положительных при микроскопии образцах Gazelle FN составила 131 мкл / мкл, а средняя паразитемия для субмикроскопических образцов Gazelle FN составила 1,4 мкл / мкл с использованием ПЭТ-ПЦР для количественной оценки паразитемии. Газель имела 2 ложноположительных результата (FP) при использовании ПЦР с вложенной 18S рРНК в качестве эталона. Однако один FP оказался положительным с помощью ПЭТ-ПЦР с паразитемией 0,63 п / мкл.

U-критерий Манна-Уитни показал значительные различия в средней паразитемии у истинно положительных результатов Gazelle и Gazelle FN (p <0.00001). В связи с этим оптимальный предел паразитемии для положительного результата на газель был оценен между 207 и 323 паразитами / мкл с использованием данных микроскопии и количественной оценки ПЭТ-ПЦР, соответственно ( рис. 5, ).

Рис. 5. Распределение плотности паразитов.

Ящичковая диаграмма показывает распределение плотности паразитов, оцененное с помощью микроскопии и ПЭТ-ПЦР, вдоль медианы, нижнего и верхнего квартилей. Оптимальный предел паразитемии для положительного результата «Газель» показан красной пунктирной линией.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.g005

Магнитооптический метод, используемый в этом исследовании, представляет собой количественный метод, поскольку он определяет уровни гемозоина в образце. В этом отношении наши результаты показывают положительную корреляцию между плотностью паразитов и сигналом гемозоина, обнаруженным Газелью (r = 0,83) ( S1 Рис. ).

Анализ сроков выполнения работ и затрат

Наши результаты показывают, что у Gazelle было более короткое время обработки, чем у SD Bioline и BinaxNOW, с расчетным временем в пять минут на тест, включая подготовку образца и считывание (, таблица 2, ).Стоимость газели за тест оценивалась в один доллар США за тест, что ниже, чем у BinaxNOW, и аналогично микроскопии и SD Bioline (, таблица 2, ).

Обсуждение

Текущие руководящие принципы указывают, что лечение малярии следует проводить только в случаях с положительным результатом диагностического теста, которым является либо ДЭТ, либо световая микроскопия [10]. Более того, диагностика малярии является не только ключом к прямому лечению, но также имеет решающее значение для эпиднадзора и выявления резервуаров передачи в эндемичных условиях [10].Однако ДЭТ и световая микроскопия имеют ряд ограничений, которые затрудняют их использование в полевых условиях. Следовательно, необходимы новые подходы к применению в полевых условиях для упреждающего выявления случаев заболевания в эндемичных условиях.

В этом исследовании мы оценили новое устройство для быстрой диагностики в месте оказания медицинской помощи (Gazelle) и оценили его эффективность по сравнению с микроскопией и двумя RDT (SD Bioline и BinaxNOW) с использованием вложенной ПЦР в качестве золотого стандарта. Результаты текущего исследования показали, что чувствительность и специфичность Gazelle были аналогичны микроскопии и лучше, чем RDT, которые являются основными диагностическими методами, используемыми в медицинских центрах в Перу и других эндемичных регионах.

Наши результаты согласуются с недавним исследованием характеристик Газели в Индии с преобладанием P . falciparum [27]. Предыдущее исследование показало, что Gazelle продемонстрировала чувствительность и специфичность 82% и 98% соответственно; которые близки к значениям чувствительности и специфичности 88,2% и 97,9% из нашего исследования. Эти результаты говорят о том, что диагностические характеристики Газели аналогичны для P . falciparum и P . vivax чемоданов.

Это важный вывод, поскольку преобладание видов варьируется в зависимости от эндемичных регионов. Кроме того, в одном и том же регионе могут происходить смещения преобладающих видов в результате мероприятий по борьбе с малярией, которые, как правило, более эффективны против P . falciparum , чем P . vivax или введение новых штаммов, как показано ранее [33–36].

Время обработки

Gazelle меньше (5 минут) по сравнению с микроскопией (2 часа), RDT (20 минут) и PCR (9 часов), а стоимость одного теста сравнима с микроскопией и RDT.Кроме того, стоимость устройства «Газель» составляет примерно 700 долларов, что сопоставимо со стоимостью базового светового микроскопа, и устройство может выдержать более 20 000 тестов в течение своего предполагаемого жизненного цикла.

В этом отношении наши данные показывают, что Gazelle может дополнять микроскопию или использоваться в качестве альтернативы для диагностики малярии в удаленных или ограниченных в ресурсах местах. Этот потенциал для диагностики на месте дополнительно поддерживается минимальным обучением, необходимым для работы с Газелью, и отсутствием вариабельности, зависящей от наблюдателя, как в микроскопии.

Используя программу обеспечения качества БДТ ВОЗ в качестве эталона, чувствительность Gazelle к образцам с высокой плотностью паразитов (> 200 паразитов / мкл) составила 97,47% (95% доверительный интервал: от 91,15% до 99,69%). Это важное открытие, поскольку плотность 200 паразитов / мкл намного ниже средней плотности паразитов, сообщаемой во многих эндемичных условиях, включая наши районы в Перу [32]. Кроме того, количество ложных срабатываний препарата Газель оценивается в 2,1%, что ниже текущих критериев ВОЗ для ДЭТ (<10%) [32].

Ограниченный размер выборки (n = 10) для крайне низких инфекций паразитемии (<200 паразитов / мкл) не позволил нам рассчитать надежную оценку чувствительности для Gazelle. Однако, учитывая, что используемый здесь магнитооптический метод является количественным, можно было бы повысить чувствительность для инфекций с низкой паразитемией, изменив объем входящей пробы.

Важно подчеркнуть, что нынешний прототип «Газели» не позволяет идентифицировать виды.Это важный недостаток в регионах, где циркулируют несколько видов и схемы лечения различаются, поскольку неправильное ведение случая может привести к плохому ответу на лечение с обострением заболевания, рецидивами или обострением [37]. В связи с этим способность к дифференциации видов в настоящее время включается в следующий прототип устройства, который будет утвержден в ближайшем будущем.

Газель представляет собой важное дополнение к набору средств диагностики малярии, которое подходит для выявления малярии в местах оказания медицинской помощи.Наши результаты показывают потенциал «Газели» как экономичного устройства для диагностики малярии, которое можно использовать в эндемичных условиях с ограниченными ресурсами. Знания, полученные в результате этого исследования, послужат основой для дальнейших достижений в преобразовании технологии в доступное, прочное и готовое к эксплуатации устройство, которое можно использовать во всех эндемичных по малярии регионах.

Дополнительная информация

S1 Рис. Диаграмма рассеяния паразитемии в сравнении с количественными магнитооптическими данными.

На рисунке показана паразитемия, определенная под микроскопом, в сравнении с количественной оценкой гемозоина, проведенной Gazelle.Между обоими показателями была обнаружена положительная корреляция (r = 0,83).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0253232.s001

(TIF)

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить команду лаборатории и полевых работников в Икитосе за их поддержку в выполнении этого исследования. Мы также хотим отметить участников исследования, которые анонимно внесли свой вклад в его проведение.

Заявление об ограничении ответственности

Взгляды, выраженные в этой статье, принадлежат авторам и не обязательно отражают официальную политику или позицию Министерства военно-морского флота, Министерства обороны США или США.С. Правительство.

Список литературы

  1. 1. КТО. Всемирный доклад о малярии Всемирная организация здравоохранения. 2019.
  2. 2. Ливези Дж., Туми П., Моррисон М., Чикателли С., Дункан Э. Х., Хамер М. и др. Открытое исследование безопасности и эффективности однократной еженедельной дозы хлорохина и азитромицина, вводимых для профилактики малярии у здоровых взрослых, зараженных устойчивым к хлорохину 7G8 Plasmodium falciparum, в модели контролируемой инфекции малярии у человека.Журнал малярии. 2020; 19 (1): 336. pmid: 32938444; PubMed Central PMCID: PMC7493140.
  3. 3. Lo E, Zhou G, Oo W, Afrane Y, Githeko A, Yan G. Низкая паразитемия при субмикроскопических инфекциях значительно влияет на диагностическую чувствительность малярии в высокогорьях Западной Кении. ПлоС один. 2015; 10 (3): e0121763. pmid: 25816298; PubMed Central PMCID: PMC4376713.
  4. 4. Гамбоа Д., Хо М.Ф., Бендезу Дж., Торрес К., Чиодини П.Л., Барнуэлл Дж. В. и др. У значительной части изолятов P. falciparum в районе Амазонки в Перу отсутствуют pfhrp2 и pfhrp3: значение для экспресс-тестов на малярию.ПлоС один. 2010; 5 (1): e8091. pmid: 20111602; PubMed Central PMCID: PMC2810332.
  5. 5. Fontecha G, Mejia RE, Banegas E, Ade MP, Mendoza L, Ortiz B и др. Делеции генов pfhrp2 и pfhrp3 Plasmodium falciparum из Гондураса, Гватемалы и Никарагуа. Журнал малярии. 2018; 17 (1): 320. pmid: 30170596; PubMed Central PMCID: PMC6119307.
  6. 6. Рашид Виана Дж. М., Акини Окот С., Сильва-Фланнери Л., Лима Барбоса Д. Р., Маседо де Оливейра А., Голдман И. Ф. и др. Делеции гена богатого гистидином белка 2 (pfhrp2) и pfhrp3 в изолятах Plasmodium falciparum из избранных участков в Бразилии и Боливии.ПлоС один. 2017; 12 (3): e0171150. pmid: 28301474; PubMed Central PMCID: PMC5354239.
  7. 7. Krampa FD, Aniweh Y, Awandare GA, Kanyong P. Последние достижения в разработке диагностических тестов на малярию. Диагностика. 2017; 7 (3). pmid: 28925968; PubMed Central PMCID: PMC5617953.
  8. 8. Луччи Н.В., Лйолье Д., Сильва-Фланнери Л., Удхаякумар В. Использование изотермической амплификации, опосредованной малахитовой зеленой петлей, для обнаружения Plasmodium spp. Паразиты. ПлоС один. 2016; 11 (3): e0151437.pmid: 26967908; PubMed Central PMCID: PMC4788150.
  9. 9. Серра-Касас Э., Гетенс П., Чихеб Д., Гамбоа Д., Розанас-Уржель А. Пилотная оценка альтернативных процедур для упрощения диагностики малярии на основе LAMP в полевых условиях. Acta Tropica. 2019; 200: 105125. pmid: 31394079
  10. 10. mal ERARCPoTfME. МАЛЕРА: обновленная программа исследований по диагностике, лекарствам, вакцинам и борьбе с переносчиками малярии при элиминации и искоренении малярии. PLoS медицина. 2017; 14 (11): e1002455.pmid: 291
; PubMed Central PMCID: PMC5708606.
  • 11. Куадрос Дж., Мартин Рамирес А., Гонсалес И. Дж., Динг XC, Перес Танойра Р., Рохо-Маркос Дж. И др. Набор LAMP для диагностики малярии non-falciparum у пациентов, инфицированных Plasmodium ovale. Журнал малярии. 2017; 16 (1): 20. pmid: 28061871; PubMed Central PMCID: PMC5219760.
  • 12. Viana GMR, Silva-Flannery L, Lima Barbosa DR, Lucchi N, do Valle SCN, Farias S и др. Полевая оценка анализа изотермической амплификации в реальном времени (RealAmp) для диагностики малярии в Крузейру-ду-Сул, Акко, Бразилия.ПлоС один. 2018; 13 (7): e0200492. Epub 2018/07/12. pmid: 29995953; PubMed Central PMCID: PMC6040774.
  • 13. Луччи Н.В., Гайе М., Диалло М.А., Голдман И.Ф., Лйолье Д., Деме А.Б. и др. Оценка Illumigene Malaria LAMP: надежный инструмент молекулярной диагностики малярийных паразитов. Научный доклад 2016; 6: 36808. Epub 2016/11/09. pmid: 27827432; PubMed Central PMCID: PMC5101795 предоставлено Meridian Inc. Компания Meridian также покрыла эксплуатационные расходы на местах для этой оценки.
  • 14.Нотоми Т., Ли С.Дж., Окимото Н., Окадзаки Ю., Такамото Т., Накамура Т. и др. Влияние тренировок с отягощениями на массу, силу и метаболизм костей у растущих крыс. Eur J Appl Physiol. 2000. 82 (4): 268–74. Epub 2000/08/25. pmid: 10958368.
  • 15. Талунджич Э., Маганга М., Масанджа И.М., Петерсон Д.С., Удхаякумар В., Луччи Н.З. Полевая оценка фотоиндуцированных флуорогенных праймеров с переносом электронов (ПЭТ) ПЦР в реальном времени для обнаружения Plasmodium falciparum в Танзании.Журнал малярии. 2014; 13:31. Epub 2014/01/29. pmid: 24467985; PubMed Central PMCID: PMC3917897.
  • 16. Kudyba HM, Louzada J, Ljolje D, Kudyba KA, Muralidharan V, Oliveira-Ferreira J и др. Полевая оценка петлевой изотермической амплификации малярии и малахитового зеленого в медпунктах в штате Рорайма, Бразилия. Журнал малярии. 2019; 18 (1): 98. pmid: 302; PubMed Central PMCID: PMC6434790.
  • 17. Луччи Н.В., Нараянан Дж., Карелл М.А., Ксаявонг М., Кариуки С., ДаСилва А.Дж. и др.Молекулярная диагностика малярии с помощью флуорогенных праймеров с фотоиндуцированным переносом электронов: ПЭТ-ПЦР. ПлоС один. 2013; 8 (2): e56677. pmid: 23437209; PubMed Central PMCID: PMC3577666.
  • 18. Делахант С., Хорнинг М.П., ​​Уилсон Б.К., Проктор Д.Л., Хегг М.С. Ограничения диагностики Plasmodium falciparum на основе гемозоина с использованием микроскопии темного поля. Журнал малярии. 2014; 13: 147. pmid: 24739286; PubMed Central PMCID: PMC4021049.
  • 19. Ребело М., Шапиро Х.М., Амарал Т., Мело-Кристино Дж., Ханшайд Т.Обнаружение гемозоина в инфицированных эритроцитах для диагностики малярии Plasmodium falciparum — перспективы и ограничения. Acta Trop. 2012. 123 (1): 58–61. pmid: 22465900.
  • 20. Ребело М., Соуза С., Шапиро Х.М., Мота М.М., Гробуш М.П., ​​Ханшайд Т. Новый проточный цитометрический анализ обнаружения гемозоина для тестирования чувствительности Plasmodium falciparum в реальном времени. ПлоС один. 2013; 8 (4): e61606. pmid: 23637865; PubMed Central PMCID: PMC3634823.
  • 21. Бутыкай А., Орбан А., Кочиш В., Шаллер Д., Бордач С., Татрай-Секерес Е. и др.Кристаллы малярийного пигмента как магнитные микророторы: ключ к высокочувствительной диагностике. Научный доклад 2013; 3: 1431. pmid: 23478535; PubMed Central PMCID: PMC3594758.
  • 22. Newman DM, Heptinstall J, Matelon RJ, Savage L, Wears ML, Beddow J, et al. Магнитооптический путь к диагностике малярии in vivo: предварительные результаты и данные доклинических испытаний. Biophys J. 2008; 95 (2): 994–1000. pmid: 183; PubMed Central PMCID: PMC2440472.
  • 23. Ребело М., Гренхо Р., Орбан А., Ханшайд Т.Трансдермальная диагностика малярии с использованием паровых нанопузырьков. Emerg Infect Dis. 2016; 22 (2): 343–4. pmid: 26811926; PubMed Central PMCID: PMC4734514.
  • 24. Орбан А., Бутыкай А., Молнар А., Прохле З., Фулоп Г., Зеллес Т. и др. Оценка нового магнитооптического метода обнаружения малярийных паразитов. ПлоС один. 2014; 9 (5): e96981. Epub 2014/05/16. pmid: 24824542; PubMed Central PMCID: PMC4019541.
  • 25. Пуканчик М., Молнар П., Орбан А., Бутыкай А., Мартон Л., Кежмарки И. и др.Высокочувствительная и быстрая характеристика развития паразитов синхронной малярии на стадии крови с помощью магнитооптического количественного определения гемозоина. Биомолекулы. 2019; 9 (10). Epub 2019/10/09. pmid: 31591333; PubMed Central PMCID: PMC6843464.
  • 26. Арндт Л., Колеала Т., Орбан А., Ибам С., Люфеле Е., Тиминао Л. и др. Магнитооптическая диагностика симптоматической малярии в Папуа-Новой Гвинее. Nat Commun. 2021; 12 (1): 969. Epub 2021/02/14. pmid: 33579923; PubMed Central PMCID: PMC7881035.
  • 27. Кумар Р., Верма А.К., Шривас С., Тота П., Сингх М.П., ​​Раджасубраманиам С. и др. Первая успешная полевая оценка нового прибора для одноминутной диагностики малярии на основе гемозоина. EClinicalMedicine. 2020; 22: 100347. pmid: 324
  • ; PubMed Central PMCID: PMC7256309.
  • 28. Национальный эпидемиологический центр PyCdE-M. 2019.
  • 29. Snounou G, Viriyakosol S, Zhu XP, Jarra W., Pinheiro L, do Rosario VE и др. Высокая чувствительность выявления паразитов малярии человека с помощью вложенной полимеразной цепной реакции.Молекулярная и биохимическая паразитология. 1993. 61 (2): 315–20. Epub 1993/10/01. pmid: 8264734.
  • 30. Луччи Н.В., Карелл М.А., Журнель I, Рожье Э., Гольдман I, Лйолье Д. и др. Метод ПЭТ-ПЦР для молекулярного обнаружения малярийных паразитов в национальном исследовании по эпиднадзору за малярией в Гаити, 2011. Журнал «Малярия». 2014; 13: 462-. pmid: 24401153.
  • 31. Команда RC. R: Язык и среда для статистических вычислений. Вена, Австрия; 2013.
  • 32. Организация WH.Эффективность экспресс-тестов на малярию: результаты тестирования продуктов ВОЗ для БДТ против малярии: 7-й раунд (2016–2017 гг.). 2017.
  • 33. Рабинович Р.Н., Дрейкли С., Джимде А.А., Холл Б.Ф., Хэй С.И., Хемингуэй Дж. И др. МАЛЕРА: обновленная программа исследований по элиминации и искоренению малярии. PLoS медицина. 2017; 14 (11): e1002456. pmid: 291
  • ; PubMed Central PMCID: PMC5708604.
  • 34. Росас-Агирре А., Гамбоа Д., Манрике П., Конн Дж. Э., Морено М., Лескано А.Г. и др. Эпидемиология малярии Plasmodium vivax в Перу.Am J Trop Med Hyg. 2016; 95 (6 доп.): 133–44. Epub 2016/11/02. pmid: 27799639; PubMed Central PMCID: PMC5201219.
  • 35. Санчес Дж. Ф., Карнеро А. М., Ривера Э., Росалес Л. А., Бальдевиано Г. К., Асенсиос Дж. Л. и др. Нестабильная передача малярии в южной части перуанской Амазонки и ее связь с золотодобычей, Мадре-де-Диос, 2001–2012 гг. Am J Trop Med Hyg. 2017; 96 (2): 304–11. pmid: 27879461; PubMed Central PMCID: PMC5303028.
  • 36. Baldeviano GC, Okoth SA, Arrospide N, Gonzalez RV, Sanchez JF, Macedo S и др.Молекулярная эпидемиология вспышки малярии, вызванной Plasmodium falciparum, Тумбес, Перу, 2010–2012 гг. Emerg Infect Dis. 2015; 21 (5): 797–803. pmid: 25897626; PubMed Central PMCID: PMC4412223.
  • 37. Дуглас Н.М., Ностен Ф., Эшли Э.А., Фаифун Л., ван Вугт М., Сингхасиванон П. и др. Рецидив Plasmodium vivax после малярии falciparum и смешанных видов: факторы риска и влияние антималярийной кинетики. Clin Infect Dis. 2011; 52 (5): 612–20. pmid: 21292666; PubMed Central PMCID: PMC3060895.
  • Газель Морра Факты и информация

    Научная классификация

    Общее название
    Газель Морра, газель Western Dama
    Королевство
    Животные
    Тип
    Хордовые
    Класс
    Млекопитающие
    Заказать
    Парнокопытная
    Семья
    Бовиды
    Род Виды
    Газелла (дикая коза) дама (как олень) морр (научный исследователь)

    Быстрые факты

    Описание
    Газель Морра — газель среднего размера с преимущественно белым телом, верхним покрывалом темно-ржавого цвета и короткими черными рогами
    Размер
    Примерно 0.От 9 до 1,2 м (от 3 до 4 футов) в уступе
    Вес
    от 39,6 до 74,25 кг (от 88 до 165 фунтов)
    Диета
    Включает листья акации и кустарников, травы и травы
    Инкубация
    Беременность длится примерно 6,5 месяцев; обычно по одному потомству
    Продолжительность ухода
    Молодая медсестра от 4 до 9 месяцев
    Половая зрелость
    Мужчины: от 18 до 24 месяцев
    Женщины: от 9 до 12 месяцев
    Продолжительность жизни
    В среднем 12 лет
    Диапазон
    Восточная Сахара
    Среда обитания
    Обитает в открытых степях, травянистых степях, полупустынях, пустынях
    Население
    Глобальный: Вымершие в дикой природе
    Статус
    МСОП: находящийся под угрозой исчезновения
    CITES: Приложение I
    USFWS: находящийся под угрозой исчезновения

    Интересные факты

    1. Газель Морра также упоминается как газель западного дама.Газели Дама известны своими чрезвычайно длинными ногами, которые поднимают их тело над горячим песком пустыни, чтобы сохранять прохладу. Кроме того, их длинные ноги обеспечивают дополнительную площадь поверхности тела для излучения тепла.
    2. Это самые высокие из всех газелей из-за худощавого тела с длинной шеей и ногами. Они также являются самым темным подвидом племени дама-газелей.
    3. Известно, что они поднимаются на задние лапы, чтобы достичь высокого лба.
    4. Во время миграции во время засухи многие морры умирают из-за недостатка пищи, а не воды.Как и многим млекопитающим, живущим в засушливых регионах, необходимо адаптироваться к длительным периодам без питьевой воды. Большинство этих животных успешно потребляют воду из пищи.

    Экология и охрана природы

    Поедая травы, морры получают всю воду, в которой они нуждаются в сезон дождей, но мигрируют в поисках питьевой воды в засушливые периоды.

    Газели Морра — важный источник пищи для многих хищников.

    Как и большинство млекопитающих, обитающих в Северной Африке, они находятся на грани исчезновения из-за чрезмерной охоты и разрушения среды обитания.

    В сотрудничестве с другими учреждениями AZA (Ассоциация зоопарков и аквариумов) Busch Gardens тесно управляет популяциями газелей Морра с помощью программы под названием «План выживания видов» (SSP), которая направлена ​​на улучшение генетического разнообразия управляемых популяций животных.


    Библиография

    Эстес, Р. Д. Сафари-компаньон: руководство по наблюдению за африканскими млекопитающими . Вермонт: Chelsea Green Publishing Co., 1993.

    .

    Готч, А.Ф. Млекопитающие — объяснение их латинских имен .Пул, Великобритания: Blandford Press Btd., 1979.

    Новак, Рональд (ред.). Ходоки Млекопитающие мира. Vol. II, Baltimore: Johns Hopkins University Press, 1991.

    Паркер, С.П. (ред.). Энциклопедия млекопитающих Гризмека. Том 5 . Нью-Йорк: McGraw Hill Pub. Co., 1990.

    Spinage, C.A. Естественная история антилоп . Нью-Йорк: Факты в File Pub., 1986.

    Стюарт К. и Т. Полевой справочник млекопитающих Южной Африки .Флорида: Книжный паб Ральфа Кертиса. 1988.

    Gazelle Vacation Rentals & Homes — Калифорния, Соединенные Штаты

    Gazelle Vacation Rentals & Homes — Калифорния, Соединенные Штаты | AirbnbПерейти к содержанию

    Сожалеем, некоторые части веб-сайта Airbnb не работают должным образом без включенного JavaScript.

    Найдите и забронируйте уникальное жилье на Airbnb

    Аренда на время отпуска в Gazelle с самым высоким рейтингом

    Гости согласны: эти варианты проживания высоко ценятся за расположение, чистоту и многое другое.

    Гостевой дом целиком · 4 гостя · 5 кроватей · 1 ванная

    Susans Secret Garden StudioУютная, привлекательная студия площадью 350 кв. Футов. Йогурт, фрукты, выпечка, горячие напитки и многое другое на утренний завтрак. Курение запрещено на всей территории. Идеально подходит для путешествий между Вашингтоном, Орегоном и всеми частями Калифорнии, всего в 6 милях от автострады I-5 к востоку от Иреки. Размещение домашних животных допускается после утверждения. Дополнительная плата в размере 5 долларов за домашнее животное. Общая ванная комната в доме. Плата за уборку отсутствует. Оконный кондиционер, который гости настраивают на желаемую температуру.Его снимают в более прохладную погоду. Электрические обогреватели

    Гостевой дом целиком · 6 гостей · 2 кровати · 1 ванная

    Очаровательный деревенский домик на ферме Эджвуд Наслаждайтесь отдыхом в ночлежке в старинной усадьбе. Все в этом отреставрированном загородном доме для отпуска уникально. Трудно поверить и трудно описать, возможно, вид на гору Шаста говорит обо всем. НЕВЕРОЯТНЫЙ. Хотя отель находится всего в миле от межштатной автомагистрали 5, рядом с местной остановкой Weed Rest и аэропортом Weed, на берегу реки Шаста тихо и безмятежно.В этом оригинальном бункере есть полностью оборудованная кухня, винтовая лестница, дровяная печь и уютные номера с видом на горы!

    Фермерский дом · 6 гостей · 5 спальных мест · 2 ванные комнаты

    Ранчо с видом на холм Представьте, что вы просыпаетесь и наблюдаете за лошадьми, мирно пасущимися из окна. Семья диких индеек, играющих кроликов или оленей, идущих за водой. Краснохвостые ястребы, парящие высоко над головой. Поднимитесь на 75 ярдов в гору и полюбуйтесь древними скальными образованиями и величественными видами горы Шаста, второй по высоте горной вершины Калифорнии.Наблюдайте, как солнце садится над далекими холмами из окна своей гостиной, когда вы откидываетесь в своей кошачьей лапке! Все это ждет вас во время вашего спокойного отдыха.

    Аренда на время отпуска для любого стиля

    Получите пространство, которое подходит именно вам

    • Дома

      Комфортные места со всем необходимым

    • Отели

      Стильные номера и удобства

    • Уникальное проживание

      Пространства, которые больше, чем просто место для сна

    Популярные удобства для аренды на время отпуска Газель

    Другая отличная аренда на время отпуска в Газели

    1. Жилой дом целиком
    2. · Weed

    Дом с горячими источниками Намасте в Flowing Waters OPEN

    241 доллар за ночь

    241 доллар за ночь
    1. Жилой дом целиком
    2. · Газель

    Крошечный домик, священное убежище за пределами горы Шаста

    60 долларов за ночь

    $ 60 за ночь

    Восстановите силы в волшебной 30-футовой юрте в лесу 900 03

    155 $ / ночь

    155 $ за ночь
    1. Жилой дом целиком
    2. · Weed

    Mountain Breeze — Допускается размещение домашних животных, 5 акров

    235 $ / ночь

    235 $ за ночь

    Волшебный коттедж Flowing Waters у ручья!

    $ 196 за ночь

    $ 196 за ночь
    1. Жилой дом целиком
    2. · Weed

    Mountain Breeze — возможно размещение с домашними животными, 5 акров

    $ 225 / ночь

    $ 225 за ночь
    1. Бунгало целиком
    2. · Gazelle

    Dry Ранчо Крик.Красивая удаленная настройка!

    200 долларов за ночь

    200 долларов за ночь

    Magical Shasta Retreat Sanctuary с массажем

    482 доллара за ночь

    482 доллара за ночь

    Глубокий отдых и созерцание звезд в нашей 20-футовой Изумрудной юрте

    135 долларов за ночь

    135 долларов за ночь
    1. Весь кондоминиум (квартира)
    2. · Монтегю

    ОЧАРОВАТЕЛЬНЫЙ КОНДО рядом с ИРЕКА с ДОЛГОСРОЧНЫМ вариантом

    109 $ / ночь

    109 $ за ночь
    1. Жилой дом целиком
    2. · Weed

    Mountain Breeze — Pet Friendly, Five Acres

    225 долларов за ночь

    225 долларов за ночь

    Уютно в очаровательном коттедже на берегу ручья в лесу

    135 долларов за ночь

    135 долларов за ночь © 2021 Airbnb, Inc.Все права защищены . Разное

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *