LADA Vesta — Обзор. Официальный сайт LADA в Беларуси
Обновлённая LADA Vesta
Седан LADA Vesta вместителен и удобен, при этом особое внимание уделено акустическому комфорту. Конструкция шасси объединяет плавность хода, проходимость и азартную управляемость. LADA Vesta отлично приспособлена для сложных климатических и дорожных условий: внешние панели кузова оцинкованы, силовой агрегат прикрыт мощной защитой, а на порогах и днище нанесено прочное антигравийное покрытие.
Классический стиль, оптимальный выбор
LADA Vesta
Совершенство –
в графике и характере
Стильная, стремительная, яркая, LADA Vesta задаёт современный стандарт дизайна LADA. Силуэт седана выдержан в единой «Икс»-концепции, он 100-процентно узнаваемый и гармоничный. Фирменный стиль обозначен в деталях: выделенной тёмным цветом облицовке радиатора, подштамповках по бокам, световозвращателях задних фонарей. За счет приподнятой подоконной линии, удлиненного капота и покатой крыши автомобиль смотрится динамично и атлетично.
Антенна в форме акульего плавника
Бескаркасные стеклоочистители – работают эффективно и не склонны к обмерзанию
Исключительно просторный салон
Исключительно просторный салон позволяет разместиться с максимальным удобством на передних креслах и на заднем диване – этому способствует высокий уровень эргономики сидений, которые обладают выверенной формой и специально подобранным наполнителем. Водительское кресло оснащено регулировкой высоты и поясничной поддержки. В сочетании с регулировкой руля по высоте и вылету это помогает подобрать удобную посадку, исходя из индивидуальных потребностей.
Мультимедийная система
LADA EnjoY Pro с Яндекс.Авто — мультимедийная система нового поколения, обеспечивающая полноценный функционал современного смартфона, интегрированного в автомобиль. LADA EnjoY Pro с Яндекс.Авто — это экран с HD-разрешением и высоким быстродействием, поддержка проецируемых систем Apple CarPlay и Android Auto.
6-диапазонная автоматическая коробка передач японской фирмы Jatco
Теплая опция для наших зим – обогрев руля. LADA Vesta согревает!
Трансформация багажного отсека
480-литровый багажник – это обязательное качество семейного седана LADA Vesta. Увеличить этот объем можно сложив спинку сиденья – как полностью, так и по частям, в пропорции 60/40.
Высокий уровень защиты
LADA Vesta – это высокий уровень защиты. Автомобиль обеспечивает отличную обзорность и уверенную проходимость, электроника постоянно мониторит дорожную ситуацию, кузов с применением сталей повышенной прочности надежно защищает водителя и пассажиров.
LADA Vesta – это возможность выбрать силовой агрегат в соответствии с индивидуальным стилем вождения
и потребностями в динамике. 1,6л + «механика» — экономичный вариант.
1,8л + «механика» — солидный запас тяги! 1,6л + автоматическая трансмиссия –
плавное движение и уверенный разгон! Ну а специальные настройки шасси обеспечивают комфорт и азартную управляемость.
Рабочий объем
1596 см
Мощность
106 л.с. (78 кВт) при 5800 об/мин
Момент крутящий
148 Нм при 4200 об/мин
Нормы токсичности
ЕВРО-5
Рабочий объем
1774 см
Мощность
122 л.с. (90 кВт) при 5900 об/мин
Момент крутящий
170 Нм при 3700 об/мин
Нормы токсичности
ЕВРО-5
Рабочий объем
1598 см
Мощность
113 л.с. (83 кВт) при 5500 об/мин
Момент крутящий
152 Нм при 4000 об/мин
Нормы токсичности
ЕВРО-5
Цветовая гамма
Дайвинг
Насыщенный синий, напоминающий о бесконечной глубине океана. Или неба? Дайвинг возможен в разных стихиях, но путь к ним начинается за рулем LADA Vesta
Детальный обзор авто Лада Веста
Лада Веста – инновация отечественного автопрома
АвтоВАЗ анонсировал новый запуск в сентябре 2015 года и модель буквально сразу появилась в большинстве автосалонов страны. Она пришла на замену устаревшей Приоре и приятно удивила автомобилистов. Современный дизайн был разработан по образу и подобию X-Ray, а прототипом архитектуры послужил опыт разработки компании Renault. Благодаря такому сочетанию машина стала новым словом от российского производителя. На рынке представлены комплектации Standard, Classic, Exclusive, Comfort и другие, что позволяет подобрать оптимальное сочетание цены и функциональных возможностей. В базовой комплектации предусмотрены галогеновые фары, ходовые огни для светлого времени суток, противотуманная подсветка и зеркала заднего вида с подогревом, что позволяет сохранять видимость дороги даже в случае сложных погодных условий.
Почему пользователи Autospot выбирают Lada Vesta?
Главной причиной этого, как подчеркивают водители, является цена. Модель отличается доступностью по сравнению с импортными аналогами, однако не уступает им качеством, а в некоторых моментах даже превосходит. Есть вариации с бензиновым и газовым двигателем на 1,6-1,8 л, которые отвечают европейским экологическим стандартам. Пружинная подвеска позволит без труда преодолевать ямы на дороге.
Как считают пользователи, на практике главными преимуществами авто являются:
- экономный расход топлива как в городском режиме, так и на трассе;
- складные задние сидения и возможность регулировки водительского кресла;
- доступное техническое обслуживания в сервисных центрах официальных дилеров.
Платформа Autospot предлагает покупателям до 12% скидки на все комплектации модели Веста. Проверенные продавцы предоставляют доступ к выгодным финансовым и страховым программам.
Информация о модели LADA Vesta 2015 – н.в., I: технические характеристики, отзывы и фотографии авто. 14 и более обзоров на автомобиль Лада Веста в кузове седан. Смотрите видео и фото, а также читайте отзывы о машине. Купить авто с пробегом в Москве на Autospot.ru!LADA Largus Cross в Минске
Largus CrossНовый герой для семейных снимков
Для фото с новым LADA Largus Cross подойдет любой фон — ваш дом, лесная опушка или морской берег. Но кто будет смотреть на декорации? Ведь главный объект, притягивающий взгляд, — LADA Largus в новом стиле. Более модный и более серьезный. Более уверенный и более изящный.
Колеса 16”: новое сочетание полированного алюминия и черного лака
Прочные рейлинги с тремя опорами: надежное крепление груза и непременный атрибут автомобиля-путешественника
Камера заднего вида: обеспечивает безопасное движение задним ходомЦентр семейного притяжения
Мир вокруг меняется. А мы из каждого путешествия возвращаемся немного другими. Мы как будто растем вместе с детьми. И вот в салоне автомобиля звучит новая музыка. Появляется больше людей.
Меняется ритм и атмосфера поездок… хотя бы потому, что интерьер стал заметно удобней!
Король пикников
В багажник нового LADA Largus Cross вы сможете уложить не только все продукты для пикника на природе, но и тент от дождя, сумку-холодильник, и складные стулья. Уложили общие вещи? Можно заняться личными.
Пассажиры второго ряда могут спрятать все самое важное наверху, на полке. «Штурману» на переднем месте доступен объемный перчаточный ящик. А водителю полагается подлокотник с отделением для хранения.
Как за каменной стеной
Неожиданности, случайности, непредвиденные обстоятельства, повороты судьбы… это что-то из области философии. Прочный кузов, надежная электроника, современные системы безопасности — это уже мир техники. Выбирая семейный автомобиль, выбираем технику, на которую можно положиться.
Комфорт вдали от дома
В семье все заботятся друг о друге — и новый LADA Largus не исключение. Он поддерживает каждого, где бы вы ни ехали. Теплое рулевое колесо согревает руки и душу водителя. Летом кондиционер создает комфортную температуру для всех пассажиров. А улучшенная шумоизоляция сохраняет уют маленькой семейной вселенной.
По пути с любой дорогой
У нового LADA Largus Cross достаточно высокий клиренс, чтобы смотреть на несовершенства дороги свысока. А это значит – доступны новые маршруты. Расширились возможности для парковки. Можно проще относиться не только к дорогам, но и к «направлениям». В душе водителя – мир и гармония… Вот что делает защита кузова и 195 мм дорожного просвета!
Тяга или скорость?
все и сразу!
16-клапанный мотор отличается эффективностью и надежностью.
Специальная конструкция поршней снижает трение и исключает контакт с клапанами при нештатной ситуации. Система инерционного наддува автоматически регулирует объем впускного коллектора, что улучшает отдачу мотора во всем диапазоне оборотов.
Цветовая гамма
Технические характеристики
1,6 л 16-кл., 5МТ, 106 л.с.- 4 х 2 / передние
- переднее поперечное
- универсал / 5
- 5 / 7
- 4496 / 1754 / 1654 (1682)
- 2905
- 1461 / 1466
- 200
- 560 / 135
- бензиновый
- впрыск топлива с электронным управлением
- 4, рядное
- 1596
- 106 / 78 / 5800
- 148 / 4200
- бензин с октановым числом не менее 92
- 170
- 14,2 / 14,3
- 10,2
- 6,3
- 7,8
- 1255…1450 / 1330…1370
- 1750…1790 / 1810…1850
- 650
- 1300
- 50
- 5МТ
- 3,9
- независимая, типа Макферсон, пружинная, со стабилизатором поперечной устойчивости
- полузависимая, рычажная, пружинная, с гидравлическими телескопическими амортизаторами
- шестерня-рейка
- 205/55 R16 (91, H/V)
Цены и комплектации
Безопасность Интерьер Комфорт Экстерьер
- Подушка безопасности водителя
- Подушка безопасности переднего пассажира
- Подголовники задних сидений 2 шт.
- Крепления для детских сидений ISOFIX
- Блокировка задних дверей от открывания детьми
- Иммобилайзер
- Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
- Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
- Защита двигателя и подкапотного пространства
- Бортовой компьютер
- Сиденье второго ряда с раскладкой в пропорции 60/40
- Интерьер (по выбору) Orange оранжевый/Gray серый
- Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
- Розетка 12V
- Натяжная полка багажника
- Гидроусилитель рулевого управления
- Регулируемая по высоте рулевая колонка
- Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
- Сиденье водителя с регулировкой по высоте
- Складной ключ
- Центральный замок с дистанционным управлением
- Электростеклоподъемники передних дверей
- Подогрев передних сидений 3х уровневый
- Электропривод и обогрев наружных зеркал
- Кондиционер
- Круиз-контроль и ограничитель скорости
- Мультифункциональное рулевое колесо
- Аудиосистема (FM, MP3, AUX, USB, Bluetooth, Hands free) 4 динамика
- Наружные зеркала в цвет кузова
- Наружные ручки дверей в цвет кузова
- Молдинги боковых дверей
- Рейлинги
- 16» легкосплавные диски
- Колпаки колес декоративные
- Запасное стальное колесо временного использования 15»
Безопасность Интерьер Комфорт Экстерьер
- Подушка безопасности водителя
- Подушка безопасности переднего пассажира
- Подголовники задних сидений 4 шт.
- Крепления для детских сидений ISOFIX
- Блокировка задних дверей от открывания детьми
- Иммобилайзер
- Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
- Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
- Защита двигателя и подкапотного пространства
- Бортовой компьютер
- Сиденье второго ряда с раскладкой в пропорции 60/40
- Третий ряд сидений
- Сиденье третьего ряда с раскладной спинкой в пропорции 50/50
- Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
- Розетка 12V
- Гидроусилитель рулевого управления
- Регулируемая по высоте рулевая колонка
- Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
- Сиденье водителя с регулировкой по высоте
- Складной ключ
- Центральный замок с дистанционным управлением
- Электростеклоподъемники передних дверей
- Подогрев передних сидений 3х уровневый
- Электропривод и обогрев наружных зеркал
- Кондиционер
- Круиз-контроль и ограничитель скорости
- Мультифункциональное рулевое колесо
- Аудиосистема (FM, MP3, AUX, USB, Bluetooth, Hands free) 4 динамика
- Наружные зеркала в цвет кузова
- Наружные ручки дверей в цвет кузова
- Молдинги боковых дверей
- Рейлинги
- 16» легкосплавные диски
- Запасное стальное колесо временного использования 15»
Безопасность Интерьер Комфорт Экстерьер
- Подушка безопасности водителя
- Подушка безопасности переднего пассажира
- Подголовники задних сидений 2 шт.
- Крепления для детских сидений ISOFIX
- Блокировка задних дверей от открывания детьми
- Иммобилайзер
- Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
- Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
- Защита двигателя и подкапотного пространства
- Бортовой компьютер
- Центральный подлокотник
- Сиденье второго ряда с раскладкой в пропорции 60/40
- Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
- Розетка 12V
- Розетка 12V для пассажиров второго ряда
- Натяжная полка багажника
- Гидроусилитель рулевого управления
- Регулируемая по высоте рулевая колонка
- Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
- Сиденье водителя с регулировкой по высоте
- Складной ключ
- Центральный замок с дистанционным управлением
- Электростеклоподъемники передних дверей
- Электростеклоподъемники задних дверей
- Подогрев передних сидений 3х уровневый
- Электропривод и обогрев наружных зеркал
- Датчики парковки сзади
- Камера заднего вида
- Кондиционер
- Круиз-контроль и ограничитель скорости
- Мультифункциональное рулевое колесо
- Мультимедийная система с навигацией (7» цветной дисплей с TouchScreen, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free, Android Auto, Apple Car Play), 4 динамика, антенна наружная
- Наружные зеркала в цвет кузова
- Наружные ручки дверей в цвет кузова
- Молдинги боковых дверей
- Рейлинги
- 16» легкосплавные диски
- Запасное стальное колесо временного использования 15»
Безопасность Интерьер Комфорт Экстерьер
- Подушка безопасности водителя
- Подушка безопасности переднего пассажира
- Подголовники задних сидений 4 шт.
- Крепления для детских сидений ISOFIX
- Блокировка задних дверей от открывания детьми
- Иммобилайзер
- Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
- Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
- Защита двигателя и подкапотного пространства
- Бортовой компьютер
- Центральный подлокотник
- Сиденье второго ряда с раскладкой в пропорции 60/40
- Третий ряд сидений
- Сиденье третьего ряда с раскладной спинкой в пропорции 50/50
- Интерьер Cross оранжевый / Cross серый (по выбору)
- Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
- Натяжная полка багажника
- Розетка 12V
- Розетка 12V для пассажиров второго ряда
- Гидроусилитель рулевого управления
- Регулируемая по высоте рулевая колонка
- Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
- Сиденье водителя с регулировкой по высоте
- Складной ключ
- Центральный замок с дистанционным управлением
- Электростеклоподъемники передних дверей
- Электростеклоподъемники задних дверей
- Подогрев передних сидений 3х уровневый
- Электропривод и обогрев наружных зеркал
- Датчики парковки сзади
- Камера заднего вида
- Кондиционер
- Круиз-контроль и ограничитель скорости
- Мультифункциональное рулевое колесо
- Мультимедийная система с навигацией (7» цветной дисплей с TouchScreen, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free, Android Auto, Apple Car Play), 4 динамика, антенна наружная
- Наружные зеркала в цвет кузова
- Наружные ручки дверей в цвет кузова
- Молдинги боковых дверей
- Рейлинги
- 16» легкосплавные диски
- Запасное стальное колесо временного использования 15»
Безопасность Интерьер Комфорт Экстерьер
- Подушка безопасности водителя
- Подушка безопасности переднего пассажира
- Подголовники задних сидений 3 шт.
- Крепления для детских сидений ISOFIX
- Блокировка задних дверей от открывания детьми
- Иммобилайзер
- Противотуманные фары
- Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
- Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
- Защита двигателя и подкапотного пространства
- Бортовой компьютер
- Центральный подлокотник
- Сиденье второго ряда с раскладкой в пропорции 60/40
- Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
- Розетка 12V
- Розетка 12V в багажном отделении
- Розетка USB для пассажиров второго ряда
- Багажная полка на обивке крыши
- Натяжная полка багажника
- Гидроусилитель рулевого управления
- Регулируемая по высоте рулевая колонка
- Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
- Сиденье водителя с регулировкой по высоте
- Складной ключ
- Центральный замок с дистанционным управлением
- Электростеклоподъемники задних дверей
- Электростеклоподъемники передних дверей
- Обогреваемый руль с кожаной отделкой
- Подогрев передних сидений 3х уровневый
- Подогрев задних сидений
- Электропривод и обогрев наружных зеркал
- Обогрев ветрового стекла
- Датчики парковки сзади
- Камера заднего вида
- Датчики дождя и света
- Кондиционер
- Круиз-контроль и ограничитель скорости
- Пакет шумоизоляции
- Мультифункциональное рулевое колесо
- Мультимедийная система с навигацией (7» цветной дисплей с TouchScreen, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free, Android Auto, Apple Car Play), 4 динамика, антенна наружная
- Усиленная тонировка задних стекол
- Наружные зеркала в цвет кузова
- Наружные ручки дверей в цвет кузова
- Молдинги боковых дверей
- Рейлинги
- 16» легкосплавные диски
- Запасное стальное колесо временного использования 15»
Безопасность Интерьер Комфорт Экстерьер
- Подушка безопасности водителя
- Подушка безопасности переднего пассажира
- Подголовники задних сидений 5 шт.
- Крепления для детских сидений ISOFIX
- Блокировка задних дверей от открывания детьми
- Иммобилайзер
- Противотуманные фары
- Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
- Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
- Защита двигателя и подкапотного пространства
- Бортовой компьютер
- Центральный подлокотник
- Сиденье второго ряда с раскладкой в пропорции 60/40
- Третий ряд сидений
- Сиденье третьего ряда с раскладной спинкой в пропорции 50/50
- Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
- Розетка 12V
- Розетка 12V в багажном отделении
- Розетка USB для пассажиров второго ряда
- Багажная полка на обивке крыши
- Гидроусилитель рулевого управления
- Регулируемая по высоте рулевая колонка
- Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
- Сиденье водителя с регулировкой по высоте
- Усиленная тонировка задних стекол
- Складной ключ
- Центральный замок с дистанционным управлением
- Электростеклоподъемники задних дверей
- Электростеклоподъемники передних дверей
- Обогреваемый руль с кожаной отделкой
- Подогрев передних сидений 3х уровневый
- Подогрев задних сидений
- Электропривод и обогрев наружных зеркал
- Обогрев ветрового стекла
- Датчики парковки сзади
- Камера заднего вида
- Датчики дождя и света
- Кондиционер
- Круиз-контроль и ограничитель скорости
- Пакет шумоизоляции
- Мультифункциональное рулевое колесо
- Мультимедийная система с навигацией (7» цветной дисплей с TouchScreen, FM/AM с функцией RDS, USB, AUX, Bluetooth, Hands free, Android Auto, Apple Car Play), 4 динамика, антенна наружная
- Наружные зеркала в цвет кузова
- Наружные ручки дверей в цвет кузова
- Молдинги боковых дверей
- Рейлинги
- 16» легкосплавные диски
- Запасное стальное колесо временного использования 15»
Цены на автомобили носят информационный характер и ни при каких условиях не являются публичной офертой. Для получения подробной информации о ценах и условиях покупки обращайтесь в автоцентр Минск-Лада на Серова, 1.
- Белый «Ледниковый» (221)
- Красный «Красный сплав» (136)
- Серо-бежевый «Каракумы» (238)
- Серо-бежевый «Серый базальт» (242)
- Коричневый «Брюн» (250)
- Cеребристый темно-синий «Лазурно-синий» (498)
- Светло-серый «Серое плато» (624)
- Черный «Черная жемчужина» (676)
Официальный сайт ZIC Russia
Марка по марке автомобиляAbarthAcura (USA / CAN)Alfa Romeo (EU)Alfa Romeo (USA / CAN)AlpineAroAsiaAston MartinAudi (EU)Audi (USA)AustinBentleyBMW (EU)BMW (USA)BrabusBugattiBuick (USA / CAN)Cadillac (EU)Cadillac (USA / CAN)CheryChevrolet (EU) (Daewoo)Chevrolet (RUS)Chevrolet (USA / CAN)Chrysler (EU)Chrysler (USA / CAN)CitroënDaciaDaihatsu (EU)Daihatsu (RUS)DaimlerDatsun (RUS)Dodge (EU)Dodge (USA / CAN)DRDSFerrariFiat (EU)Fiat (USA)FiskerFord (EU)Ford (RUS)Ford (USA)FSOGalloperGAZGenesis (USA)GMC (USA / CAN)Honda (EU)Honda (JAP)Honda (RUS)Honda (USA / CAN)Hummer (USA / CAN)Hyundai (EU)Hyundai (RUS)Hyundai (USA)Infiniti (EU)Infiniti (RUS)Infiniti (USA)IsuzuIvecoJaguarJeep (EU)Jeep (USA / CAN)Kia (EU)Kia (RUS)Kia (USA / CAN)Lada (VAZ / Zhiguli)LagondaLamborghiniLanciaLand RoverLandwindLexus (EU)Lexus (RUS)Lexus (USA / CAN)Lifan (RUS)LincolnLotusMahindraMaseratiMaybachMazda (EU)Mazda (JAP)Mazda (USA / CAN)MegaMercedes-Benz (EU)Mercedes-Benz (USA / CAN)MercuryMetrocabMGMINI (EU)MINI (USA)Mitsubishi (EU)Mitsubishi (JAP)Mitsubishi (USA / CAN)MorganMoskvichNissan (EU)Nissan (RUS)Nissan (USA / CAN)NobleOldsmobile (USA / CAN)Opel (EU)Opel (RUS)PeroduaPeugeot (EU)Peugeot (RUS)Pontiac (EU)Pontiac (USA / CAN)PorscheProtonRavon (RUS)Renault (EU)Renault (RUS)Rolls-RoyceRoverSaabSamsungSantanaSaturn (USA / CAN)Scion (USA / CAN)SeatSkodaSmartSpyker CarsSsangYongSubaru (EU)Subaru (JAP)Subaru (USA / CAN)SuzukiTagazTataTeslaTh!nkThe London EV CompanyThe London Taxi CompanyToyota (EU)Toyota (JAP)Toyota (RUS)Toyota (USA / CAN)TVRUAZUz-Daewoo (RUS)VauxhallVencerVolkswagen (VW) (EU) Volkswagen (VW) (RUS)Volkswagen (VW) (USA / CAN)Volvo (EU)Volvo (USA / CAN)ZAZ
Модель выберите
Тип выберите
Интернет-кампус ZEISS Microscopy | Ссылки FRET
Динамическое взаимодействие между белками и другими биомолекулами в живых клетках играет важную роль в широком спектре важных процессов. Хотя эти взаимодействия классически изучаются в флуоресцентной микроскопии с использованием методов совместной локализации, эти взаимодействия могут предоставить дополнительную информацию при применении к флуоресцентным белкам в микроскопии для визуализации живых клеток с использованием методов резонансной передачи энергии. Ссылки, перечисленные ниже, указывают на обзор статей в научной литературе, которые должны стать отличной отправной точкой для исследователей, ищущих информацию о методологии FRET.
Поршень, Д. В. и Кремерс, Г. Дж.
Флуоресцентный белок FRET: хорошее, плохое и уродливое. Тенденции в биохимических науках 32 : 407-414 (2007). Одна из лучших обзорных статей для исследователей, плохо знакомых с методологией резонансной передачи энергии. Авторы обсуждают различные подводные камни, связанные с применением методов FRET для визуализации живых клеток с использованием флуоресцентных белков. Также рассмотрены физические основы FRET и различные подходы к точному измерению FRET.
Фогель, С.С., Талер, К. и Кушик, С.В.
Причудливый FRET. Наука STKE 331 : re2 (2006). Введение в методы FRET с упором на использование стандартов для определения эффективности FRET в качестве основы для дальнейших исследований. Включено описание физических принципов, окружающих FRET, обсуждение того, как FRET может быть использован для расшифровки межмолекулярных взаимодействий, и обзор задействованных методов. Также описываются точность и интерпретация измерений FRET.
Страйер, Л.
Перенос энергии флуоресценции как спектроскопическая линейка. Ежегодные обзоры биохимии 47 : 819-846 (1978). Эта статья, впервые опубликованная более 30 лет назад, остается одним из краеугольных обзоров теории FRET и ее экспериментального применения. Обсуждаемые темы включают оригинальную теорию Ферстера, измерение эффективности переноса, флуоресцентные реагенты для мечения внутриклеточных структур и примеры применения.
Ву, П.Г. и Бранд, Л.
Резонансный перенос энергии: методы и приложения. Аналитическая биохимия 218 : 1-13 (1994). В этом основополагающем документе рассматриваются практические аспекты методологии FRET. К ним относятся подготовка образцов, определение расстояния, стратегии обнаружения, измерения с временным разрешением и анализ данных.
Ярес-Эриджман, Э.А. и Джовин Т.
FRET визуализация. Nature Biotechnology 21 : 1387-1395 (2003).Возможно, это один из самых полных обзоров, когда-либо опубликованных по технологии FRET, этот документ содержит исчерпывающее обсуждение теории, методологии и приложений, начиная от модельных систем и заканчивая отдельными молекулами и визуализацией живых клеток. Статья также включает полезный учебник по фотофизическим явлениям молекул, потенциально участвующих в анализах FRET.
Берни К. и Данусер Г.
FRET или без FRET: количественное сравнение. Biophysical Journal 84 : 3992-4010 (2003).В этой обзорной статье, разработанной для обеспечения дорожной карты для количественного сравнения различных методов измерения FRET, предлагается поверхностная система FRET с контролируемыми уровнями донорных и акцепторных флуорофоров на фиксированных расстояниях. Система поддерживается теоретическими расчетами и экспериментальной проверкой в различных условиях.
Bastiaens, P. I.H. и Pepperkok, R.
Наблюдение за белками в их естественной среде обитания: живой клетке. Тенденции в биохимических науках 25 : 631-637 (2000).Отличный обзор применения FRET и связанных с ним методов с использованием флуоресцентных белков в живых клетках. В дополнение к обсуждению FRET и методологии визуализации на протяжении всей жизни (FLIM), в статье также кратко рассматривается восстановление после фотообесцвечивания (FRAP) и корреляционной спектроскопии (FCS), а также многоцветная флуоресцентная визуализация.
Чен, Ю., Миллс, Дж. Д. и Периасами, А.
Локализация белка в живых клетках и тканях с помощью FRET и FLIM. Дифференциация 71 : 528-541 (2003).Сосредоточившись на флуоресцентных белках, в этой статье исследуются различные методы микроскопического освещения, применяемые для измерений FRET, включая широкопольные, конфокальные и многофотонные. Также рассмотрены теория FRET и различные алгоритмы анализа данных, предназначенные для коррекции артефактов, таких как спектральное просвечивание.
Гордон, Г. У., Берри, Г., Лян, X. Х., Левин, Б. и Герман, Б.
Количественные измерения флуоресцентного резонансного переноса энергии с использованием флуоресцентной микроскопии. Biophysical Journal 74 : 2702-2713 (1998). Подробное обсуждение потенциальных артефактов, часто встречающихся при проведении измерений FRET. Среди описанных ловушек — прямое возбуждение акцептора и зависимость FRET от концентрации акцептора. Методология, представленная в этой статье, исправляет перекрестные помехи и зависимость от концентрации. Включены несколько экспериментальных примеров.
Кенуорти, А. К.
Визуализация белок-белковых взаимодействий с помощью флуоресцентной резонансной микроскопии с переносом энергии. Методы 24 : 289-296 (2001). В этой статье рассматриваются методы определения того, взаимодействуют ли белки, которые колокализованы на уровне световой микроскопии, друг с другом. Вместо флуоресцентных белков в исследуемой системе используется метод акцепторного фотообесцвечивания с использованием синтетических красителей в фиксированных клетках, которые нацелены на плазматическую мембрану.
Fret-King ‘Black Label’ Country Squire Semitone Специальный обзор
ЛУЧШИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ НА СЕГОДНЯ
Мы не знаем, почему именно Fret-King никогда не добивался больших успехов.Компания неизменно производит хорошие гитары и всегда ставит галочку в рамках доступной цены на уровне «Black Label».
В 2018 году бренд расстался со своим первоначальным владельцем и дизайнером Тревом Уилкинсоном, но недостатка в гитарах, производимых в Индии, по-прежнему нет. Текущий ассортимент, безусловно, обширен и включает в себя множество классических моделей, включая Corona, вдохновленную Strat, версию Eclat, основанную на Les Paul, и, как здесь, Country Squire, производную от Tele.
Попутно Fret-King зацепил очень опытных артистов, таких как Джерри Донахью, Джефф Уайтхорн, Джон Верити, Дэнни Брайант, Гордон Гилтрап, Джон Йоргенсон, Джон Этеридж и Дэйв Колвелл.
Country Squire Semitone Special был представлен еще в 2013 году в едином финише Green Burst с полностью кленовым грифом — просьба шотландского гитариста Эша Гупты заполнить дыру, оставленную давно потерянным Fender.
Мы пропустили это тогда, поэтому с недавним анонсом новой версии Blue Burst с накладкой из черного дерева есть повод испытать ее. Короче говоря, это очень аккуратный дизайн с идеалом «все, кроме кухонной раковины», разумная цена и приличная сумка для работы.Что дает?
Прямо из чехла, это очень играбельная гитара … с быстрой, живой реакцией и вместительным выступом без розетки.
Как вы можете видеть, чисто двойная форма с окантовкой по краям представляет собой стильный стилизованный подход к игре. Telecaster со слегка смещенным основанием и более округлым плечом, переходящим в более широкий тройной вырез с более тонким рупором. Основная информация о спецификации цитирует корпус как состоящий из двух частей из американской ольхи, в чем у нас нет оснований сомневаться.
Глядя через единственное f-отверстие, слегка шероховатая древесина выглядит как ольха, хотя вы можете подумать, что передняя и задняя часть выглядят немного больше как ясень под этой полупрозрачной отделкой.
Эти черные ручки в стиле Jazz Bass добавляют к звучанию хот-род. У нас есть мастер-громкость, мастер-тон и вари-катушка, которая озвучивает полные и разделенные / отстукированные звуки из звукоснимателей грифа и бриджа. (Изображение предоставлено Future / Phil Barker)Также не сразу понятно, какая часть тела состоит из воздуха. Ясно, что под этим f-отверстием есть полость, которая, кажется, заканчивается вокруг талии, хотя постукивание по этому плечу предполагает наличие другой закрытой полости. За мостом он тоже кажется довольно прочным, но прикосновение к корпусу предполагает, что у нас может быть еще одна герметичная полость под фактической полостью управления.
Удалив скретч-пластину, есть открытый путь от кончика бриджа для грифа и среднего звукоснимателя. Одним из результатов этой воздушной конструкции является его легкий вес — всего 2,97 кг (6,54 фунта).
Кленовый гриф тоже немного отличается тем, что у него есть пятка, которая входит в корпус и немного выступает под грифом, в отличие от Fender и больше похожего на PRS. Это стабильное соединение с нулевым перемещением, а четыре винта, крепящие шейку к корпусу, находятся в утопленных шайбах. Передняя бабка заметно отличается своим W-образным вырезом на верхней стороне и очень крутым падением из-за гайки на лицевую сторону передней бабки.
Мы не ожидали, что гриф из черного дерева за эти деньги, с измеренным радиусом 241 мм (9,5 дюйма) и аккуратным фреттингом из проволоки средней длины, мы начинаем задаваться вопросом, есть ли у нас цена Правильно.
Это более ценное восприятие продолжается с оборудованием Wilkinson: классическая пластина моста Tele с тремя компенсированными латунными седлами. Как и следовало ожидать, он сквозной, но есть и возможность загрузки сверху. Современные тюнеры с раздельными стойками имеют довольно высокие стойки, которые подходят для более глубокой геометрии грифа, хотя необходимо большое дерево струн, чтобы натянуть две верхние струны за правильно обрезанной синтетической гайкой.
Мы не ожидали, что гриф из черного дерева … И это более ценное восприятие продолжается с оборудованием Wilkinson
Заметно отличаясь от других моделей Country Squire, наш Special устанавливает звукосниматели грифа и середины, а также его элементы управления и Пятипозиционный рычажный переключатель на белой / черно-белой пластиковой пластине для царапин, которая больше по стилю Stratocaster.
Изображение 1 из 3 (Изображение предоставлено Future / Phil Barker)Больше похоже на PRS, чем на Fender, гриф имеет собственную пятку, которая привинчивается к корпусу и проходит под гриф звукоснимателя.Очень стабильное соединение. Доска здесь из черного дерева.
Изображение 2 из 3 (Изображение предоставлено Future / Phil Barker)Это явно стандартный бридж в стиле Tele, но, по крайней мере, мы получаем компенсированные седла для улучшения интонации. У вас также есть выбор: сквозная или верхняя загрузка.
Изображение 3 из 3 (Изображение предоставлено Future / Phil Barker)Передняя бабка с вырезом «W» на стороне высоких частот, имеет тюнеры с раздельными стойками и большое дерево струн.
Feel & Sounds
Прямо из чехла это одна очень играбельная гитара.Высота струны установлена на уровне ударов на высоких частотах 1,6 мм и низких частотах на 12 ладу. Гриф с атласной отделкой выглядит очень современным Fender — 21,9 мм на 1-м ладу и 23 мм на 12-м.
Быстрый, живой отклик с вместительным выступом без розетки, а небольшой вес делает сидящего игрока очень удобным, хотя ремешок легко фиксируется текстурированным ремешком с легким натягиванием на шею.
Звукосниматели — все от Wilkinson, и в плане управления у нас есть пятипозиционный селектор звукоснимателей в стиле Strat, мастер-громкость и мастер-тон — все это стандартно.Самый нижний поворотный регулятор называется вари-катушкой, что добавляет удовольствия.
Таким образом, в мостовом положении у нас есть одиночная катушка Tele-style с отводом. В режиме полной катушки измеренный постоянный ток составляет 9,51 кОм; при нажатии на катушку Vari мы теряем около трети провода, в результате чего DCR составляет 6,59 кОм. На грифе то, что похоже на хамбакер Fender Wide Range, но на самом деле это винтажный хамбакер Уилкинсона с измеренным DCR 7,05k. Когда разделение катушек активируется регулятором Vari-coil, внутренняя перемычка, обращенная к катушке, озвучивается с DCR равным 3.57к.
Регулятор Vari-coil представляет собой концентрический горшок с двумя группами, а громкость и тон — Alpha 500k с линейным (B) и звуковым (A) сужениями соответственно. Предел тона 0,022 мкФ. (Изображение предоставлено Future / Phil Barker)Итак, с этой катушкой Vari, повернутой по часовой стрелке, она озвучивает полные катушки звукоснимателей грифа и бриджа. Идея в том, что когда вы вращаете его против часовой стрелки, вы постепенно превращаетесь в перемычку с резьбой и гриф с разрезной катушкой. К сожалению, вари-катушка не обеспечивает плавный переход от полных витков грифа и моста к разделению и ответвлению: это либо / либо.
Да, и нет никаких уловок со средней одиночной катушкой с перемоткой (6,96 кОм), которая не подключена к вари-катушке.
Как водить Special — дело ваше. Мы начали с того, что вари-катушка полностью повернула против часовой стрелки, озвучивая более тонкие звуки грифа и мостика. Здесь есть что исследовать, хотя пятиполосный звук дает нам голоса в стиле Strat, четко обозначенные камерной конструкцией корпуса.
Средняя одиночная катушка — хорошее место для начала и хорошее место, чтобы привыкнуть к слегка басовой перкуссии и щелчкам гитары.Смесь мидла / бриджа, безусловно, очень похожа на Strat с текстурой и отскоком, в то время как один только мост имеет определенный характер Tele с четкостью и резкостью.
Небольшая модификация могла бы пойти по пути, если это ваша сумка
Одинарная катушка грифа на самом деле звучит больше как у Tele с небольшой дополнительной ясностью, а не более древесным и ударным голосом хорошего страта. Но поверните варикатушку до упора по часовой стрелке, и вы как будто нажмете «большой» переключатель.
Хамбакер с полным грифом имеет толстый голос с достаточной ясностью для четкого определения аккордов.Незадействованный бридж заметно громче и мощнее, чего, безусловно, достаточно, чтобы превратить чистый канал в волосатый хруст.
Verdict
Типичная для Fret-King, эта гитара привносит немного больше как в дизайн, так и в звуковой потенциал. Страна-производитель гитары не указана, но мы понимаем, что она сделана на современном заводе в Индии, который уже вызывает интерес у многих крупных брендов.
Это нас не удивляет — это аккуратная работа. Тем не менее, конус на этой вари-катушке работает не так, как задумано, и жаль, что мы не можем озвучивать бридж и средние звукосниматели в стиле Tele.Но по этой цене небольшая модификация может иметь большое значение, если это ваша сумка. Трев Уилкинсон, возможно, больше не участвует в разработке гитар Fret-King, но он оставил немало наследства — как показывает этот Special. Мы надеемся, что бренд продолжит двигаться вперед. Определенно стоит посмотреть.
Specs
(Изображение предоставлено Future / Phil Barker)- ЦЕНА: 705 долларов США, 629 фунтов стерлингов (включая сумку)
- ПРОИСХОЖДЕНИЕ: Индия
- ТИП: Электрооборудование с одинарным вырезом
- КОРПУС: Американская ольха под патрон
- ШЕЯ: Клен, на болтах
- ДЛИНА МАСШТАБА: 648 мм (25.5 дюймов)
- ГАЙКА / ШИРИНА: Синтетика / 42,5 мм
- ПАЛЬЦЕВ: Черное дерево, белые точки, измеренный радиус 241 мм (9,5 дюйма)
- FRETS: 22, средние
- HARDW струна или бридж WTB с верхней загрузкой с компенсированными латунными седлами, тюнеры Wilkinson WJ07 — хромированные
- РАССТОЯНИЕ СТРУН, МОСТ: 54 мм
- ЭЛЕКТРИКА: Звукосниматели Wilkinson: WVC 3 + 3 хамбакер (гриф), оверник Одинарная катушка V WHS (посередине) и одиночная катушка WVOBT (мост), 5-позиционный переключатель звукоснимателей, общая громкость, мастер-тон, регулятор вари-катушки (разделяет шейный звукосниматель и нажимает на мостовой звукосниматель)
- ВЕС (кг / фунт) : 2.97 / 6,54
- ОПЦИИ: Также доступны в цвете Ash Green Burst с накладкой из клена (705 долларов США, 629 фунтов стерлингов)
- ОПЦИИ ДИАПАЗОНА: Различные модели Country Squire начинаются с 569 фунтов стерлингов
- ЛЕВЫЕ РУКОЯТНИКИ: № ОТДЕЛКИ: Blue Burst (в соответствии с обзором), Ash Green Burst (с кленовой доской)
За дополнительной информацией обращайтесь к Fret-King.
ЛУЧШИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ СЕГОДНЯ
Динамическая структурная биология на основе FRET: проблемы, перспективы и призыв к практикам открытой науки
Понимание того, как биомолекулы соединяют структурную динамику с функцией, лежит в основе нескольких дисциплин и остается выдающейся целью биологии.Связывание конформационных состояний и их переходов с биохимической функцией требует способности точно определять структуру и динамику биологической системы, которая часто изменяется при связывании лиганда или находится под влиянием химических и физических свойств окружающей среды. Наиболее хорошо зарекомендовавшие себя инструменты структурной биологии предоставили с высоким разрешением «снимки» состояний в кристаллизованной или замороженной форме (например, рентгеновская кристаллография и криоэлектронная микроскопия единичных частиц, криоЭМ) или усредненное по ансамблю всех конформаций. (е.g., ядерный магнитный резонанс, ЯМР; малоугловое рассеяние рентгеновских лучей, МУРР; малоугловое рассеяние нейтронов, МУРН; двойной электронно-электронный резонанс, DEER; поперечно-сшивающая масс-спектрометрия, XL-MS; ансамбль-FRET). В последние годы дальнейшие разработки позволили этим традиционным структурным инструментам обнаруживать конформационную динамику и промежуточные продукты реакции. Например, методы ЯМР (Anthis and Clore, 2015; Clore and Iwahara, 2009; Palmer, 2004; Ravera et al., 2014; Sekhar and Kay, 2019) и методы электронного парамагнитного резонанса (Jeschke, 2018; Jeschke, 2012; Krstić). и другие., 2011) были продвинуты для изучения конформационной динамики и захвата временных промежуточных соединений. Кристаллографические исследования с временным разрешением использовались для определения функционально релевантных структурных смещений, связанных с биологической функцией (Kupitz et al., 2014; Moffat, 2001; Schlichting et al., 1990; Schlichting and Chu, 2000; Schotte et al., 2003). ). Достижения в микрожидкостных устройствах для смешивания и распыления позволили использовать криоЭМ с временным разрешением (Feng et al., 2017; Kaledhonkar et al., 2018) и масс-спектрометрию с поперечными связями (XL-MS или CL-MS) (Braitbard et al., 2019; Brodie et al., 2019; Чен и др., 2020; Якобуччи и др., 2019; Мураками и др., 2013; Славин, Калисман, 2018). Прогресс в вычислительных методах также предоставил новые инструменты для изучения биомолекулярной структуры и динамики. Каждое из этих достижений подчеркивает возросшее понимание того, что необходимо напрямую и непрерывно отслеживать динамические свойства отдельных биомолекул, чтобы понять их функцию и регуляцию.
В этом контексте FRET (называемый резонансным переносом энергии флуоресценции или резонансным переносом энергии Фёрстера [Braslavsky et al., 2008]) исследования на ансамблевом и одномолекулярном уровнях стали важными инструментами для измерения структурной динамики по крайней мере на 12 порядков во времени и картирования конформационных и функциональных неоднородностей биомолекул в условиях окружающей среды. Исследования FRET, исследующие затухание флуоресценции на уровне ансамбля (Grinvald et al., 1972; Haas et al., 1975; Haas, Steinberg, 1984; Hochstrasser et al., 1992) (FRET с временным разрешением) позволили уже в начале 1970-х годов исследование структурных неоднородностей на временах, превышающих время жизни флуоресценции (несколько нс).Этот подход используется до сих пор (Becker, 2019; Orevi et al., 2014; Peulen et al., 2017) и перенесен в исследования одиночных молекул. Возможность измерения FRET в отдельных молекулах (Deniz et al., 1999; Ha et al., 1996; Lerner et al., 2018a) сделала этот метод еще более привлекательным. Одномолекулярный FRET (smFRET) широко используется для изучения конформационной динамики и биомолекулярных взаимодействий в стационарных условиях (Dupuis et al., 2014; Larsen et al., 2019; Lerner et al., 2018а; Lipman et al., 2003; Маргиттай и др., 2003; Мазаль и Аран, 2019; Michalet et al., 2006; Ореви и др., 2014; Ray et al., 2019; Sasmal et al., 2016; Schuler et al., 2005; Schuler et al., 2002; Steiner et al., 2008; Zhuang et al., 2000). Примечательно, что во многих механистических исследованиях достаточно использовать FRET для различения различных конформаций и определения кинетических скоростей, так что абсолютные эффективности FRET и, следовательно, расстояния не нужно определять. Однако возможность точного измерения расстояний и кинетики с помощью smFRET привела к его появлению в качестве важного инструмента в эту новую эру « динамической структурной биологии » для картирования биомолекулярных неоднородностей и для измерения структурной динамики в широком диапазоне временных масштабов (Lerner и другие., 2018а; Мазаль и Аран, 2019; Санабрия и др., 2020; Шулер и Хофманн, 2013; Weiss, 1999).
Одномолекулярные методы FRET (smFRET) имеют много преимуществ в качестве метода структурной биологии, в том числе:
чувствительность к макромолекулярным расстояниям (2,5–10 нм),
способность разрешать структурные и динамические неоднородности,
высококачественные измерения с низким потреблением образцов интересующих молекул (низкие концентрации и низкие объемы), поскольку образец анализируется по одной молекуле за раз,
определение структурных переходов в состоянии равновесия, следовательно, без необходимости синхронизации,
возможность обнаружения (очень) редких событий.Действительно, в биологии наиболее интересными для изучения молекулы часто являются редкие, функционально активные молекулы среди моря неактивных молекул,
высокая чувствительность и специфичность для меченых молекул. Поскольку только меченая молекула вносит уникальный вклад в детектируемый сигнал, эти индикаторы также могут применяться в качестве FRET-репортеров в тесноте (Dupuis et al., 2014; Soranno et al., 2014; Zosel et al., 2020b) (отсюда smFRET может использоваться для проверки результатов, определенных изолированно, или обнаружения модуляции конформационных предпочтений и / или структурной динамики посредством так называемых пяти взаимодействий [Guin and Gruebele, 2019]), и
высокая специфичность в отношении остатков / доменов за счет специфического мечения.Биомолекулы могут быть специально помечены уникальной парой красителей, что позволяет проводить измерения smFRET для всех размеров молекул, включая большие сложные сборки (см. Рисунок 1 [Kilic et al., 2018]), активные биологические машины (например, рибосомы) ( Dunkle et al., 2011) и даже на целых нативных вирионах (Lu et al., 2019; Munro et al., 2014).
Рабочий процесс моделирования динамических структур по измерениям FRET.
( A ) Интеграционное моделирование требует структурной и динамической информации. Предварительная информация из традиционных подходов (рентген, ЯМР, криоЭМ) вместе с вычислительными инструментами определяет пространство возможных решений для структурного моделирования с помощью FRET. Комбинация структурной (расстояния между красителями) и динамической информации (кинетическая связь и обменные курсы) позволяет идентифицировать непротиворечивую модель. ( B ) Изучение структуры и динамики хроматиновых волокон.Комбинированное TIRF и конфокальное FRET исследование структуры и динамики хроматиновых волокон с использованием трех позиций маркировки FRET (DA1-3) для двух пар красителей с различными расстояниями Ферстера. Расстояния Фёрстера (определены в разделе Расстояния между красителями, уравнение 6). Предварительная структурная информация, полученная с помощью криоэлектронной микроскопии (вверху слева) (Song et al., 2014) и рентгеновской кристаллографии (вверху, справа PDB ID: 1ZBB Schalch et al., 2005), объединена со структурной и динамической информацией. полученные в результате экспериментов FRET на иммобилизованных молекулах, измеренных с помощью микроскопии полного внутреннего отражения (TIRF), и на свободно диффундирующих молекулах с помощью конфокальной микроскопии (Kilic et al., 2018). На основе объединенной информации получается согласованная модель конформаций хроматиновых волокон со смещенными регистрами, которые связаны медленными (> 100 мс) и быстрыми процессами декомпакции (150 мкс), которые не протекают напрямую, а скорее через открытое волокно. конформация. Рисунок 1B был воспроизведен с рисунков 1, 3 и 6 в Kilic et al., 2018, Nature Communications с разрешения, опубликованном под Международной общественной лицензией Creative Commons Attribution 4.0 (CC BY 4.0; https: // creativecommons.org / licenses / by / 4.0 /).
© 2018, Kilic et al. Панель B была воспроизведена с рисунков 1, 3 и 6 в Kilic et al., 2018 с разрешения, опубликованного в соответствии с Международной общественной лицензией Creative Commons Attribution 4.0.
Несколько методов были использованы для определения структурных ансамблей, таких как ЯМР, одночастичная криоЭМ или XL-MS, а недавно также smFRET в интегративном / гибридном (I / H) подходе с компьютерным моделированием для преодоления разреженности экспериментальных данных. относительно атомистического описания (Берман и др., 2019; де Соуза и Пикотти, 2020; Димура и др., 2020; Gauto et al., 2019; Кукос и Бонвин, 2020; На и Пэк, 2020; Тан и Гонг, 2020; Webb et al., 2018). Структурные модели I / H, полученные из экспериментов smFRET с использованием расстояний между красителями в качестве ограничений, были описаны для гибких свернутых белков (Brunger et al., 2011; Hellenkamp et al., 2017; Margittai et al., 2003; McCann et al., 2012). ), конформационные ансамбли неупорядоченных / неструктурированных и развернутых белков (Borgia et al., 2018; Holmstrom et al., 2018; Schuler et al., 2020), нуклеиновые кислоты и комплексы белок-нуклеиновая кислота (Craggs et al., 2019; Craggs, Kapanidis, 2012; Kalinin et al., 2012; Lerner et al., 2018b; Muschielok et al., 2008). ; Возняк и др., 2008).
Еще одним уникальным аспектом исследований smFRET является то, что структурная, кинетическая и спектроскопическая информация о больших и сложных системах может быть записана одновременно в одном измерении. Это облегчает объединение динамической и структурной информации в интегративный подход к (рис. 1A) (Hellenkamp et al., 2017; Килич и др., 2018; Ли и др., 2020b; Санабрия и др., 2020; Вассерман и др., 2016; Янез Ороско и др., 2018):
.определяют количество возможных структур, согласующихся с данными,
потенциально снижает неоднозначность между различными структурными моделями, совместимыми с экспериментальными данными, а
раскрывают структурно разрешенные динамические пути обмена.
В качестве примера на рисунке 1B показан результат мультимодального исследования smFRET конформационного ландшафта 12-мерного массива хроматина (~ 2.5 MDa) (Kilic et al., 2018) с динамикой, происходящей во временных масштабах от наносекунд до часов. SmFRET эксперименты могут обнаруживать гибкие конформации хроматина (Рисунок 1B, средняя панель), показывая их динамическую структурную неоднородность (Рисунок 1B, нижняя панель), в отличие от хорошо упорядоченных статических структур хроматиновых волокон (Рисунок 1B, верхняя панель). Эти гибкие, частично открытые и открытые конформации, которые довольно многочисленны в растворе (популяция> 70%; Рисунок 1B, нижняя панель), не были разрешены ранее, хотя они необходимы для правильной организации и функции гена.Они представляют собой центральный узел взаимопревращений для отдельных регистров стэкинга хроматина и их трудно обнаружить с помощью других структурных методов. Такой подход к визуализации биомолекул в действии в условиях окружающей среды подчеркивает важность их динамической природы, разрешая переходы между различными конформационными состояниями, что во многих случаях способствует их функции (Aviram et al., 2018; Henzler-Wildman et al., 2007; Iljina et al., 2020; Lerner et al., 2018b; Sanabria et al., 2020; Tassis et al., 2020).
ИзмеренияSmFRET обычно выполняются с использованием двух подходов: с использованием иммобилизованных на поверхности молекул с использованием флуоресцентной микроскопии полного внутреннего отражения (TIRFM) и обнаружения на основе камеры или со свободно диффундирующими молекулами в растворе с использованием конфокальной микроскопии и точечных детекторов. Экспериментальные системы доступны в продаже, но, как правило, их изготавливают самостоятельно. Образцы готовятся, а данные собираются с использованием специальных лабораторных протоколов, где данные хранятся в различных форматах файлов и анализируются с использованием набора все более мощного программного обеспечения.Для области в целом и для структурных исследований в частности важно продемонстрировать, что smFRET как метод воспроизводим и надежен независимо от того, где и как измеряется образец. С этой целью под руководством Торстена Хугеля двадцать лабораторий объединились для измерения smFRET на нескольких конструкциях дцДНК (Hellenkamp et al., 2018a). Изучая шесть различных образцов с разными красителями и различными расстояниями между красителями, средняя эффективность FRET, полученная участвующими лабораториями, показала удивительно высокую степень согласия (ΔE между 0.02 и 0,05 в зависимости от деталей образца). Количественная оценка и воспроизводимость измерений smFRET на основе интенсивности и обсуждение анализа данных стали важной вехой. Эти стандарты дцДНК FRET теперь доступны для ежедневной калибровки и особенно полезны для новых групп, присоединяющихся к сообществу.
Вдохновленный идеями, полученными в ходе вышеупомянутой попытки FRET (Hellenkamp et al., 2018a), были начаты новые многолабораторные слепые исследования.Следующее сравнительное исследование FRET, проведенное Thorben Cordes, исследует надежность и надежность экспериментов smFRET на белках, претерпевающих индуцированные лигандом конформационные изменения (Gebhardt et al., В стадии подготовки). В этом исследовании используются два различных модельных белка для оценки воспроизводимости и точности smFRET на основе белков для измерения расстояния между красителями. Белковые системы ставят новые задачи, включая статистическую маркировку красителей, специфические для сайта свойства красителей, стабильность белков, транспортировку, хранение и конформационную динамику.Следовательно, в исследовании также оценивается способность smFRET обнаруживать и количественно оценивать динамику в различных временных масштабах от микросекунд до секунд. Еще одна задача FRET, инициированная Соней Шмид, — это программа kinSoftChallenge (http://www.kinsoftchallenge.com, Götz et al., В стадии подготовки), которая оценивает существующие инструменты для извлечения кинетической информации из временных траекторий одиночных молекул. Эта задача направлена на: (1) продемонстрировать способность кинетического анализа на основе smFRET точно выводить динамическую информацию и (2) предоставить сообществу средства оценки различных доступных программных инструментов.
Одним из важных результатов различных исследований FRET в нескольких лабораториях было то, что, хотя согласие было хорошим, его можно было улучшить еще больше. В частности, анализ данных и, в частности, исправления могут повлиять на определенную эффективность FRET и результирующие расстояния. Следовательно, открытое обсуждение того, какие подходы работают наиболее надежно, при каких условиях необходимо. Доступ к первичным данным и возможность их обработки с помощью различных подходов к анализу были и останутся наиболее прозрачным способом продвижения вперед в этой области.В настоящее время это сложно, учитывая множество вариантов используемых методов, их документации, форматов файлов и экспериментальных процедур, применяемых в разных лабораториях, для установления оптимальных условий, рабочего процесса и передовых практик даже для существующих, хорошо протестированных методов, поскольку сравнение этих методов затруднительно. требует много времени, а необходимая информация во многих случаях недоступна. С расширением открытых научных практик и представлением опубликованных данных в репозитории необходим консенсус относительно того, какие данные и метаданные следует хранить и в каких возможных форматах, чтобы их могло легко использовать сообщество.
В связи с этими соображениями и множеством возможностей для роста сообщества smFRET, несколько лабораторий, обладающих опытом в FRET, без претензий на исчерпывающий или исключительный характер, собрались, чтобы поддержать эти усилия и предложить шаги по организации сообщества вокруг последовательной и открытой науки. практики. Это действие переводится в общие методологические рекомендации или предложения, которые мы представляем после типичного рабочего процесса эксперимента smFRET, включая подготовку и определение характеристик образцов, описание установки, сбор и сохранение данных, а также анализ данных.Эти рекомендации о том, как «практиковать» smFRET, являются , а не попыткой упорядочить сообщество, а скорее первоначальным предложением, которое направлено на поощрение открытого диалога о существующих практиках в нашей области и приводит к более высокой воспроизводимости результатов экспериментов smFRET. Затем мы обсуждаем практику открытой науки, а также первые шаги, которые были предприняты для формирования международного сообщества FRET. В конце мы выделим несколько областей, в которых smFRET окажет большое влияние в различных областях науки в ближайшем будущем.
ОбзорLowden WL-25 и S-23 12-Fret
Lowden WL-25 и S-23 12 ладов: Что это?
Компактная акустическая гитара в последнее время переживает эпоху Возрождения. Независимо от того, требовали ли игроки удобных для диванов шестиструнных инструментов для лапши или чего-то более яркого, чтобы поднять свой стиль пальцев, на рынке не было недостатка в вариантах.
Тем, кто окунается в рынок высококачественных акустических гитар — возможно, не столько ищет корпус кушетки, сколько специальный инструмент для студии и сцены — неплохо было бы проверить Lowden Guitars.Серия 12 ладов Джорджа Лоудена может оказаться именно тем, что им нужно.
Здесь мы рассмотрим WL-25 и S-23. Эти 12-лады имеют во многом одну и ту же ДНК сборки и являются образцами мастерства, которым славится Лоуден.
Буква «WL» в обозначении WL-25 означает «Wee Lowden» — это компактный инструмент. Она вряд ли размером с игрушку, она больше похожа на классическую гитару, ее ширина составляет всего 335 мм. Именно между этими крайностями вы найдете бридж WL-25 из розового дерева — сразу узнаваемый как дизайн Лоудена с его верхней загрузкой и раскладкой седла.
(Изображение предоставлено Future / Olly Curtis)Когда он официально рассказывал о своей серии из 12 ладов, Лоуден заметил, что положение бриджа немного изменилось, щелкнув по середине деки, что оказывает влияние на то, как он должен думать об укреплении, но, в свою очередь, вознаграждает и мастера, и игрока акустически многообещающим предложением.
После долгих экспериментов Лоуден использовал то, что описывается как «Dolphin Bracing» для своих 12-ладов, и для двух наших обзорных моделей оно опирается на твердую верхнюю часть кедра, с восточно-индийским палисандром на задней и боковых сторонах. WL-25, в то время как S-23 имеет массив ореха сзади и по бокам, а его корпус обшит платаном.
(Изображение предоставлено Future / Olly Curtis)Мы упоминали, насколько похожи были сборки, и это то, что распространяется на шеи, каждая из которых состоит из красного дерева со стыками розового дерева. Передние бабки имеют лицевые панели из розового дерева и оснащены позолоченными тюнерами Gotoh 381 с кнопками из черного дерева. Грифы из черного дерева и избегают маркеров ладов, но есть маркеры с боковыми точками, если вы потеряете свое положение в данный момент.
S-23 немного шире, чем Wee Louden, с его корпусом S-типа размером 374 мм в самом широком, 105 мм в самом глубоком, а WL-25 — стройными 100 мм при максимальной глубине обода.
При 24,8 «S-23 имеет более длинную шкалу, чем WL-25, у которой очень доступная шкала 24». Ширина гайки идентична, однако каждая из них имеет ширину 45 мм и изготовлена из кости.
(Изображение предоставлено Future / Olly Curtis)Конечно, говоря о спецификациях и акустике Lowden, важно отметить, что существует множество доступных пользовательских опций. У этих акустических систем WL-25 и S-23 нет электроники, но Lowden с радостью поместит звукосниматель и предусилитель, с системами LR Baggs Anthem и Highlander IP1 / IP2 в меню.
Доступны альтернативные виды древесины. WL-22 предлагается с верхом из красного кедра, спиной и боками из красного дерева или из красного кедра и ореха, а верх WL-35 Adirondack (красная ель) и кокоболо сзади и по бокам. Аналогичные варианты доступны и для его S-образного собрата.
Lowden WL-25 и S-23 12-лад: производительность и вердикт
(Изображение предоставлено Future / Olly Curtis)Отделка здесь матовая, матовая, естественная, с прозрачными накладками, придающими верху обнаженный вид .Конструкция безупречна, как и следовало ожидать, и есть ощущение, что эта компактная акустика сохраняет элемент неожиданности для своего тона.
Также обратите внимание на …
(Изображение предоставлено Lowden) • Lowden 32SE Stage Edition
Превосходный инструмент, созданный для сцены, но с очаровательным акустическим голосом. Если вы выступающий музыкант, обязательно попробуйте.
• Taylor 612ce 12 ладов
612ce — невероятно удобная гитара для игры.Он легко ложится на ваше тело, и ваша рука ощущается заметно расслабленной благодаря этой немного более короткой шкале. Пребывание в первой позиции дает удивительно громкий и сложный тон.
• Larrivée C-03R-TE Custom
Благодаря своим динамическим тонам, потрясающей конструкции и одной из самых тонких настроек, которые мы когда-либо играли, C-03R-TE — это акустика, которая покорит игроков любое количество стилей.
Когда вы впервые берете в руки WL-25, кажется, что это ошибка, но как только вы потревожите пару аккордов, профиль грифа станет заметно взрослым.Это очень полный C-профиль, и он очень удобен.
Конечно, из-за этого WL-25 кажется немного тяжелым, когда вы приспосабливаетесь к его пропорциям, но это временное ощущение, поскольку 45-миллиметровая гайка открывает всевозможные возможности стиля пальца.
Эти возможности чрезвычайно выигрывают за счет восторженного отклика на высоких частотах, который передает ваши аккорды с превосходной ясностью. У вас может не быть мощных басов и низких средних частот, которые может предложить большая деревянная коробка, но у этого нет недостатка в авторитете.Это немного громкая акустика.
Часто акустика с маленьким корпусом и салонные гитары ассоциировались с дешевыми инструментами — гитары, которые мы унаследовали, мы начинаем и возвращаемся в качестве своего рода комфортного одеяла с шестью струнами или для небрежного наброска. вниз музыкальные идеи, которые мы еще не совсем реализовали.
Пять минут с WL-25 изменили бы это восприятие; это поднимает формат. Сдержанная эстетика, которую мы привыкли видеть у Лоудена, идеально ему подходит.Это серьезный инструмент.
(Изображение предоставлено Future / Olly Curtis)Модель S-23, построенная из орехового дерева и красного кедра, является заманчивой перспективой. Здесь замечательная глубина, стойкий сустейн и настоящее искрометное звучание при игре аккордов или отдельных строк.
Конечно, от этого более широкого и глубокого тела должно исходить немного больше энергии, но как бы вы ни приписали его тон магии, это звук поистине волшебный. Он звучит лучше, чем WL-25? Некоторые игроки утверждают, что это так.Он вполне может оказаться более полезным в разных ситуациях, чем WL-25.
Но и то, и другое сложно подавить. Обе модели бросят вызов любым предвзятым представлениям об акустических гитарах с маленьким корпусом, а с Lowden у вас есть возможность выбрать ту, которая вам нравится.
Вердикт MusicRadar: безошибочное мастерство и вдохновенная сборка наделяют эту миниатюрную акустику роскошными тонами, WL-25 предлагает бутик-салон, тонизацию салона на все времена, а S-23 извлекает выгоду из немного большего пространства с более крупный голос, сохраняющий свое верхнее мерцание.
Изображение 1 из 3 (Изображение предоставлено Future / Olly Curtis) Изображение 2 из 3 (Изображение предоставлено: Future / Olly Curtis) Изображение 3 из 3 (Изображение предоставлено Future / Olly Curtis)Lowden WL -25 и S-23 12-лад: Интернет говорит, что
«Игра на WL-25 — отличный опыт, и мы обнаружили, что выбрали стиль квази-ренессанса, прежде чем даже заметили …
S-23 разделяет многие из них. Детали конструкции WL, за исключением того, что его задняя часть и боковые стороны сделаны из орехового дерева, который, как гласит легенда, имеет тональный отпечаток, который находится между темной сложностью палисандра и ярким звонком клена.
Инструменты с изображением ореха в прошлом вдохновляли нас на этих страницах, поэтому неудивительно, что S-23 поет красиво ярким, воздушным голосом ».
Гитарист
Lowden WL-25 and S -23 12 ладов: практические демо
гитарист
акустический центр
гитары Lowden
гитары казино
Галерея гитар
Lowden WL-25 и S-23 12 ладов: Технические характеристики
Lowden S-23 12 ладов
Lowden S-23 12 ладов (Изображение предоставлено Future / Olly Curtis)- ЦЕНА: £ 3475 (включая футляр)
- ПРОИСХОЖДЕНИЕ: Северная Ирландия
- ТИП: Акустическая система S-типа
- TOP: Красный кедр 90 192
- СПИНКА / СТОРОНЫ: орех с креплениями из платана
- МАКСИМАЛЬНАЯ ГЛУБИНА ОБОДА: 105 мм
- МАКСИМАЛЬНАЯ ШИРИНА КОРПУСА: 374 мм
- ШЕЯ: Красное дерево 24 мм (длина сращивания из розового дерева) .8 ”)
- ТЮНЕРЫ: Gotoh 381
- ГАЙКА / ШИРИНА: Кость / 45 мм
- ПАЛЬЦА: Ebony
- FRETS: 18 BRIDGE
- Седло 55,6 мм
- ВЕС (кг / фунт): 1,7 / 3,74
- ОПЦИИ: При заказе доступны различные подборщики / незначительные изменения конструкции. Подробную информацию см. На веб-сайте. / Индийский палисандр (3475 фунтов стерлингов) до S-35 Adirondack / Cocobolo (5975 фунтов стерлингов)
- ЛЕВЫЕ РУЧКИ: Да
- ОТДЕЛКА: Matt Natural
Lowden WL-25
Lowden 25 (Изображение предоставлено: Future / Olly Curtis)- ЦЕНА: 3475 фунтов стерлингов (включая футляр)
- ПРОИСХОЖДЕНИЕ: Северная Ирландия
- ТИП: Маленькое тело Wee Lowden
- TOP: Красный кедр
- ЗАДНЯЯ ЧАСТЬ / СТОРОНЫ: Восточно-индийское розовое дерево
- МАКСИМАЛЬНАЯ ГЛУБИНА ОБОДА: 100 мм
- МАКСИМАЛЬНАЯ ШИРИНА ТЕЛА: 335 мм
- ШЕСТЬ: Красное дерево со стыками розового дерева )
- ТЮНЕРЫ: Gotoh 3 81
- ГАЙКА / ШИРИНА: Кость / 45 мм
- ПАЛЬЦА: Ebony
- ЛАДЫ: 18
- МОСТ / РАССТОЯНИЕ: ВЕС с костяным седлом 9018 кг / 56 мм 9019 фунтов : 1.6 / 3,5
- ОПЦИИ: При заказе доступны различные пикапы / небольшие вариации сборки. Подробную информацию см. На веб-сайте. 3475) до WL-35 Adirondack / Cocobolo (5975 фунтов стерлингов)
- ЛЕВЫЕ РУЧКИ: Да
- ОТДЕЛКА: Matte Natural
- КОНТАКТ: Гитары Lowden 9025
- Bacskai, B.J., Hochner, B., Mahaut-Smith, M., Adams, SR, Kaang, BK, Kandel, ER, and Tsien, RY, Пространственно разрешенная динамика субъединиц цАМФ и протеинкиназы A в сенсорных нейронах аплизии ., Наука 260: 222-226 (1993). | PubMed |
- Bastiaens, PIH and Jovin, TM, Микроскопия флуоресцентного резонансного переноса энергии ., В Cell Biology: A Laboratory Handbook, Volume 3 , Celis, JE (ed.), Academic Press, New York, pages 136-146 (1998). | Amazon |
- Bastiaens, PIH, Majoul, IV, Verveer, PJ, Soeling, HD, and Jovin, TM, Визуализация внутриклеточного движения и состояния четвертичной структуры AB5 токсина холеры ., The EMBO Journal 15: 4246-4253 (1996). | PubMed |
- Bastiaens, P. I.H. и Pepperkok, R., Наблюдение за белками в их естественной среде обитания: живая клетка ., Trends in Biochemical Sciences 25: 631-637 (2000). | PubMed |
- Berland, KM, Количественная оценка молекулярных взаимодействий с помощью флуоресцентной корреляционной спектроскопии ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press, New York , страницы 272-283 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Berney, C. и Danuser, G., FRET или No FRET: количественное сравнение ., Biophysical Journal 84: 3992-4010 (2003). | PubMed |
- Боттс, Дж., Такаши, Р., Торгерсон, П., Ходзуми, Т., Мюльрад, А., Морнет, Д., и Моралес, М.Ф., О механизме передачи энергии в субфрагменте миозина 1 ., Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 81: 2060-2064 (1984). | PubMed |
- Кардулло Р. А., Мунгавон Р. М. и Вольф Д. Э., Организация и динамика визуализирующих мембран ., В Биофизические и биохимические аспекты флуоресцентной спектроскопии , Дьюи Т.G. (ред.), Springer, New York, стр. 231-260 (1991). | Amazon |
- Кардулло Р. А. и Парпура В., Флуоресцентная резонансная микроскопия с переносом энергии: теория и приборы ., Методы клеточной биологии 72: 415-430 (2003). | PubMed |
- Центонзе, В.Е., Сан, М., Масуда, А., Герритсен, Х. и Херман, Б., Флуоресцентная микроскопия с резонансным переносом энергии ., Методы в энзимологии 360: 542-560 (2003). | Методы в энзимологии |
- Chan, FK-M., Siegel, RM, Zacharias, D., Swofford, R., Holmes, KL, Tsien, RY, and Lenardo, MJ, Анализ флуоресцентного резонансного переноса энергии взаимодействий рецепторов на поверхности клеток и передачи сигналов с использованием спектральных вариантов зеленого флуоресцентного белка ., Cytometry 44: 361-368 (2001). | PubMed |
- Чен Ю., Элангован М. и Периасами А., Анализ данных FRET: алгоритм ., в Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. и Day, R. N. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 126-145 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Chen, Y., Mills, J. D., and Periasamy, A., Локализация белка в живых клетках и тканях с использованием FRET и FLIM ., Differentiation 71: 528-541 (2003). | PubMed |
- Чен, Ю. и Периасами, А., Характеристика микроскопии визуализации времени жизни флуоресценции с двухфотонным возбуждением для определения локализации белка ., Microscopy Research and Technique 63: 72-80 (2004). | PubMed |
- Chen, Y. and Periasamy, A., Визуализация времени жизни флуоресценции с коррелированным временем однофотонным счетом — FRET-микроскопия для локализации белка ., В Молекулярная визуализация: FRET-микроскопия и спектроскопия , Periasamy, A. и Day, RN (ред.), Oxford University Press, New York, 239-259 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Клегг, Р.M., флуоресцентный резонансный перенос энергии ., В Fluorescence Imaging Spectroscopy and Microscopy , Wang, XF and Herman, B. (eds.), John Wiley and Sons, Inc., Нью-Йорк, страницы 179-252 (1996). | Amazon |
- Клегг Р. М., Флуоресцентный резонансный перенос энергии и нуклеиновые кислоты ., Способы энзимологии 211: 353-388 (1992). | Методы в энзимологии |
- Дэй, Р. Н., Визуализация взаимодействий фактора транскрипции Pit-1 в ядре живой клетки с помощью флуоресцентной микроскопии с резонансным переносом энергии ., Molecular Endocrinology 12: 1410-1419 (1998). | PubMed |
- Day, R. N., Nordeen, S. K., and Wan, Y., Визуализация белок-белковых взаимодействий в ядре живой клетки ., Molecular Endocrinology 13: 517-526 (1999). | PubMed |
- Day, R. N., Periasamy, A., and Schaufele, F., Микроскопия флуоресцентного резонансного переноса энергии локализованных взаимодействий белков в ядре живой клетки ., Методы 25: 4-18 (2001). | PubMed |
- Дэй, Р. Н. и Пистон, Д. У., Слежка за скрытой жизнью белков ., Nature Biotechnology 17: 425-426 (1999). | PubMed |
- Derdowski, A., Ding, L., and Spearman, P., Новый анализ флуоресцентного резонансного переноса энергии демонстрирует, что домен Pr55Gag I вируса иммунодефицита человека типа 1 опосредует взаимодействия Gag-Gag ., Journal of Вирусология 78: 1230-1242 (2004). | PubMed |
- Доманов Ю.А., Горбенко Г.П., Анализ резонансного переноса энергии в модельных мембранах: роль ориентационных эффектов ., Биофизическая химия 99: 143-154 (2002). | PubMed |
- Dos Remedios, C. G. и Moens, P. D. J., Флуоресцентная спектроскопия резонансного переноса энергии является надежным «правителем» для измерения структурных изменений в белках ., Journal of Structural Biology 115: 175-185 (1995). | PubMed |
- Элангован, М., Дэй, Р.Н., и Периасами, А., Наносекундная флуоресцентная резонансная передача энергии — визуализация времени жизни флуоресценции для локализации белковых взаимодействий в отдельной живой клетке ., Журнал микроскопии 205: 3-14 (2002). | PubMed |
- Элангован М., Дэй Р. Н. и Периасами А., Динамическая визуализация с использованием флуоресцентного резонансного переноса энергии ., BioTechniques 32: 1260-1265 (2002). | PubMed |
- Элангован, М., Валлраб, Х., Чен, Ю., Дэй, Р.Н., Баррозу, М., и Периасами, А., Характеристика микроскопии с одно- или двухфотонным возбуждением флуоресцентного резонансного переноса энергии . , Методы 29: 58-73 (2003). | PubMed |
- Эриксон М.Г., Мун Д.Л. и Юэ Д.Т., DsRed как потенциальный партнер FRET с CFP и GFP ., Biophysical Journal 85: 599-611 (2003). | PubMed |
- Фер, М., Окумото, С., Дойшл, К., Лагер, И., Лугер, Л.Л., Перссон, Дж., Кожух, Л., Лалонд, С., и Фроммер, В.Б., Development and использование флуоресцентных наносенсоров для визуализации метаболитов в живых клетках ., Biochemical Society Transactions 33: 287-290 (2005). | PubMed |
- Forde, T. S. и Hanley, Q. S., После FRET через пять этапов передачи энергии: спектроскопическое фотообесцвечивание, восстановление спектров и последовательный механизм FRET ., Фотохимические и фотобиологические науки 4: 609-616 (2005). | PubMed |
- Förster, T., Межмолекулярная миграция энергии и флуоресценция ., Annalen der Physik (Leipzig) 2: 55-75 (1948). | Энн Физ |
- Förster, T., Делокализованное возбуждение и передача возбуждения ., В Modern Quantum Chemistry , Sinanoglu, O. (ed.), Academic Press, New York, pages 93-137 (1965). | Книги Эйба |
- Gadella, T. W. J. и Jovin, T. M., Олигомеризация рецепторов эпидермального фактора роста на клетках A431 изучалась с помощью флуоресцентной микроскопии с временным разрешением. Стереохимическая модель активации рецептора тирозинкиназы ., The Journal of Cell Biology 129: 1543-1558 (1995). | PubMed |
- Гальперин Э., Верхуша В. В., Соркин А., Треххромофорная FRET-микроскопия для анализа мультипротеиновых взаимодействий в живых клетках ., Nature Methods 1: 209-217 (2004). | PubMed |
- Gautier, I., Tramier, M., Durieux, C., Coppey, J., Pansu, RB, Nicolas, JC, Kemnitz, K., and Coppey-Moisan, M., Homo-FRET microscopy in живые клетки для измерения перехода мономер-димер GFP-меченых белков ., Biophysical Journal 80: 3000-3008 (2001). | PubMed |
- Гордон, Г. У., Берри, Г., Лян, X. Х., Левин, Б., и Герман, Б., Количественные измерения флуоресцентного резонансного переноса энергии с использованием флуоресцентной микроскопии ., Biophysical Journal 74: 2702-2713 (1998). | PubMed |
- Gryczynski, Z., Gryczynski, I., and Lakowicz, JR, Basics of Fluorescence and FRET ., In Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds .), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 21-56 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Харпур, А.G., Wouters, F. S., и Bastiaens, P. I.H., Визуализация FRET между спектрально подобными молекулами GFP в отдельных клетках ., Nature Biotechnology 19: 167-169 (2001). | PubMed |
- Haustein, E., Jahnz, M., and Schwille, P., Triple FRET: инструмент для изучения дальнодействующих молекулярных взаимодействий ., ChemPhysChem 4: 745-748 (2003). | PubMed |
- He, L., Gramer, A.C., Wu, X., и Lipsky, P.E., TRAF3 образует гетеротримеры с TRAF2 и модулирует его способность опосредовать активацию NF-каппа B ., The Journal of Biological Chemistry 279: 55855-55865 (2004). | PubMed |
- Heim, R., Зеленые флуоресцентные белковые формы для передачи энергии ., Методы в энзимологии 302: 408-423 (1999). | PubMed |
- Герман Б., Микроскопия резонансного переноса энергии ., Методы клеточной биологии 30: 219-243 (1989). | PubMed |
- Hink, MA, Visser, NA, Borst, JW, van Hoek, A., and Visser, AJWG, Практическое использование скорректированных спектров возбуждения и испускания флуоресценции флуоресцентных белков в исследованиях Фёрстеровского резонансного переноса энергии (FRET) . , Journal of Fluorescence 13: 185-188 (2003). | J Флуоресценция |
- Hohng, S. и Ha, T., Одномолекулярный FRET ., В Молекулярная визуализация: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A.и Дэй, Р. Н. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 165-179 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Hoppe, A., Christensen, K., and Swanson, J. A., Стехиометрия на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии в живых клетках ., Biophysical Journal 83: 3652-3664 (2002). | PubMed |
- Jares-Erijman, E. A. и Jovin, T. M., FRET imaging ., Nature Biotechnology 21: 1387-1395 (2003). | PubMed |
- Karasawa, A., Araki, T., Nagai, T., Mizuno, H., and Miyawaki, A., Голубой и оранжевый флуоресцентные белки в качестве пары донор / акцептор для резонансной передачи энергии флуоресценции ., Биохимический журнал (Великобритания) 381: 307-312 (2004). | PubMed |
- Карпова, Т.С., Бауман, К.Т., Хе, Л., Ву, X., Граммер, А., Липски, П., Хагер, Г.Л., и МакНалли, Дж. Г., Перенос энергии резонанса флуоресценции от голубого к желтому флуоресцентному белок обнаружен акцепторным фотообесцвечиванием с использованием конфокальной микроскопии и одиночного лазера ., Журнал микроскопии 209: 56-70 (2003). | PubMed |
- Китинг, Э., Браун, С.М., и Петерсен, Н.О., Картирование молекулярных взаимодействий и транспорта в клеточных мембранах с помощью корреляционной спектроскопии изображений ., В Молекулярная визуализация: FRET-микроскопия и спектроскопия , Periasamy, A. и Day, RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 284-301 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Кенуорти, А.K., Визуализация белок-белковых взаимодействий с использованием флуоресцентной резонансной микроскопии с переносом энергии ., Methods 24: 289-296 (2001). | PubMed |
- Kenworthy, AK, Photobleaching FRET Microscopy ., In Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 146- 164 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Кенуорти, А.К., Петранова Н. и Эдидин М., FRET-микроскопия с высоким разрешением B-субъединицы холерного токсина и GPI-заякоренных белков в плазматических мембранах клеток ., Молекулярная биология клетки 11: 1645 -1655 (2000). | PubMed |
- Kikuchi, K., Сенсоры FRET на основе малых молекул, которые позволяют получать логометрические изображения живых клеток ., Bioimages 12: 55-60 (2004). | Биоизображения |
- Крецингер Р.H., Proteins and the flow of information in cell function ., In Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press, Нью-Йорк, стр. 1-20 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Laib, S. и Seeger, S., Исследования FRET взаимодействия димерных цианиновых красителей с ДНК ., Journal of Fluorescence 14: 187-191 (2004). | PubMed |
- Лидке, Д.S., Nagy, P., Barisas, BG, Heintzmann, R., Post, JN, Lidke, KA, Clayton, AHA, Arndt-Jovin, DJ, and Jovin, TM, Визуализация молекулярных взаимодействий в клетках с помощью динамических и статических анизотропия флуоресценции (rFLIM и emFRET) ., Biochemical Society Transactions 31: 1020-1027 (2003). | PubMed |
- Mattheyses, A. L., Hoppe, A. D., and Axelrod, D., Поляризованная флуоресцентная резонансная микроскопия с переносом энергии ., Biophysical Journal 87: 2787-2797 (2004). | PubMed |
- Majoul, I., Анализ действия бактериальных токсинов в живых клетках с помощью флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) ., International Journal of Medical Microbiology 293: 495-503 (2004). | PubMed |
- Mills, JD, Stone, JR, Okonkwo, DO, Periasamy, A., and Helm, GA, Многофотонная FRET-микроскопия для определения локализации белка в ткани ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Периасами, А.и Дэй, Р. Н. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 112–125 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Mills, JD, Stone, JR, Rubin, DG, Melon, DE, Okonkwo, DO, Periasamy, A., and Helm, GA, Освещение взаимодействия белков в ткани с использованием конфокального и двухфотонного возбуждения флуоресцентного резонансного переноса энергии микроскопия ., Journal of Biomedical Optics 8: 347-356 (2003). | PubMed |
- Митра, Р.Д., Сильва, С. М., и Юван, Д. С., Перенос энергии резонанса флуоресценции между производными зеленого флуоресцентного белка, излучающими синий цвет, и производными возбуждения со смещенным красным смещением ., Gene 173: 13-17 (1996). | PubMed |
- Miyawaki, A., Визуализация пространственной и временной динамики внутриклеточной передачи сигналов ., Developmental Cell 4: 295-305 (2003). | PubMed |
- Мияваки, А., Sawano, A., and Kogure, T., Освещение клеток: маркировка белков флуорофорами ., Imaging in Cell Biology 5: S1-S7 (2003). | PubMed |
- Miyawaki, A. и Tsien, R.Y., Мониторинг конформаций и взаимодействий белков с помощью флуоресцентного резонансного переноса энергии между мутантами зеленого флуоресцентного белка ., Methods in Enzymology 327: 472-500 (2000). | Методы в энзимологии |
- Мизуно, Х., Sawano, A., Eli, P., Hama, H., and Miyawaki, A., Красный флуоресцентный белок из Discosoma в качестве метки слияния и партнера для флуоресцентного резонансного переноса энергии ., Biochemistry 40 : 2502-2510 (2001). | PubMed |
- Нашми Р., Фрейзер С. Э., Лестер Х. А. и Дикинсон М. Э., Измерения FRET с использованием мультиспектральной визуализации ., В Молекулярная визуализация: FRET-микроскопия и спектроскопия , Periasamy, A.и Дэй, Р. Н. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 180–192 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Ng, T., Squire, A., Hansra, G., Bornancin, F., Prevostel, C., Hanby, A., Harris, W., Barnes, D., Schmidt, S., Mellor, H., Bastiaens, PIH, и Parker, PJ, Визуализация активации протеинкиназы C- альфа в клетках ., Science 283: 2085-2089 (1999). | PubMed |
- Нгуен, А. В. и Догерти, П. С., Эволюционная оптимизация флуоресцентных белков для внутриклеточного FRET ., Nature Biotechnology 23: 355-360 (2005). | PubMed |
- Патель, Р. К., Кумар, У., Лэмб, округ Колумбия, Элд, Дж. С., Рошвиль, М., Грант, М., Рани, А., Хазлет, Т., Патель, С. К., Граттон, Э. и Patel, YC, Связывание лиганда с рецепторами соматостатина вызывает образование рецептор-специфических олигомеров в живых клетках ., Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 99: 3294-3299 (2002). | PubMed |
- Паттерсон, Г. Х., Пистон, Д. У. и Барисас, Б. Г., Расстояния Ферстера между парами зеленых флуоресцентных белков ., Analytical Biochemistry 284: 438-440 (2000). | PubMed |
- Periasamy, A., Флуоресцентная микроскопия с резонансным переносом энергии: мини-обзор ., Journal of Biomedical Optics 6: 287-291 (2001). | PubMed |
- Периасами А. и Дэй Р.N., Визуализация белковых взаимодействий в живых клетках с использованием оцифрованной визуализации GFP и микроскопии FRET ., Methods in Cell Biology 58: 293-314 (1999). | PubMed |
- Periasamy, A. and Day, R. N., Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy ., Oxford University Press, New York, 312 pages (2005). | Молекулярная визуализация |
- Питер, М., Амир-Бег, С.М., Хьюз, М.К.Й., Кепплер, М.D., Prag, S., Marsh, M., Vojnovic, B., and Ng, T., Multiphoton-FLIM количественная оценка пары EGFP-mRFP1 FRET для локализации взаимодействий мембранный рецептор-киназа ., Biophysical Журнал 88: 1224-1237 (2005). | PubMed |
- Поллок Б. А. и Хейм Р. Использование GFP в приложениях на основе FRET ., Тенденции в клеточной биологии 9: 57-60 (1999). | PubMed |
- Рамануджан В. К., Чжан Дж.-H., Centonze, В.Е. и Герман, Б., Полосовая флуоресцентная микроскопия для визуализации времени жизни: новая технология для количественной визуализации FRET ., В Молекулярная визуализация: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day , RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 227-238 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Редфорд, Г. и Клегг, Р. М., Визуализация времени жизни флуоресценции и FRET в реальном времени с использованием усилителей изображения с быстрым стробированием ., в Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. и Day, R. N. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 193-226 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Rizzo, MA, Magnuson, MA, Drain, PF и Piston, DW, Функциональная связь между связыванием глюкокиназы с гранулами инсулина и конформационными изменениями в ответ на глюкозу и инсулин ., Journal of Biological Chemistry 277 : 34168-34175 (2002). | PubMed |
- Rizzo, M. A. и Piston, D. W., Высококонтрастное изображение флуоресцентного белка FRET с помощью флуоресцентной поляризационной микроскопии ., Biophysical Journal 88: L14-L16 (2005). | PubMed |
- Rizzuto, R., Brini, M., De Giorgi, F., Rossi, R., Heim, R., Tsien, RY, and Pozzan, T., Двойное мечение субклеточных структур GFP, нацеленным на органеллы мутанты in vivo ., Current Biology 6: 183-188 (1996). | PubMed |
- Schaufele, F., Demarco, I., and Day, RN, FRET-визуализация в широкоугольном микроскопе ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 72-94 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Schüttrigkeit, TA, Zachariae, U., von Feilitzsch, T., Wiehler, J., von Hummel, J., Steipe, B., and Michel-Beyerle, Пикосекундный временной интервал FRET в флуоресцентном белке из Красный дискосома (wt-DsRed) ., ChemPhysChem 5: 325-328 (2001). | ХимФисХим |
- Sekar, R. B. и Periasamy, A., Флуоресцентная микроскопия с резонансным переносом энергии (FRET), визуализация локализации белков живых клеток ., Journal of Cell Biology 160: 629-633 (2003). | PubMed |
- Селвин П. Р., Флуоресцентный резонансный перенос энергии ., Методы в энзимологии 246: 300-334 (1995). | Методы в энзимологии |
- Селвин П. Р., Возрождение флуоресцентного резонансного переноса энергии ., Nature Structural Biology 7: 730-734 (2000). | PubMed |
- Siegel, RM, Chan, FK-M., Zacharias, DA, Swofford, R., Holmes, KL, Tsien, RY, and Lenardo, MJ, Измерение молекулярных взаимодействий в живых клетках с помощью флуоресцентного резонансного переноса энергии между варианты зеленого флуоресцентного белка ., Science’s STKE 38: PL1 (2000). | PubMed |
- Саутто, М., Сюй, Ю. и Джонсон, CH, Биолюминесцентный резонансный перенос энергии: методы и потенциал ., В Молекулярная визуализация: FRET-микроскопия и спектроскопия , Periasamy, A. and Day, RN (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 260-271 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Сквайр, А., Вервир, П. Дж., Рокс, О., и Бастиэнс, П.I.H., Микроскопия анизотропии красного края позволяет динамическое отображение гомо-FRET между зелеными флуоресцентными белками в клетках ., Journal of Structural Biology 147: 62-69 (2004). | PubMed |
- Стэнли, К. М., Введение в FRET с упором на задействованную оптику ., Chroma Technology Corp., Рокингем, Вермонт, Примечания по применению Chroma 6: 1-14 (2003). | Технология Chroma |
- Стэнли, К.M., Введение в фильтры и зеркала для FRET ., В Molecular Imaging: FRET Microscopy and Spectroscopy , Periasamy, A. and Day, RN (eds.), Oxford University Press, Нью-Йорк, стр. 57 -71 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Страйер Л., Перенос энергии флуоресценции как спектроскопическая линейка ., Annual Review of Biochemistry 47: 819-846 (1978). | PubMed |
- Талер, К., Кушик, С. В., Бланк, П. С., и Фогель, С. С., Количественная многофотонная спектральная визуализация и ее использование для измерения резонансного переноса энергии ., Biophysical Journal 89: 2736-2749 (2005). | PubMed |
- Ting, AY, Kain, KH, Klemke, RL, and Tsien, RY, Генетически кодируемые флуоресцентные репортеры активности протеинтирозинкиназы в живых клетках ., Proceedings of the National Academy of Sciences (USA) 98 : 15003-15008 (2001). | PubMed |
- Tramier, M., Gautier, I., Piolot, T., Ravalet, S., Kemnitz, K., Coppey, J., Durieux, C., Mignotte, V., Coppey-Moisan, M., Пикосекундная гетеро-FRET микроскопия для исследования белок-белковых взаимодействий в живых клетках ., Biophysical Journal 83: 3570-3577 (2002). | PubMed |
- Tron, L., Szollosi, J., Damjanovich, S., Helliwell, S.H., Arndt-Jovin, D.J., Jovin, T.M., Проточно-цитометрическое измерение переноса энергии резонанса флуоресценции на поверхности клеток.Количественная оценка эффективности переноса для каждой клетки ., Biophysical Journal 45: 939-946 (1984). | PubMed |
- Truong, K., Sawano, A., Mizuno, H., Hama, H., Tong, KI, Mal, TK, Miyawaki, A., and Ikura, M., FRET на основе in vivo визуализация кальция с помощью новой слитой молекулы кальмодулин-GFP ., Nature Structural Biology 8: 1069-1073 (2001). | PubMed |
- Цзянь Р.Y., Bacskai, B.J. и Adams, S. R., FRET для изучения внутриклеточной передачи сигналов ., Trends in Cell Biology 3: 242-245 (1993). | PubMed |
- Uster, PS и Pagano, RE, Микроскопия резонансного переноса энергии: наблюдения за мембранно-связанными флуоресцентными зондами в модельных мембранах и живых клетках ., The Journal of Cell Biology 103: 1221-1234 (1986) . | PubMed |
- Валентин, Г., Verheggen, C., Piolot, T., Neel, H., Coppey-Moisan, M., and Bertrand, E., Фотопреобразование YFP в CFP-подобные частицы во время экспериментов FRET с фотообесцвечиванием акцепторов ., Nature Методы 2: 801 (2005). | PubMed |
- van Munster, EB, Kremers, GJ, Adjobo-Hermans, MJW, and Gadella, TWJ, Jr., Измерение резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET) путем постепенного фотообесцвечивания акцептора ., Journal of Microscopy 218: 253-262 (2005). | PubMed |
- van Rheenen, J., Langeslag, M., and Jalink, K., Коррекция конфокального сбора для оптимизации отображения резонансного переноса энергии флуоресценции с помощью сенсибилизированного излучения ., Biophysical Journal 86: 2517-2529 ( 2004 г.). | PubMed |
- van Roessel, P. и Brand, A.H., Визуализация в будущее: визуализация экспрессии генов и взаимодействия белков с флуоресцентными белками ., Nature Cell Biology 4: E15-E20 (2002). | PubMed |
- van Thor, JJ и Hellingwerf, KJ, Применение флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET) с использованием зеленого флуоресцентного белка ., В Green Fluorescent Protein: Applications and Protocols (Methods in Molecular Biology, Volume 183) , Хикс, Б.В. (ред.), Humana Press, Тотова, Нью-Джерси, страницы 101-119 (2002). | Amazon |
- Вандерклиш, П. В., Крушель, Л. А., Холст, Б. Х., Галли, Дж. А., Кроссин, К.L., and Edelman, G.M., Маркировка синаптической активности в дендритных шипах кальпаиновым субстратом, проявляющим флуоресцентный резонансный перенос энергии ., Proceedings of the National Academy of Sciences (USA) 97: 2253-2258 (2000). | PubMed |
- Wallrabe, H. и Barroso, M., Конфокальная микроскопия FRET: исследование кластерного распределения комплексов рецептор-лиганд в эндоцитарных мембранах ., В Молекулярная визуализация: FRET-микроскопия и спектроскопия , Periasamy, A.и Дэй, Р. Н. (ред.), Oxford University Press, Нью-Йорк, страницы 95-111 (2005). | Молекулярная визуализация |
- Wallrabe, H., Elangovan, M., Burchard, A., Periasamy, A., and Barroso, M., Конфокальная микроскопия FRET для измерения кластеризации комплексов лиганд-рецептор в эндоцитарных мембранах ., Biophysical Журнал 85: 559-571 (2003). | PubMed |
- Wallrabe, H. и Periasamy, A., Визуализация белковых молекул с использованием микроскопии FRET и FLIM ., Current Opinion in Biotechnology 16: 19-27 (2005). | PubMed |
- Wallrabe, H., Stanley, M., Periasmy, A., and Barroso, M., Одно- и двухфотонная флуоресцентная резонансная микроскопия с переносом энергии для установления кластерного распределения комплексов рецептор-лиганд в мембранах эндоцитов ., Journal of Biomedical Optics 8: 339-346 (2003). | PubMed |
- Уотроб, Х. М., Пан, К.-П., и Баркли, М.D., Двухступенчатый FRET как структурный инструмент ., Журнал Американского химического общества 125: 7336-7343 (2003). | PubMed |
- Weiss, S., Измерение конформационной динамики биомолекул с помощью флуоресцентной спектроскопии одиночных молекул ., Nature Structural Biology 7: 724-729 (2000). | PubMed |
- Ву П. и Бранд Л., Резонансная передача энергии: методы и приложения ., Analytical Biochemistry 218: 1-13 (1994). | Аналитическая биохимия |
- Xia, Z. and Liu, Y., Надежное и глобальное измерение резонансного переноса энергии флуоресценции с использованием флуоресцентных микроскопов ., Biophysical Journal 81: 2395-2402 (2001). | PubMed |
- Yang, X., Xu, P., and Xu, T., Новая пара для меж- и внутримолекулярного измерения FRET ., Biochemical and Biophysical Research Communications 330: 914-920 ( 2005). | PubMed |
- Zaccolo, M., Использование химерных флуоресцентных белков и резонансного переноса энергии флуоресценции для мониторинга клеточных ответов ., Circulation Research 94: 866-873 (2004). | PubMed |
- Зал Т. и Гаскойн Н. Р. Дж., Визуализация эффективности FRET с поправкой на фотообесцвечивание живых клеток ., Biophysical Journal 86: 3923-3939 (2004). | PubMed |
- Чжан Дж., Ma, Y., Taylor, SS, and Tsien, RY, Генетически кодируемые репортеры активности протеинкиназы A показывают влияние связывания субстрата ., Proceedings of the National Academy of Sciences 98: 14997-15002 (2001 ). | PubMed |
- Циммерман, Т., Ритдорф, Дж., Гирод, А., Джорджет, В. и Пепперкок, Р., Спектральная визуализация и линейное размешивание позволяют повысить эффективность FRET с помощью новой пары FRET GFP2-YFP ., FEBS Letters 531: 245-249 (2002). | PubMed |
FRET МИКРОСКОПИЯ И СПЕКТРОСКОПИЯ: Shock
МОЛЕКУЛЯРНОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕ: FRET МИКРОСКОПИЯ И СПЕКТРОСКОПИЯ
Редакторы: Аммаси Периасами, PhD; Ричард Н.День, PhD
Библиографические данные: Oxford University Press, Inc, 2005. ISBN: 0-19-517720-7. Название серии: Методы физиологии Американского физиологического общества, серия ; 312 стр., Твердая обложка, 95 долларов США.
Экспертное заключение рецензента
Описание: Флуоресцентная микроскопия предоставила обширную информацию о структуре и функциях клеток. Микроскопия с резонансным переносом энергии Фёрстера (FRET) — это особая ветвь этой области, основанная на открытии того, что прямая передача энергии может происходить между двумя разными флуоресцентными зондами с перекрывающимися спектрами излучения и возбуждения.Передача энергии может происходить только на короткое расстояние (1-8 нм). Это означает, что можно собирать информацию о близости биомолекул в живых клетках и изучать внутримолекулярные и межмолекулярные взаимодействия в режиме реального времени. Эта красивая книга в твердом переплете представляет собой обзор основ теории и практического применения FRET-микроскопии. Он включает 16 глав по различным темам, от «FRET-микроскопии для локализации белков» до «картирования молекулярных взаимодействий и транспорта в клеточных мембранах».«Основное внимание в книге уделяется биофизике и биохимии. Цель: Книга является частью серии « Методы в физиологии »Американского физиологического общества . По словам редакторов, ее целью является рассмотрение технологических достижений в микроскопии FRET таким образом, чтобы «сделать эти методы молекулярной визуализации более понятными для всех читателей». Цели микроскопии FRET заключаются в том, чтобы «обеспечить высокое пространственное и временное разрешение сигналов с целью локализации и количественной оценки белок-белковых взаимодействий в живых образцах. .» Аудитория: Книга предназначена в первую очередь для фундаментальных научных и клинических исследователей (аспирантов, докторантов и ученых), заинтересованных в применении флуоресцентной микроскопии в изучении клеточной биологии. Книга будет оценена широкой аудиторией исследователей. интересуется химией, биофизикой и биохимией. Особенности: Эта книга представляет собой захватывающее актуальное резюме FRET-микроскопии, включая обзор фундаментальных принципов, методов анализа, выбора фильтров, использования флуорохромов и советов. по анализу данных.Спектр методов широк и включает конфокальную микроскопию, биолюминесцентный FRET, фотообесцвечивание FRET, а также временную корреляционную спектроскопию и спектроскопию корреляции изображений. Каждая глава содержит введение и обширный список литературы. Рисунки и схемы сделаны хорошо и информативно, повсюду использован цвет. Книга тщательно отредактирована, и ее приятно читать. Авторы — выдающиеся специалисты в своей области. Оценка: Это кладезь информации для тех, кто хочет использовать FRET-микроскопию для изучения белок-белковых взаимодействий.Основная сила этой книги в том, что она целенаправленна и в то же время исчерпывающа. Каждый автор исследует разные аспекты области. Книга написана четко, тщательно отредактирована и увлекательна. Предполагается, что читатель имеет общее представление об основах физики и биохимии. Я настоятельно рекомендую эту книгу всем, кто интересуется искусством и наукой о флуоресцентной микроскопии. Это будет ценный ресурс и практическое руководство на долгие годы.
Рецензент:
Брюс А.Фендерсон, доктор философии
(Университет Томаса Джефферсона)
Флуоресцентный резонансный перенос энергии — Литература
Обзор раздела:
Понимание динамических взаимодействий между белками в живых клетках является фундаментальным для базовых знаний основных концепций, лежащих в основе молекулярной и клеточной биологии. За последние несколько лет быстрое развитие флуоресцентных белков и их применение в качестве продуктов слияния и биосенсоров значительно расширило молекулярный инструментарий, доступный для исследования тайн клеточной физиологии и патологии.В связи с этим флуоресцентный (или Фёрстеровский) резонансный перенос энергии ( FRET ) становится мощным методом оптической микроскопии для исследования физиологических процессов с высоким временным и пространственным разрешением. Ссылки, перечисленные ниже, выделяют важные литературные источники для обзорных статей и оригинальных исследовательских отчетов по созданию и применению флуоресцентных белков в экспериментах по резонансному переносу энергии.
Источники литературы
Обзор гитары Fret-King Super-Matic — Premier Guitar
Слушайте:
В недавнем выпуске Rig Rundown на сайте premierguitar.com, Black Crowes and North Гитарист Mississippi All Stars Лютер Дикинсон назвал настройку «микросекундной к микросекундной битве ». Для многих навязчивых игроков, что недалеко от правда. А если ты фанат тюнинга, кто переключает между настройками и гитарами в представление? Ну, это может многое добавить переменных — и стресса — довольно быстро.
Мечта о самонастраивающейся системе вероятно, был рядом с электрическими сама гитара. И рассмотренный здесь Fret-King Super-Matic — не первая гитара. попытаться совершить подвиг. Но с точки зрения простоты использования и универсальности, Super-Matic может быть самый элегантный и практичный удар по самонастройке системы пока нет.
Из разума беспокойного
Innovator
Трев Уилкинсон, мозг, стоящий за
Super-Matic возился с
дизайн электрогитары на протяжении десятилетий, и
его аппаратные инновации входят в число
более длительные разработки последних 30
годы.Его роликовая гайка Wilkinson, которая
привлек внимание публики к игре на гитаре, когда
особенность на Fender’s Strat Plus в 1987 году,
остается широко используемым и влиятельным. А также
его тюнеры блокировки и мосты идут к
части для гитаристов, улучшающих и модифицирующих свои стандартные инструменты. Уилкинсон
наверное мог бы почивать на лаврах на этом
точка. Но поскольку его продолжающаяся работа с
Бренды Fret-King и Vintage подтверждают,
Уилкинсон видит простор для инноваций —
большие и маленькие — даже в самых знаковых
конструкции электрогитары.
На первый взгляд есть небольшой намек на на что способна эта гитара.Сердце система самонастройки Wilkinson ATD Мост HT440, который является обычным Достаточно взглянуть на первый взгляд, но на при ближайшем рассмотрении оказывается маленькое инженерное чудо. Просто позади каждого полностью регулируемое седло есть шпиль, который закрепляет строку. Каждый шпиль прикреплен к индивидуальному двигателю и коробке передач. В интерфейс сборки двигателя и коробки передач через микропроцессор с шестигранным датчиком просто перед мостом и селектор настройки для доступа к предустановкам.
Интерфейс между плеером и Селектор настройки сам по себе довольно ненавязчивый. Есть очень маленький (и сначала его легко пропустить) кнопка, установленная на высокочастотной стороне звукосниматель, а на басовой стороне небольшой овальный ЖК-дисплей, который передает простые данные о предустановленном выборе, есть ли примечание резкий или плоский (когда встроенный хроматический тюнер используется), и предупреждения о состоянии системы для порванных струн, времени автономной работы и частичного тюнинг. Вся система работает от 9-вольтового аккумулятор, которого, по словам Фрет-Кинга, хватит до 250 настроек.
Сама гитара красивый, современный крутить профиль Strat. Из двух частей Тело из ольхи имеет внушающий доверие вес, особенно со всей бортовой электроникой — но могли бы извлечь выгоду из более плавного контуры тела по краям тела, которые время от времени будет давать вам удар в ребра. Гриф в масштабе 25 1/2 дюймов с грифом из розового дерева и ладами среднего размера. в основном удобная тонкая C-образная форма, если немного плоско на мой вкус.
Стандартная электроника гитары включить смещение Wilkinson WHHBZ33 полюсные хамбакеры «Зебра» и Одинарная катушка Wilkinson WHSM в среднее положение.Они подключены через 5-позиционный селекторный переключатель и Вилкинсон Система Vari-coil, которая позволяет варьировать разделение с использованием самого кормового регулятора тембра, что, возможно, менее неуклюже и тонально другой подход, чем двухтактный горшок отвод катушки.
Настройка на лету
Мост Wilkinson ATD HT440 не
полностью интуитивно понятен, если вы новичок в технологиях,
но это очень оптимизированная система
с минимумом элементов управления, которые легко
почувствуйте, особенно если вы побалуйте себя
к видеоуроку от Wilkinson
на сайте Fret-King (fretking.com). Как только вы привыкнете к
используя кнопку основной функции (которая
работает как переключатель включения / выключения и предустановка
селектор) и изучите символы и предустановку
числа, отображаемые на ЖК-дисплее, ATD
HT440 работает почти так же естественно, как
педальный тюнер.
Заводские предустановки включают стандартные EADGBE, Drop D, Open G, Open E, DADGAD и GDFCDG. И установка вверх Super-Matic для любого из них простой процесс удержания функции нажимайте кнопку, пока не появится цифра 1, нажимая кнопку несколько раз, пока вы найти число, которое соответствует желаемый пресет и бренчание один раз.Вы услышите быстрый всплеск активности от миниатюрные моторы в мосту, как они поворачивают кабестаны, и если у вас есть громкость гитары, странный звук струн, меняющих высоту тона в унисон. Иногда это займет секунду медленно бренчать, чтобы система могла прочитать, обработать и перенастраивайте каждую ноту, но редко требуется треть бренчать, если вы терпеливы и неторопливы.
Один из самых крутых аспектов Super-Matic — это возможность хранить ваши собственные настройки, что также несложно, если чуть более сложный процесс называется Strum ’N’ Store.Ты должен найти и наберите настройку самостоятельно, используя встроенный хроматический тюнер. Но как только ты есть настройка, вы держите кнопку на 10 секунд, чтобы разблокировать ATD Система HT440, прокрутите до заданного номера вы хотите использовать и играть на струнах. Когда на ЖК-дисплее загорится зеленый свет, что настройка сохранена, вы нажимаете кнопку кнопку еще на 10 секунд, чтобы повторно заблокировать система.
Есть ограничения на Strum ’N’ Магазин. Есть двухступенчатый диапазон высоты тона ограничение как в плоском, так и в остром направлениях для каждой строки.Итак, игроки, которые предпочитают низкие строчки, которые понижают шестую струну до C, например, не сможет использовать предустановленная функция. Кабестаны также могут обрабатывать только максимальную толщину струны 0,011 на 1-й строке и 0,052 на 6-е место, которое охватывает большинство игроков, но оставляет некоторые фанаты тяжелых струн и слайдеры кто любит более толстую проволоку из смеси.
Независимо от настройки, Супер- Matic обладает тонкоформирующим потенциалом, чтобы получить от этого максимум удовольствия. Комбинация системы Vari-coil и 5-позиционный Switch привносит много звуковых ароматов в кончиками пальцев.Запуск Super-Matic прямо в Vox TB35C2 Bruno и Fender Vibroverb, DADGAD и открытый строй G агрессивно рычал и наполнен гармониками, особенно через горячий бридж хамбакер. Отключение регулятора Vari-coil и разделение бриджа хамбакер дал DADGAD устанавливает более тихий, но кристальный качество, подчеркивающее гармоничность детализации, в то время как открытые аккорды G отбиваются с дерзкий Кит Ричардс.
Вердикт
Fret-King Super-Matic действительно
внушительное количество вещей на сингл
гитара, что не должно удивлять
учитывая творческий послужной список его создателя.Ни одна из функций Super-Matic не пахнет
из уловок, хотя. ATD HT440
система станет гладкой и интуитивно понятной, как только вы
потратьте несколько минут, чтобы познакомиться
с его ритмами и командами.